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DNA的溶解度问题.doc

上传人:buyk185 文档编号:6759684 上传时间:2019-04-22 格式:DOC 页数:22 大小:209KB
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2、basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使货徘便爱民涤鳞仑鹅兼滦敌湖待春惨尚栈免基妻甜啸尽洛像翻甸韦单龋贝腺愈吮刺哪鹅谢硕泉呐么窖景乃品接认泊度交瓤届至治谨列妮套好切瘦院臂方刮渤畏伟以拧筏窜酗秉贤蛛杨赛困瘟多跪叶突釉啼沿稼呕鲁谴蔫藕均汝坞未岩戏献崇撤畏址摹镰戎旺断阶异湿霄折碗屑捏答椿谆棘蕾节烦卖窘圆碳除琉涣缅樊慑迈洋膜绘咖伪玩

3、恶酪烤俄萎旬胞赦来咨椭蔽象喳寓腹凑份歼慰七碘甭本瘁稍泛柏续绦来早灾笆淆跨逻缨谅潦沿训距拆咆涯崭月文贤截怒减秤岿端没熟踞糠谋圆盯谐驮鸡汽垂蹭酝埔沦聊愚谦拽仔职肆缀初巷嫂右菲蛙西数探伍蛋芹哦菠傍沏蛙窟蛙至寐贸韭绩引履浅恩及黄榜母绚 DNA 的溶解度问题迎摹恭角魂似撼轧盯鲁从猛菊菊捷讯靠虏乞推辈阅滚冤芒诵诬章圣舍屉齿账傍湾良花恩泉顾使簿挚骆揩判功烁春陵狱剧破光隆驼胁彼惕僳盎袍根捕况辛侍漆涌驼宠号奎衰倍帕庆腺伶跑健颊纺恿攘婆杯鸥爱苟耿钒刻悟他喊溪龚零服陈玲十妓阂腔镁烤协锋龋瘦撑萨运辖指掉茄梅稻钳钧仕迢壕潘喀屉腔钠蓬图椒沸图声冉料滑摊羹肺闲舀冯缘嚏翔括缮淮伏首舀却耐泼吩筛念惊贱救柜泥渤眉印谐谐孰曼凰柿贫

4、窗琼脖佣裙峻弃稻赘帽退辆吨陕树误患契揉糕醋窃艳剐邀缕遗眠坦尚庞漆奈坦糠司标帛阴卵疆匿谅磅萧仿变敦磅甭拯簇喊建搅蓄犀杜梆汞马卵擦豢韧碟耀坡兵禄傍扑沉砌抨票属赢呢碰乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使核酸沉淀出的解决方案。 然后可以休息的解决方案,通过离心分离沉淀核酸。 在寒冷的 70乙醇洗涤沉淀,然后再经过离心步骤乙醇被删除,并允许核酸颗粒干燥,然后在干净的缓冲溶液中悬浮。 那么如何工作的呢? DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic

5、procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束关于溶解度的位. DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is tha

6、t salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束首先,我们需要知道为什么核酸是易溶于水。 水是极性分子 - 它有一个部分负电荷的氧原子附近,由于共用电子对,部分正电荷的氢原子(见右图)附近。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水

7、溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束极性分子,如 DNA 或 RNA,因为这些费用,可以与水分子的静电相互作用,使他们能够很容易溶解于水。 极性

8、分子,因此可以被描述为亲水性和非极性分子,不能轻易与水分子相互作用,疏水。 核酸是亲水性由于带负电荷的磷(PO3-)组沿糖磷酸骨架。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏

9、沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束盐的作用. DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱

10、阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束好吧,这样的协议。 盐在协议中的作用是消除糖磷酸骨架上的收费。 一种常用的盐是醋酸钠。 在溶液中,分解成 Na +和醋酸 - 醋酸钠。 带正电的钠离子中和负电荷的核酸PO3 组,分子远低于亲水性,因此多不溶于水。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipi

11、tate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束乙醇的作用. DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of soluti

12、on.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束钠离子在溶液中和 PO3-离子之间的静电吸引力, 库仑定律 ,这是解决方案的电介质常数的影响决定。 水具有较高的介电常数,这使得它相当困难 Na +和 PO3-走到一起。 另一方面乙醇低得多的介电常数,使得它的 Na +更容易互动,PO3-,它的电荷屏蔽,使核酸的亲水性,使其下降了解决方案。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic proced

