1、2019/4/21,1,细菌感染的诊断与防治,2019/4/21,2,第一节 细菌学诊断,可以引起人类感染的病原菌有成百上千种，对于每一例患者来说，究竟是何种细菌引起的感染？是内源性感染或是外源性感染？是医院感染或是社会感染？是偶发感染或是大规模流行性感染？要明确这些问题都必须进行准确、快速的病原学鉴定。因此，病原学检测与鉴定是监测和防治传染病的最关键，最重要的步骤。,2019/4/21,3,收集临床标本,提供相关临床资料 正确取材,形态学检查,分离培养及鉴定,动物试验,生化反应,药敏试验,血清学鉴定,形态学鉴定,分子生物学鉴定,快速检测,免疫学检测,核酸检测,自动化检测,病原菌的检验程序,2
2、019/4/21,4,一、临床标本采集送检及原则,尽早采集标本 不同疾病取不同材料 不同病程取不同材料 严格无菌操作，尽量避免杂菌污染 即使送检，正确 运送 准确作好标识,2019/4/21,5,致病菌的检验程序,药物敏感试验,标本,直接涂片检查,分离培养,生化试验,血清学试验,动物试验,明确诊断,初步诊断,分子生物学技术,其他检测技术,2019/4/21,6,二、形态学检查,1. 涂片染色与镜检 革兰染色 抗酸染色 镀银染色 墨汁涂片负染色 2. 不染色标本检查细菌动力 3. 暗视野显微镜检查,2019/4/21,7,三、分离培养与鉴定培养原则 1、营养要求不高的细菌用普通培养基 2、营养要
3、求高的用营养培养基。如血琼脂培养基 3、厌氧菌用厌氧培养基 4、正常菌群部位采集的标本，应使用选择性或鉴别性培养基,2019/4/21,8,鉴定原则1、形态学检查2、生化试验3、血清学试验4、动物试验5、分子生物学技术,2019/4/21,9,五、细菌快速检测法 1.免疫学检测用已知特异性抗血清或单抗，检测标本中相应的细菌性抗原，作出早期诊断。常用方法有： ELISA；直接法、间接法 免疫荧光技术；直接法；间接法 协同凝集试验； 血凝试验； 乳胶凝集试验； 金标技术；,2019/4/21,10,2. 核酸检测,包括核酸探针杂交和PCR。主要用于标本中含量少、生长极为缓慢或难于生长的细菌检测。核
4、酸探针检测较为准确，但操作较复杂； PCR技术快速、敏感，但常受到非特异性因素的影响。,2019/4/21,11,3.临床细菌鉴定系统,主要用于对临床分离获得的细菌进行种、属鉴定和抗生素敏感试验快速自动化的分析。可由细菌鉴定系统和药敏试验系统两部分组成，能够检查出感染的病原菌及其耐药性。对于待测菌的分析，常用数值分类法。该方法以细菌的各种特性同等重要为理论基础，根据每种生化反应特性在不同细菌中出现的概率进行全面分析。通过比较待测菌与分类体系中已知菌的生化特性的相似性，判断待测菌的归属。该方法适于计算机进行大量的数据运算，是自动化分析仪器普遍采用的方法。,2019/4/21,12,HX-21细菌
5、鉴定/药敏分析仪,2019/4/21,13,Typical Culture Laboratory Bench,2019/4/21,14,第二节 细菌感染的特异性预防,特异性预防,人工主动免疫,人工被动免疫,接种抗原性物质， 机体自动产生免疫力,注入免疫物质， 机体被动获得免疫力,产生慢 维持长 用于预防,产生快 维持短 用于治疗或 紧急预防,2019/4/21,15,一、人工主动免疫,所用生物制品，称为疫苗人工主动免疫生物制品的种类包括细菌菌苗、病毒疫苗、新型疫苗（亚单位疫苗、核酸疫苗、治疗性疫苗等）、类毒素、自身疫苗等。,2019/4/21,16,1.死疫苗 选用免疫原性强的标准微生物经大量
6、培养后，用物理或化学方法将其杀死后制成。其虽失去繁殖能力，但仍保持免疫原性目前常用的死疫苗有伤寒、百日咳、钩端螺旋体、乙脑、流脑等疫苗,2019/4/21,17,2活疫苗用减毒或无毒的病原体制成。常用的有卡介苗、脊髓灰质灸疫苗、麻疹疫苗等。此类疫苗进入机体后有一定的增殖能力，类似自然状态下的轻型或隐件感染，免疫系统受刺激的时间长，故一般只需注射一次即可获得较好的免疫效果缺点是不易保存，有效期较短死、活疫苗的比较见表,2019/4/21,18,活疫苗与死疫苗比较,2019/4/21,19,3.类毒素细菌的外毒素经o.3一o.4甲醒处理，毒性消失而保留其免疫原性，即为类毒素常用的类毒素有白喉、破伤
7、风类毒素,2019/4/21,20,4.新疫苗的研制(1)亚单位疫苗不含病原体核酸，仅含能诱发宿主产生中和抗体的蛋白或表面抗原如流感病毒血凝素、神经氨酸酶亚单位疫苗、腺病毒衣壳、脑膜炎球菌、肺炎球菌荚膜多糖亚单位疫苗等(2)基因工程疫苗或DNA重组疫苗(3)核酸疫苗(4)转基因植物疫苗,2019/4/21,21,二、人工被动免疫,生物制品：免疫血清（抗毒素、抗菌血清）、丙种球蛋白、免疫球蛋白、免疫细胞、细胞因子等 1抗毒素 主要有破伤风抗毒素、白喉抗毒素、肉毒抗毒 素及气性坏疽多价抗毒素等。2.胎盘球蛋白和血浆丙种球蛋白此类制剂可作为以上病原体感染的紧急预 防。此外还可用于治疗丙种球蛋白缺乏症
8、患者3.细胞因子,2019/4/21,22,(1)转移因子（TF) 是从外周血、扁桃体、脾脏等部位的白细胞冻融后提取的可透析物制成的低分子物质。能特异性地转移细胞免疫，从而增强受者的细胞免疫功能，主要用于细胞免疫功能低下引的疾病的免疫治疗。如皮肤念珠菌病、肿瘤等。,2019/4/21,23,(2)干扰素（IFN) 是由干扰素诱生剂诱导有关细胞产生的一种具有抗病毒活性及免疫调节效应的糖蛋白。IFN可用于治疗病毒性感染 如乙型肝炎、单纯疱疹性角膜炎、带状疱疹、呼吸道病毒感染等。因其能增强巨噬细胞和NK细胞活性所以也用于多种肿瘤的免疫治疗 (3)肿瘤坏死因子（TNF)是由巨噬细胞、淋巴细胞产生的，能引起培养细胞及肿瘤细胞的坏死并对免疫细胞有调节、诱导作用。现已重组成功可用于肿瘤治疗，但有定的副作用。,2019/4/21,24,(4)白细胞介素2是由活化的T细胞产生的种具有多种生物学效应的淋巴因子。它能促进T细胞、B细胞、NK细胞的增殖、分化增强各种免疫效应细胞的治疗诱导干扰素产生及参与免疫调节等目前已用于多种与免疫相关病的治疗，如肿瘤、病毒感染、自身免疫病、艾滋病等。特别是在肿瘤的免疫治疗中，显示出较好效果.,2019/4/21,25,三、生物制品使用的注意事项 对象途径剂量次数时间禁忌症等,2019/4/21,26,人工主动免疫与被动免疫比较,2019/4/21,27,谢谢大家,
