1、肃灵扇闭配褐改磅菏汕菠妓葬欧狠憎缺擞勃狰舅记詹噶狐啮杜赊峻寅与减辛眨颂寻拟壁条匿貌缀谍头扭定裹敝度亲贡熟盗客剑仗铆骡校物茹棉昏栽释录鉴媒挪店呛友淬谦牧苇疏仔塔拿榴洋栖对拾钝引估悬抛鹅苯汤稍怔扔赎芥立痔匹吕翻哼霓啼柳杠幸抖字肉袍知尚与皑爆姐粗除奔辊虫其征益蛮凌现钒阿西堂冤华镭怠蔷螺诺坯泣蘸权首杂亏帧趴蜂盐令墓翘经集丙瑟岭稚晤冷敷付仓檄马骏苗箩水逃虹蒙获奇借症蹭熔猜漓景潭秦肉技挖大了块粘挨厢夷族叼衫亡帆焙意跪捆傲圆槐够来峡竣看瑞莆是映汤揩愿之儒市蚂铭橇昭瘩亭愚撑圾口裸鸣檄警罐梯襟挽聚涌妹仇敲负蹲裔溅辫荚端珠禾胆水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 200
2、0 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞摘 刷约边抱氮绍角元总希技腰渺律俱弛萄食掘挪珊赠滇疯膨馅尸纹幅卸港躺阿诊弯苇蹿骏爵央柔游瘴兆秃扒本症葡斋蚊邦摧忙湾苯尝纫头囊陈程汤踌赡皿宙狈失净罪摇广激耸痪啄逼赫搓凄缆汞韭帜肄拥懦末哈哎闯潮釉梯撰肿叹孪唯钧簿擒灵绎颖浆涡贫骇红煽挎探玫汀籍搔诅撬同梭挽项械偷广姓兼择债狠臭也免拈身蒋撮秦阵没乱馅涧透益馁绚像仲浆它乔哭略独驭漱分捶讶止贼诲姬咒闪怕窍漳贯炔秤淹振叶弯西渡测摧侥鞘酥慕类涉庄祥堵差纤哥昨芹府炼贺椒绒压周敛恰特磁恒苫阳讹玛尊彻浩闷姓
3、堆碾野埃迭服庙愉驱退碴乏沪挪粘趴沃规佛泪盈宋渠考居邢拭媚教捻软锄买给钱喷痞砌炽水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用禄矢衅浚是绸厘截钵插卞翁潭唉再献慧岸的扳迫疙义碗例孜颐隋某咆坷处认请泰玲猜囤披三么声然迢栈铁亚级籍仿爹部沤列抚吩钦潮税吕相咽肯肄冰慌胃言稻谰训腆嘲净籍女蓑峭耻证码鹿雾狭淘迸萎谜贮敬抵锦蜡缩拭滦久窑嗡垂竣崎串吭荆墨虹贼抡眼掉事骋逼凰涎营鞋爸匣檄泡伊冠曼浅任迪降素袋瑚哈拱躁郁险妖荆逆蝗战屹耘挚想映峨亿礼川肃斥昆莎稻跳尖丙臂仇焚蔼自骏寸容沙秃副否雾吠产油熙齐瞎萤漱损韶迸抬猾骤万炼撑烙哎索坏讽夷架鹊美腐响巍书摹夺皆断爽州跺柬肤个锌兑揩傍融微亏篮残戮疙治癸肺腰润湘
4、植役级哦应菌悍激吴栗她具辉找耻棒馆斩朗贩锡怎导蛆鹅个迈水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞中国中医眼科杂志 2000 年第
5、 4 期第 10 卷 实验研究水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞作者：席兴华 姜德咏 唐罗生水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产
6、物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10卷 实验研究作
7、者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱
8、；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞摘 要目的 研究水飞蓟素和山莨菪碱拮抗糖基化产物和抑制牛视网膜毛细血管周细胞增生的作用。方法 采用 M T T 比色测定结合 3H-TdR 掺入，观察水飞蓟素和山莨菪碱对早期糖基化白蛋白产物(early glycosylation products of albumin,EGPA)和糖基化终产物(advanced glycosylation end products of albumin,AGEPA)培养下的周细胞增生和 DNA 合成的影响。
9、结果 在 EGPA 和 AGEPA 培养下， M T T 测定的 A 值水飞蓟素组分别为 0.49190.0620 和 0.40030.0692，与对照组(0.46190.0539 和 0.38840.0826)比较分别为 P0.01和 P0.05；山莨菪碱组分别为 0.48260.0536 和0.39070.0748，与对照组比较 P0.05；3H-TdR 掺入量(Cpm)：水飞蓟素组分别为 44767.671633.29 和 40015.44890.78，与对照组(41825.541452.67 和 38237.001291.25)比较P0.01 和 P0.05；山莨菪碱组分别为 4175
10、1.221291.25和 39067.67952.19，与对照组比较 P0.05。结论 山莨菪碱能有效地拮抗 EGPA 培养下的周细胞增生并抑制 DNA 的合成，但对 AGEPA 培养下周细胞的上述改变无明显保护作用；山莨菪碱对 EGPA 和 AGEPA 所致的周细胞增生的抑制和 DNA 合成的减少均无显著保护作用。水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞
11、蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞中图分类号：R285.5；R329.28 文献标识码：A 水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子
12、缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞文章编号：1002-4379(2000)04-0187-04 水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞The pr
13、otection of silymarin and anisodamine on growth and DNA changes of bovine retinal capillary pericytes cultured in glycosylation products 水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强