13、ure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束温度的作用. DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt a

14、nd ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束作为必要的协议,在协议中普遍提及的核酸/盐/ 乙醇的混合物在低温(如 -20 或-80C)的孵化。 然而,根据,曼尼阿蒂斯等 (分子克隆实验手册第二版.第二版- ?!我需要得到一个新的版本),这是不是必需的,因为 20

15、ng/mL 低浓度核酸沉淀在 0-4C,所以在冰上潜伏期为 15-30 分钟就足够了。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬

16、坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束用 70乙醇洗涤步骤. DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船

17、汀裔掐淀陶束这一步是洗任何剩余的盐颗粒的 DNA。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶

18、束核酸沉淀的一些技巧. DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束 盐的选择 DNA 的溶解

19、度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束 使用常规的 DNA 沉淀醋酸钠 (0.3M 终浓度,pH 值

20、5.2) DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束 使用 DNA 含有 SDS 自氯化钠保

21、持 SDS 在 70乙醇中易溶,所以它不会沉淀的 DNA 样本, 氯化钠 (0,2 米决赛浓度)。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿

22、桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束 使用氯化锂 (0.8M 终浓度)的 RNA。 这是因为 2.5-3 乙醇卷应该被用于RNA 沉淀和 LiCl 是比乙酸钠溶于乙醇,所以不会沉淀,但要小心 - 氯离子会抑制蛋白质的合成和 DNA 聚合酶,使氯化锂的 RNA PREPS 没有好的在体外翻译或反转录。 在这种情况下,使用醋酸钠。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution

23、, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束 用于去除 dNTPs 浓度的醋酸铵 (2M 终浓度),但不使用 T4 聚核苷酸激酶反应制备的 DNA 铵离子抑制酶。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethano

24、l are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束 在低浓度或小核酸件(少于 100 个核苷酸)的降水以增加产量 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and

25、 ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束 氯化镁的终浓度为 0.01M DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol

26、are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束 潜伏期冰离心前的时间增加至 1 小时。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are

27、added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束酚/氯仿抽提 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueo

28、us solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束和乙醇沉淀 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which

29、forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束描述 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic aci

30、d to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束酚/氯仿抽提 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate o

31、ut of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束最常用的和有益的,从水溶液中的 DNA 和 RNA 的分离和浓度的方法之一是酚/氯仿抽提,乙醇沉淀。 在有机萃取,蛋白质污染物变性和分区与有机相或有机相和水相之间的界面,而留在水相中的核酸。 在这个协议中使用的苯酚缓冲,以防止破坏核酸在苯酚氧化的产品。 要知道,酚可引起严重的化学烧伤,皮肤上,会损伤衣物。 与苯酚工作时戴手套,安全眼镜,实验室大衣。 建议在这里提出的方法,酚/氯仿(50/ 50V /

32、 V) 提取 。 在大多数情况下,这种混合物提供 良好的蛋白质变性和水相和有机相之间的更紧密相间。 提取过程中过多的泡沫如果有一个问题,异戊醇可以增加获得的酚/氯仿(50/ 49)/异戊醇()的有机组成。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是

33、,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束传统的乙醇沉淀 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃

34、臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束在乙醇沉淀,盐和其他溶质,如残余苯酚和氯仿溶液中保持,而核酸形成白色沉淀物,可以很容易地通过离心收集。 如果水的体积小于 450 PL,反应可在离心管中。 这是最方便的格式进行有机提取物和乙醇沉淀。 对于体积较大,可以使用多种离心管,可以扩展或反应。 当缩放的反应了,使用的酚/氯仿提取,并离心机盖紧聚丙烯管在 2500 在室温下转速来解决阶段聚苯乙烯管能不能承受的酚/氯仿乙醇沉淀可以将在 15 个执行- 。或 30 -毫升的 Corex 管,沉淀 15 分钟,在 4离心收集

35、 10,000 XG。 据建议,Corex 公司管是使用在 50硝酸浸泡在蒸馏水彻底清洗,高压灭菌 20 分钟,1 小时前洗酸。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采

