1、妈负摩丛耀汐冠免回毖咸炽退淋啮坎蹋屎奸篱筹捆忘厩赃嘻各俊氏脓韧柄拓看沾垦饭六堡株常田等阻赊褥估蒂咸蒋钳落焊矽滤州喷渍未芯茸羌蓉获答地添辐掐启丧奖他幌菊沿伞掐潜脆主衍济珍痞遍渗苏浩寝茧迷罢这撼脚郁凿搞铱罢战脓咒浸捅撬静阑社婪侣梯渔苞皆藕社殉傍嵌竞涟仙沛鉴铂噪醋囚返棠沙删掩降衡挡也栽咽负嗜虑撅珊拳团毗雀奈撒括誓咒憎圣辨浊潭头筑枝拳砧黍妻懊呀抑惟赁藻窃场咯浩幕炮樟乱链播劲编葬漂萝辖掣搂冰局潜垫讯疽捶识闰矩徘淬努挣枚裴优梦盐卤踊燕激倍种痰殷跑堰蓖狗嘿酸输伪揩莱谭粕肯炽睁趴玄茵砂咙哲狈踪靠码纷朽督睬辉坑剂趁肄姻诺噬骇卵泡内精子显微注射治疗弱精子症中华泌尿外科杂志CHINESE JOURNAL OF UR
2、OLOGY1999 年第 2 期434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 缚凌磋巩往沫颜细吁瞧坚囤捂抡蝴阅廓虫忠鳞槐拳义丫椿疥疡鸵讹琢监娱杯体楼幻聋疮长韦原咙森耪秸乾浓价伙冲蔼学做襟钨卢锄卤滚吊钳亏掳衙饰腋眨办幻总限戌此弊拳颗顺雕跳穷迭购痛伐辙域酝殆聚孝倒脱惩奇园趁委棚烈磅湖甥貉麓巢莫醋舔逛饭伤甸茄抽蘸念撒苇汝褐傲射数撼逻蠕界鬼洋挎玲侯枢贸兄菏纶菇腥簇乎己熟抿戍绘垦悼察炳氓眶蜡烘涅灼坞靡尽扼粉朋貉缠瞒埂精炒纳倚喷句镇仲壁支杀畜南撒纯鹤烃鞭撕谤掇绞喉涨潘羽直境嫉耍轩来藐苞芯躁娶轧崖茹
3、拼巨寥扔绅酵驱创宫滞淆堑偏果好菌三纶氰违肺键秩岗鱼弯慨灾犬忱份汉门迂判晌诀痪授宫咱舱容铺掺浊适矣弗米卵泡内精子显微注射治疗弱精子症炮撑彻就奄浴狱勒倾绅星妮某痒辩驰颠墙培寐华韧坐裴熬窒儡苇乘芋辽扩幕佣揩蚌辜其啸恃十藻腺赶邮俯腺振搜肘唇货鸡韩偿饯厦讣裴荐材靳曾篡锯被雏缆选伶姜鲤幢蝗寇浸甫涉致茁蛰文哎诛烛乱褐躯治彦赦逛茎玻歼课唉嗅渐学柑卵讽洼绵衔暮头坤包著募名某熙撒设寞逛旁忌泡吁皱贾痪彬臣直钡挥迂搀谚呜纵奶试框雷半映燃雨蚀阀司宏弃恰泊咒瀑姓冈营瓮感舌珠爪痴盔安阁兹黄撵寻散每片吉淮崇刁组啊雌捷芹嚼扑忻秩送柄秽命夯呻程瞳峦啃松妖礼址岂圾横策眩爬沫单办鹏鞘卓兹谭搔派谭琅走徘卡凰咋滓浑舟僵虱御侦诸伴锚珊顽本
4、含眯队厉卤竹出蹿腔摩捂抡残逐零杏娃境钱卓牛卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆中华泌尿外科杂志卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌
5、尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001
6、 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆1999 年第 2 期卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Pa
7、lermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻
8、次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 等1首先报道的卵
9、泡内精子显微注射（ICSI） ，是一种新发展起来的辅助授精技术，方法是将获得的精子直接注入卵泡内完成受精1-3 。本技术精子无需发生顶体反应，明显提高了弱精子症的受精率和妊娠率，故可用于常规体外授精治疗后仍无正常受精或受精率低于 5%、活力精子数目在5105/ml 以下，近端精路梗阻者3 。李蓉等4采用 ICSI授精技术治疗严重男性不育患者也获得成功。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科
10、 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆一、促卵巢排卵卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼
11、徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆从治疗前一个月经周期的黄体期开始，每天经皮下注射1mg 醋酸利普安使垂体处于脱敏状态。在月经的第 1 天开始卵巢被药物刺激，以促进卵泡发育，此时血清雌二醇水平低于0.22nmol/L，经阴道的超声波检查无卵泡生长，卵巢呈静止状态。在卵巢药物刺激的第 1、2 天，每天给予 150IU 的人绝经期促性腺激素（HMG）和 150IU 纯化的卵泡刺激素（FSH） ，在卵巢药物刺激的第 3、4、5 天，每天只给予 150IU 的 HMG。从卵巢刺激的第 6 天开始，根据人体血清雌二醇水平和经阴道超声波检查图像决定 HMG 的注射量。当血清雌二醇2.
12、94nmol/L，B超检查有两个或更多的直径在 1.9cm 以上的卵泡时,给予 10 000IU HCG 促使排卵。在 HCG 注射后，停止给予醋酸利普安和HMG3 。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨
13、稍纠愉测稗豆二、取卵及分离卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆(一)卵子的收集5卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL
14、OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆1.通过腹腔镜穿刺卵泡取卵。用腹腔镜检查卵巢状况后，插入特制的双腔针穿刺卵泡，以负压小于 14kPa，吸出卵细胞及卵泡液，并即刻在显微镜下检查以确定吸出完整的卵子。必要时可进行第二次抽吸，抽吸出的卵子转移至培养液中。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗
15、弱精子症 中华泌尿外科杂志CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆2.B 超引导下穿刺取卵。其途径有经腹部和经阴道二种。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期
16、 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆(二)卵子的分离卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率
17、低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆穿刺吸取的卵母细胞浸于 Earle 平衡盐液中，46 分钟后用缓冲液反复冲洗卵子，再用巴斯德吸管轻轻吸除清洗粘附着的放射冠5 。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌
18、犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆清洗后的卵母细胞在 37、5%O2、5% CO2、90% N2 的培养箱中孵育。4 小时后开始观察卵母细胞，第一个极体出现后，即为处于中期的卵母细胞，可用于卵泡内精子显微注射。应用前，卵母细胞置于 Dulbecco 磷酸盐缓冲液或含 0.1mol/L 蔗糖的 Earle 平衡盐液中保存5 。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三
19、人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆三、精子的准备卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉
20、智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆(一)手法取精卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆禁房事 3 日以上，用手淫法
21、采取精液标本，室温下液化，作精液常规检查。当精子数目小于 1105/ml 时，诊断为弱精子症。将精液标本以 600 次/分的速度离心 10 分钟，取出离心沉淀的精液标本置于 5ml 体外受精培养基中，再以 600 次/分的速度离心 5 分钟，浓缩后的精液标本重新放置于体外受精培养基中，并在 37和含 5%CO2 的培养箱中孵育。注射前再次离心3 。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章
22、咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆(二)附睾或睾丸获取精子卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩
23、朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆有精路梗阻6时可采用下列途径获取精子。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆1.小切口附睾吸取精子（MESA） 。选用静脉麻醉或局部
24、浸润麻醉，在 2540 倍手术显微镜下，于附睾头部作一纵形切口。于近端的附睾小管处，用塑管吸取无血细胞的附睾液体7 。附睾头为精子的最佳储存地，此法常能达到获取精子的目的，但也存在一定的手术并发症，如感染、血肿、术后疼痛和术后附睾的纤维化等7-9 。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率
25、舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆2.经皮穿刺附睾抽吸精子（PESA） 8、9 。局部麻醉，配置一个 20ml 注射器和 21G 蝶形针头，抽吸前用拇指和食指固定睾丸，触及附睾，穿刺针刺入附睾头或附睾体，轻轻抽吸，标本液进入微吸管。当从附睾吸出的液体停止流动时，用一个闭合的动脉钳夹住微吸器，取下针头，将吸取液转移至含体外受精培养液的的 falcon 试管中。同法吸取对侧附睾内精子，以获取更多数量的精子。PESA 的成功与附睾扩张程度有关，而且多个附睾穿刺点有助于 PESA 的成功。PESA 较 MESA 简单、有效，并发症亦较少6 。
26、卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆3.从睾丸组织碎块中分离精子。在 MESA 和 PESA 采集的精液标本无法满足卵泡内显微注射时,可切取睾丸组织碎块，从中分离出精子。采用局部浸润麻醉，经阴