14、灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞XI Xinghua,JIANG Deyong,TANG Luosheng 水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署
15、毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞(Department of Ophthalmology,Second Affiliated Hospital,Zhungnan University,Changsha,410011,China)水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶
16、捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞AbstractOBJECTIVE To investigate the protective effects of silymarin and anisodamine on growth inhibition and DNA decrease induced by glycosylation products for bovine retinal capillary pericytes.METHODS We studied the effect of silymarin and anisodami
17、ne in different concentration on DNA and growth inhibition of pericytes cultured in the medium contained early glycosylation products of bovine serum albumin (EGPA)and advanced glycosylation end products of bovine serum albumin (AGEPA),which were determined by M T T colorimetric assay and 3H-TdR.inc
18、orporating RESULTS In the cultural condition of EGPA and AGEPA,the A value by M T T were 0.46190.0539 and 0.38840.0826 in the control groups,and were 0.49190.0620，0.40030.0692 in the silymarin groups and were 0.48260.0536,0.39070.0748 in anisodamine groups (P0.01，and P0.05).The amount of 3H-TdR inco
19、rporating in pericytes were 41825.541452.67,38237.001291.25 in control groups,and were 44767.671633.29,40015.44890.78 in silymarin groups respectively(P0.01and P0.05)，and were 41751.221291.25,39067.67952.19 in anisodamine groups.CONCIUSION Silymarin may effectively protect pericytes against the prol
20、iferative inhibition and DNA decrease by EGPA-induced,but it no effect for those induced by AGEPA.Anisodamine can not protect pericytes against the proliferative inhibition and DNA decrease by EGPA-induced or by AGEPA-induced.水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2
21、000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞Key wordssilymarin；anisodamine；glycosylation products；pericytes 水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第
22、 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞我国传统的中药在防治糖尿病及其慢性并发症方面有着悠久的历史。最近发现，中药水飞蓟素(silymarin)具有抑制蛋白质非酶糖化和氧化的作用，山莨菪碱(anisodamine)亦有较强的抗氧化功效13 。1998 年 2 月12 月我们观察了水飞蓟素和山莨菪碱对在早期糖基化产物(early glycation produ
23、cts of albumin,EGPA)和糖基化终产物(advanced glycation end products of albumin,AGEPA)培养下的牛视网膜微血管周细胞(pericytes,PC)增殖和 DNA 合成的影响，以探讨它们在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopath,DR)早期防治中的作用。水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011
24、 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞1 材料和方法水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾
25、判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞1.1 实验材料水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞水飞蓟素由上海朝晖制药厂提供。水飞蓟素贮存液的配制：因水飞蓟素难溶于水，故先配制成水溶性
26、的水飞蓟素葡甲胺盐结晶。然后用紫外分光光度仪在(2881)nm 波长处测定其吸收度，按水飞蓟素(C25H22O10)的吸收系数(E1%cm)为 456.1 计算，并与 1.405 相乘，换算成水飞蓟素葡甲胺盐的含量4，5 。然后用 DMEM 培养液溶解，配成 50mmol/L 浓度的水飞蓟素贮存液备用。山莨菪碱注射液为江苏兴化制药厂产品。M T T：Sigma公司产品。3H-TdR：北京原子能研究所产品。液闪计数仪：美国 Beckman LS3801 型。水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科
27、杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞糖基化产物及其对照物的制备及检测：EG-BSA 制备；将5%的无球蛋白牛血清白蛋白与 0.5mol/L D-葡萄糖和 1mmol/L PMSF(phenylmethyl sulfonyl fluoride)共同溶解于 0.2mol/L磷酸缓冲液中，经 0.22m 滤膜过滤除菌后，置 37孵
28、箱内孵化 10d。AEG-BSA 制备：材料及方法同上，孵化时间为60d。EG-BSA 和 AGE-BSA 对照物的制备：除不加葡萄糖外，其它材料及方法同上。所有糖基化产物孵化结束后，未结合物质通过对磷酸缓冲盐溶液的广泛透析而除去，然后用 0.22m滤膜过滤除菌。 。同时取样用荧光光度计数仪(激发/发射波长为370/440nm)检测其荧光强度。EG-BSA 和 AGE-BSA 的荧光强度分别较对照组高 12 倍和 50 倍。水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第
29、10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞周细胞的培养及鉴定：取宰后 2h 内牛眼，置冰盒内带回实验室，无菌操作台内摘取视网膜，剪碎。采用胶原酶消化和滤网过滤分离细胞，辅以细胞克隆的分离培养和反复除杂，以获得纯净的周细胞。并经免疫细胞化学染色证实，周细胞对单克隆抗体 3G5 和 -肌动蛋白抗体染色阳性，对因子抗体染色阴性。水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视
30、网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞1.2 方法水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10
31、卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞1.2.1 水飞蓟素和莨菪碱对 EGPA 和 AGEPA 培养下周细胞增殖影响的检测：取 36 代周细胞经 0.25%胰蛋白酶消化后，用含 10%FBS 的 RPMI1640 培养液配成单个细胞悬液，1105/孔个细胞接种于 96 孔培养板内，24h 细胞贴壁后分组。每孔在加入 500l/ml(终浓度)EGPA 或 AGEPA
32、 的同时，分别加入终浓度为 2.5，5.0，10，20，40，80g/ml 的水飞蓟素或山莨菪碱(同一浓度以 4 孔平行)，并设只加 EGPA 或 AGEPA 不加药物的对照组。各组置 37培养箱内培养 4d，按 MTT 检测方法于培养结束时进行 MTT 检测。水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿
33、牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞1.2.2 水飞蓟素和山莨菪碱对 EGPA 和 AGEPA 培养下的周细胞 DNA 合成量检测：细胞接种方法及分组同上，每孔在加入终浓度 500l/ml EGPA 或 AGEPA 的同时，分别加入水飞蓟素或山莨菪碱(终浓度同上)。置 37培养箱内培养 4d 后，每孔再同时加入 3H-TdR1Bq，继续培养 24h 后取出，于 Beckman LS 3801 液闪计数仪检测样品放射性 CPM 值。水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化
34、产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞1.2.3 统计学方法：SPSS for Windors 8.0 软件包建立数据库。采用 One-Way-Anova 方差分析及两两比较。均数和标准差用 x s 表示，显著性检验以 P0.05 为有意义。水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下
35、牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞2 结果水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10
36、卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞2.1 水飞蓟素及山莨菪碱对 EGPA 和 AGEPA 培养条件下周细胞增殖改变的影响水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医
37、院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞EGPA 培养条件下，三组方差分析显示差异有显著性(F=4.376，P0.05)；两两比较发现，水飞蓟素组与对照组之间差异亦有显著性(P0.01)，但山莨菪碱组与对照组和水飞蓟素组与山莨菪碱组之间差异均无显著性 P0.05，表 1)。AGEPA培养条件下，三组间方差分析和两两比较差异均无显著性(F=0.343，P0.05，表 1)。水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保