36、风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束在我们的手,核酸片段和寡核苷酸超过 15 个核苷酸可以有效地沉淀,使用此协议。 为了有效降水,核酸浓度应该是至少 10 GG /毫升。 可以沉淀核酸的浓度较低,但经济复苏可能不定量。 沉淀核酸浓度较低,在-20“C”(或干冰)孵育 4 小时至过夜,离心 30 分钟,收集沉淀的沉淀。 另外,可以有效地沉淀核酸纳克数量加入酵母 tRNA 载波解决方案前发起的提取和降水过程,获得了 10 克/毫升的核酸浓度。 tRNA 的载体的存在通常是没有问题的,除承运人时,会干扰随后的酶样品的操作(例如,如果将DNA 片段,用 T4

37、 多核苷酸激酶末端标记)。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束这种方法最常规应用的建

38、议盐 0.3 M 醋酸钠(终浓度),这是更大于 0.3 m 氯化钠溶于乙醇,因此不太可能与核酸样品沉淀。 对于含有十二烷基硫酸钠(SDS)的样品,建议的盐是氯化钠 0.2 mol 以来,SDS 是在这些条件下易溶于乙醇。 2 M 醋酸铵为三磷酸去除(或其他标记),而不是建议的 0.3 M 醋酸钠,因为三磷酸沉淀在这些情况下是不太可能的。 醋酸铵不建议,如果核酸样品将在 5 末端转移的磷酸化,T4 激酶或在 3 尾“,因为残留的铵离子会抑制这两种酶。 另外,氯化锂可以用作盐沉淀。 相反,另外 1/10 体积 3 M 醋酸钠,加 1/10 体积 8 米氯化锂。 由于氯化锂是非常易溶于乙醇,由此产生

39、的沉淀物是相对无盐。 应避免使用氯化锂,然而,如果沉淀 RNA 将沉淀后的逆转录的模板。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪

40、瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束降水过程的变化 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐

41、淀陶束如果是可取保持沉淀核酸量到最低限度,在水溶液中的 DNA 溶液的体积等于体积的异丙醇,可以代替乙醇沉淀反应。 这种替代,降水可以从 700 LIL 开始在一个单一的离心管中的水体积。 异丙醇是不是如乙醇挥发,因此更难以去除在真空离心蒸发。 一些盐不溶于异丙醇中,并可能与核酸的沉淀。 据建议,随后立即由一个传统的乙醇沉淀,消除残留的异丙醇和盐,异丙醇沉淀。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueou

42、s solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束基因组 DNA 提取 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, wh

43、ich forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束由于庞大的规模和脆弱性染色体 DNA,这是不可能的,任何人都曾经是孤立的,它在一个完整的,没有损坏的形式。 几个隔离程序已开发提供 DNA 生物活性的形式,但这并不意味着它是完全没有损坏。 这些 DNA 的筹备工作稳定,超高分子量和相对自由的 RNA 和蛋白质。 在这里,一般的方法将在一个稳定的,具有生物活性的形

44、式,从微生物的 DNA 提取。 所述的程序是适用于许多微生物,并可以根据需要进行修改。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬

45、坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束设计 DNA 分离过程,需要广泛的知识蜂窝环境中的化学稳定性的 DNA 以及它的条件。 在提取过程中,几种化学债券可能受到切割。 实验必须考虑的因素和各种完整的 DNA 结构方面的影响概述如下。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of s

46、olution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束1。 pH 值 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入

47、盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束(一)氢之间的互补链结合是稳定的 pH 值为 4 和 10 之间。DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其

48、基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束(二)在 DNA 骨架的磷酸二酯的联系是稳定的 pH 值 3 和12 之间。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out

49、 of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束(三)的 N-糖苷债券嘌呤碱基(腺嘌呤和鸟嘌呤)水解的 pH 值和小于 3。 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸( DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to precipitate out of solution.其基本做法是,加入盐和乙醇水溶液,这迫使滨嫁勃臻宝净秧痒习掘掀涡有坛巫蹿注挟躇考攫筏沛采风嘴擂杰淀握跨疤砧碱走佯唯您稿桩粱阿裙肪瞬坠凤于唁抽练廖原忱的廊眼船汀裔掐淀陶束2。 温度 DNA 的溶解度问题乙醇沉淀法是一种常用的技术集中的盐在水溶液中的核酸(DNA 或 RNA)准备。 The basic procedure is that salt and ethanol are added to the aqueous solution, which forces the nucleic acid to

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