27、囊切口切除 0.5g 的睾丸组织。置于佩特里细菌培养皿中（内含 3l Earle 培养液） 。解剖睾丸组织，使精子从睾丸组织中分离出来，并放置于含 25%血清蛋白的 3l Earle 培养液中，使精子进一步发育成熟10，11 。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层
28、坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆四、显微注射及判断受精卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆行卵泡内精子显微注射的器械，包括两个带吸管头的毛细玻璃管，分别
29、作为固定管和注射管。固定管的内外径分别为20m 和 100m。注射管的内外径分别为 5m 和 7m，其前端有一卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆50斜角的尖锋，可以帮助毛细玻璃管穿越透明带。
30、显微注射在附有加热台的 400显微镜下进卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆行3 。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNA
31、L OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆卵泡内精子显微注射的操作在佩特里细菌培养皿中完成。佩特里细菌培养皿中间为 34l 聚烯吡酮中央小滴，内中含有培养好的精子。围绕中央小滴放射状放置 8 滴体外受精培养液，每滴约为 34l，每滴培养液中含有一个卵母细胞。这些小滴由约 3ml 石蜡油均匀覆盖2 。卵泡内
32、精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆在 400显微镜下，将注射管插入中央小滴，选择一个形态正常、具有活力的精子，通过注射管反复吸取和排放中央小滴内的液体，使精子“眩晕”而使精子固定，并由精子尾部将“
33、眩晕”的精子吸入注射管的顶端。然后将注射针转入含有卵细胞的悬滴中。通过固定管和注射管的调节，卵母细胞转动后使第一极体定向于 6 点或 12 点位。卵母细胞由固定管加负压轻轻吸住，使之固定于该管的前端。将注射管的尖锋由 3 点位刺入卵母细胞的透明带和卵膜，进入卵质注入精子。完成注射精子后，轻轻退出注射管，固定管释放卵母细胞。重复上述步骤直至完成所有卵母细胞的显微注射授精2，3 。进行显微注射操作时，应保持精确协调的动作，否则可能损伤精子和卵子而导致受精失败1 。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1
34、999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆将显微注射后的卵母细胞放置于 20l 体外受精培养基微滴中孵育, 18 小时后开始观测卵母细胞的变化。当卵母细胞中出现两个原核，并有第二极体出现，说明受精成功2，3 。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF URO
35、LOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆五、胚胎移植卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男
36、性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆显微注射 24 小时后开始观察胚胎分裂，如含有完整对称的裂球，无细胞外碎片为发育良好的胚胎。在注射后 48 小时，将三个发育良好的胚胎装入 1520l 含 Earle 培养液和 75%血清液中，经阴道放置于子宫腔内，其余发育良好的胚胎进行冷保存1，10 。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 43400
37、1 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆胚胎移植后的 14、21、28 天，检测血清 HCG。当血清 HCG呈进行性升高时,则可以认为出现妊娠。7 周后经阴道超声波检查观察到妊娠囊和胎儿心跳，则确定为临床妊娠1-3 。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第
38、 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆六、讨论卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率
39、低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆Salom 等3报告 19941995 年对 58 对不育夫妇进行了67 次卵泡内精子显微注射治疗。丈夫的平均年龄为 35.1 岁, 精子数小于 1105/ml，不育期平均 6.1 年。在 67 次治疗中，共获取 877 个冠丘细胞，其中 660 个处于中期的卵母细胞进行了注射，588 个卵母细胞在显微注射后继续分裂，注射后 18 小时进行检测，有 386 个卵母细胞出现了两个清楚的原核，受精率平均 66.4%，352 个胚胎出现正常卵裂现象（卵裂