38、护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞2.2 水飞蓟素和山莨菪碱对 EGPA 和 AGEPA 培养条件下周细胞 DNA 合成量的影响水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞
39、增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞EGPA 培养条件下，方差分析显示水飞蓟素组、山莨菪碱组与对照组之间 3H-TdR 掺入量差异有显著性(F=10.54，P0.01)；两两比较发现，水飞蓟素组与对照组之间差异有显著性(P0.01)，而山莨菪碱组与对照组之间差异无显著性(P0.05)。同时，水飞蓟素
40、组与山莨菪碱组比较，差异也有显著性(P0.01，表 2)。AGEPA 培养下，水飞蓟素组和山莨菪碱组分别与对照组比较，差异无显著性(P0.05，表 2)。水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹
41、俞表 1 水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞下周细胞增殖的影响(M T T 法)水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟
42、素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞组 别 A 值(s)t 值 P 值早期糖基化产物 对照组0.46190.0539-水飞蓟素组 0.49190.06202.8130.01 山莨菪碱组 0.48260.05321.7120.05 糖基化终产物对照组0.38
43、840.0626-水飞蓟素组 0.40030.06920.6470.05 山莨菪碱组 0.39070.05240.1270.05 3 讨论水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞水飞蓟素是从中
44、药植物水飞蓟种子中提取的一种黄酮类化合物。体内外研究证实水飞蓟水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞素具有抑制蛋白质的非酶糖化和氧化的作用1，2 。中药山莨菪碱除了有抗休克、解痉、止痛等功
45、效外，还能在细胞膜水平上对抗氧自由基引起的膜脂质过氧化，保护细胞免受氧化应激反应所引起的损害3 。水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞表 2 水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养水飞蓟素和
46、山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞下周细胞 3H-TdR 掺入的影响(CPM)水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增
47、生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：中南大学附属第二医院眼科，长沙 410011 关键词：水飞蓟素；山莨菪碱；糖基化产物；周细胞 摘 奸强灿嚏亏版希婿牧贷傅稚痴镜狰靶捆魁六材海偏滴画耸子缝吉邪瓜废纤匝藉深轮烘瞬署毁憾判质假突坊俗烽公杠吨民着皇串聋虞跟旨猛稿琢刹俞组 别 CPM 值(s)t 值 P 值早期糖基化产物 对照组41825.541452.67-水飞蓟素组44767.671633.293.0990.01 山莨菪碱组41951.221291.250.9020.05 糖基化终产物对照组38237.001291.25-水飞
48、蓟素组40015.44890.783.1400.05 山莨菪碱组39067.67952.191.4940.05 已有研究报道，AGEPA 在周细胞和内皮细胞及基底膜沉积，可产生氧化应激反应和释放自由基及蛋白酶对细胞产生损伤；同时还可作为活化蛋白激酶C(PKC)的底物，通过活化 PKC 途径引起 DR 的发生。有人证实EGPA 和 AGEPA 都能不同程度地抑制视网膜微血管周细胞增生和DNA 合成，尤以 AGEPA 为著6 。本研究发现，在 EGPA 培养条件下，与未加药物的对照组比较，水飞蓟素组周细胞增殖数和DNA 合成量均有显著性增高，并随着药物浓度的增高而愈加明显。这说明水飞蓟素对在 EG
49、PA 培养条件下牛的周细胞具有较强的保护作用。这可能与其抑制细胞醛糖还原酶活性，减少烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯消耗，提高细胞的抗氧化能力；抑制脂质过氧化物形成，并清除超氧离子自由基及羟自由基，防止细胞内发生脂质过氧化反应及细胞膜的损害；直接抑制AGEPA 生成1，2，7，8，9有关。但对 AGEPA 培养条件下牛的周细胞增殖抑制和 DN A 合成减少无显著性保护作用。这说明水飞蓟素不能直接抑制 AGEPA 对周细胞的损害，可能与其作用的机制有关。山莨菪碱对在 EGPA 和 AGEPA 培养条件下牛的周细胞增殖抑制和 DNA 合成减少均无明显保护作用。这也从另一方面说明糖基化产物抑制周细胞增殖和 DNA 合成减少的机制，虽有氧化应激反应的参与，但可能不是主要的因素。水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用水飞蓟素和山莨菪碱对糖基化产物培养下牛视网膜周细胞增生的保护作用中国中医眼科杂志 2000 年第 4 期第 10 卷 实验研究作者：席兴华 姜德咏 唐罗生单位：
