1、材料血液相容性表征,前言 血液相容性 评价技术 接触活化 补体激活 凝血酶的产生 纤维蛋白原和纤维蛋白间的转化 纤维蛋白的溶解 蛋白质的水解 炎症反应 血小板的激活,前言,过去的十年里科技工作者对用于合成抗凝血生物材料的本体材料以及合成方法和途径作了大量的研究,并取得了显著的成果，即便如此,研究中也还存在诸如材料机械性能与抗凝血性能不能兼得之类的问题。为了更好的解决存在的问题,以期获得完美的抗凝血生物材料,我们就需要对合成的材料进行全面的表征,通过表征结果反过来指导我们进行正确的实验设计, 血液相容性,三个水平上的反应血小板血栓形成 凝血系统、纤溶系统激活 免疫成份改变、血小板受体、ADF(二
2、磷 酸腺苷)、前列环素释放, 血液相容性 评价技术 接触活化 补体激活 凝血酶的产生 纤维蛋白原和纤维蛋白间的转化 纤维蛋白的溶解 蛋白质的水解 炎症反应 血小板的激活, 接触活化,材料与血液接触后的凝血酶原时间(PTT)活化部分凝血激酶时间(aPTT)体外复钙化时间(RTT), 血液相容性 评价技术 接触活化 补体激活 凝血酶的产生 纤维蛋白原和纤维蛋白间的转化 纤维蛋白的溶解 蛋白质的水解 炎症反应 血小板的激活, 补体激活,血小板受到刺激时会激活补体，而补体中的蛋白成分即补体第三组分(C3)，补体第四组分(C4)和补体第五组分(C5)就会吸附到异物表面，就会激活血小板，促进血小板的黏附和
3、聚集，造成凝血 用SDAPAGE凝胶电泳测定单个组分的含量, 血液相容性 评价技术 接触活化 补体激活 凝血酶的产生 纤维蛋白原和纤维蛋白间的转化 纤维蛋白的溶解 蛋白质的水解 炎症反应 血小板的激活, 凝血酶的产生,正常的血液中不含凝血酶(IIa)，当血液与异物接触或者受到创伤时，血液里的凝血酶原(II)在组织凝血活酶xa的作用下就会生成凝血酶 .它的含量的增多会直接导致血液凝固速度加快 . 酶免疫法(EIA) 凝血酶(IIa) 酶联免疫吸附实验(ELISA) 凝血酶原片段和凝血酶抗凝血酶 复合物, 血液相容性 评价技术 接触活化 补体激活 凝血酶的产生 纤维蛋白原和纤维蛋白间的转化 纤维蛋
4、白的溶解 蛋白质的水解 炎症反应 血小板的激活, 纤维蛋白原和纤维蛋白间的转化,血液凝固的最后步骤是纤维蛋白原(I)在凝血酶(IIa)的作用下生成纤维蛋白凝块(Ia) 纤维蛋白记数器(fibrintimer)对凝血酶时间的测定来判断纤维蛋白原和纤维蛋白间的转化程度。, 血液相容性 评价技术 接触活化 补体激活 凝血酶的产生 纤维蛋白原和纤维蛋白间的转化 纤维蛋白的溶解 蛋白质的水解 炎症反应 血小板的激活, 纤维蛋白的溶解,体内的凝血过程和纤维蛋白溶解过程处于平衡状态测定凝血酶时间和毒蛇凝血酶时间纤维蛋白记数器, 血液相容性 评价技术 接触活化 补体激活 凝血酶的产生 纤维蛋白原和纤维蛋白间的
5、转化 纤维蛋白的溶解 蛋白质的水解 炎症反应 血小板的激活, 蛋白质的水解,蛋白质的水解会导致血浆内纤维蛋白纤维蛋白原降解产物(FDP)的增多，这些产物会占有血小板的纤维蛋白原黏附点(GPIIbIIIa受体)使血小板表面GPIIbIlia受体不能被正常利用，这将直接导致血小板参与凝血的功能的减退；同时血小板GPIIbIIIa受体被暴露于大量的激活剂中，中性粒细胞活化释放的弹性酶(elastase)能直接水解GPIIbIIIa受体，氧自由基使白细胞活化释放的蛋白水解酶也能直接水解GPIIbIIIa受体。因此，弹性酶释放地越多，血小板可利用的受体越少，其被激活地可能也越小，因此，可以通过测定弹性酶
6、在血浆中的含量来间接判断血小板是否激活, 血液相容性 评价技术 接触活化 补体激活 凝血酶的产生 纤维蛋白原和纤维蛋白间的转化 纤维蛋白的溶解 蛋白质的水解 炎症反应 血小板的激活, 炎症反应,正常的人体组织与器官同外界异物接触时，会不同程度的发生炎症反应 导致人体内的一些反映炎症变化的因子在体液中含量的变化，如白介素一1B(IL一1B)和白介素一6(IL一6) 可用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定。, 血液相容性 评价技术 接触活化 补体激活 凝血酶的产生 纤维蛋白原和纤维蛋白间的转化 纤维蛋白的溶解 蛋白质的水解 炎症反应 血小板的激活, 血小板的激活,判断血小板是否发生激活可以通过观察
7、吸附在材料表面的血小板的保持(retention)、分散情况(spreading)和测定血小板血栓球蛋白(-TG)，血小板第4因子(PF一4)以及血小板受体抗拮剂CD62(GMP一140或Pselection)和CD63(糖蛋白53)的含量来判断 -TG、PF一4、CD62及CD63含量测定酶免疫分析方法(EIAs) 流式细胞术(Flow cytometric analysis),结语,从以上论述可看出对抗凝血生物材料的表征已不是单一技术和方法的使用,而应该是多种分析测试技术的综合。这是由于生物材料抗凝血性能的好坏不是单一因素可以决定的,对于不同的因素需要不同的技术和手段这样我们就能够更加清楚的了解和掌握抗凝血生物材料表面的结构和性能与其生物相容性之间的关系,从而使得对抗凝血生物材料的研究得到更好的发展并最终在临床上得到广泛的应用,谢 谢,