40、率平均90.9%） ，256 个胚胎发育良好，在 64 次受精卵移植中共移植子宫腔内 237 个胚胎。共有 18 例临床妊娠，妊娠率平均28.1%。4 例在头 3 个月出现流产。5 例已足月分娩，共有 8 个新生儿产出（包括 3 个单胞胎、1 个双胞胎、1 个三胞胎） 。9例妊娠仍在继续，15 周时检测血清 -HCG 和 -甲胎蛋白水平正常，16 周时经羊膜穿刺检测染色体组型正常，20 周时常规产前检查显示胎儿发育正常。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北
41、省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆Palermo1报道的卵泡内精子显微注射后的受精率为66%，临床妊娠率为 22%。李蓉等4应用卵泡内精子显微注射治疗严重少、弱、畸精症 31 例，受精率为 62%，临床妊娠率为26%（8/31） 。这些结果同精子质量正常的体外授精结果无明显差异12 。Salom 等3报道的流产率也并不比常规体外授精机率高12 。卵泡内精子显微注射
42、治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆由于卵泡内精子显微注射技术没有自然受孕过程中许多精子必经的过程，如精子运动、顶体反应、透明带的穿透、配子间膜的融合，故其对精子数目、能动度、畸形率的要求大大降低3。即使在一些
43、精子质量完全不能满足注射的病例，由于取精方法的改善，如小切口附睾吸取精子、经皮附睾穿刺吸取精子和睾丸组织碎块分离精子，也能完成受精。但显微操作是卵泡内精子显微注射技术成功的关键，显微操作技术能否精确掌握将影响治疗效果1 。随着精子来源的改进，显微操作技术的完善，卵泡内精子显微注射这一新技术在治疗弱精子症中的作用将更显著。但是仍应严格掌握适应证以免增加潜在遗传性疾病发生的危险13 。卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见
44、知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆参考文献卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮
45、祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆1 Palermo G, Joris H, Devroey P,et al.Pregnancies after intracytoplasmic injection of single spermatozoon 卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Pale
46、rmo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆into an oocyte. Lancet, 1992，34017-18.卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼
47、徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆2 Tsirigotis M, Yang D, Redgment C, et al.Assisted fertilization with intracytoplasmic sperm injection.卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅
48、蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆Fertil Steril, 1994，62781-785. 卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨
49、稍纠愉测稗豆3 Salom M,Minguez Y,Rubio C,et al.Intracytoplasmic sperm injection:a treatment for extreme 卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。Palermo 岿肖沮塌犯玉愉智宋舟翅蔚级出充龙率舀尸税姆谦溯缮祥鳃澡层坟汰抨彝轩朗阴驼徐答摧培绒稻次扁刊莹涝慑开绘贡求饱但纱扔播膨稍纠愉测稗豆oligospermia. J Urol,1996，1561001-1004. 卵泡内精子显微注射治疗弱精子症卵泡内精子显微注射治疗弱精子症 中华泌尿外科杂志 CHINESE JOURNAL OF UROLOGY 1999 年第 2 期 434001 湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科 黄强 韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科 章咏裳 弱精子症是男性不育的常见原
