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正交试验法优化复方枳实厚朴汤的提取工艺毕业论文.doc

上传人:无敌 文档编号:655832 上传时间:2018-04-17 格式:DOC 页数:19 大小:89.50KB
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1、毕业论文论文题目:正交试验法优化复方枳实厚朴汤的提取工艺江西中医学院毕业论文1目 录一、论文1、标题和作者22、中文摘要及关键词23、英文摘要及关键词24、前言25、正文36、讨论67、参考文献78、文献综述89、致谢及声明11二、导师评阅意见表三、实习总结江西中医学院毕业论文2枳实厚朴汤中枳实的提取工艺研究潘晓微(江西中医学院) 关志宇(江西中医学院药学院)中文摘要目的:研究复方枳实厚朴汤的最佳提取工艺。方法:采用 L )3(49正交试验,用总黄酮的含量为指标,考查提取时间,提取次数,加水量对提取结果的影响。结果:枳实厚朴汤的最佳提取工艺为在 10 倍加水量,90min 的提取时间下提取两次

2、。结论:采取正交设计筛选出的该工艺,方法较好,操作简单、重现性好、有效成分提取率高、工艺可行。关键词:枳实 提取工艺 正交试验 总黄酮ABSTRACTPurpose: Study the effect of compound frutus aurantii magnolia officinalis soup. The best extraction technologyMethods: With orthogonal experiment, byL )3(49flavonoids content as the index, examines extraction time, extractio

3、n times, water added to affect the results of extracted.Results: Frutus aurantii magnolia bark the best extraction technology for soup in 10 instead of water, 90min extracting time next extraction twiceConclusion:Take orthogonal design method of this process, were good, simple operation, good reprod

4、uctivity, extraction technology, high effective components feasible.Keywordimmature bitter orange; Extraction technology; Orthogonal test;flavonoid前言枳实厚朴汤,处方来源家塾方是由枳实、厚朴等药材组成的复方汤剂,方中用枳实“能消心下痞塞之痰,泻腹中滞塞之气,推胃中隔宿之食,消腹内连年之积”,江西中医学院毕业论文3为脾胃胀痛之主药,与苍白术合用理气导滞,消补兼施,以助其升清降浊之枢机,厚朴,行气消积,加强枳实消胀除满之力,该药方主治虚滑泻痢,久不愈者

5、 【1】 。为了更好地发挥枳实厚朴汤的药效,本文以总黄酮的含量为指标,采用正交试验法对该汤剂的提取工艺进行优选,从而确定最佳提取条件。正文1. 试验材料1.1 试验药材 麸炒枳实,购自江西樟树天齐堂中药饮片有限公司。厚朴,购自江西汇仁药业有限公司。1.2 试验试剂 甲醇(上海振兴化工厂,批号20101120)为分析纯,水为重蒸水。1.3 仪器设备 752型可见分光光度计(上海欣茂仪器有限公司) ,SHZ-D(III)循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司),数显恒温水浴锅HH-4(国华电器有限公司)、KQS200DA型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)、真空干燥箱-D2(上海一恒科

6、学仪器有限公司)、RE-52D旋转蒸发器(上海青浦沪西仪器厂),ZNHW智能恒温电热套(巩义市予华仪器有限责任公司)、BP.II型马头牌架盘药物天平(上海医用激光仪器厂)2. 提取工艺优选2.1 正交试验 采用恒温水浴提取法提取复方中药,温度设置在 100,选择加水量(A ) 、提取时间(B ) 、提取次数(C)3 个指标作为考察因素,每个因素选取 3 水平,因素水平详见表 1。选择 L 9 (34) 正交表进行试验,每次取药材 46.5g 进行提取,后在水浴锅上浓缩至浸膏状,再放入干燥箱中干燥,称重,备用。表 1 因素水平表Tab1 Levels of factors因素加水量(倍) 提取时

7、间(min) 提取次数(次)水平(A) (B ) (C)126 30 18 60 2江西中医学院毕业论文43 10 90 32.2 枳实中总黄酮的含量测定根据文献 【2】 ,采用紫外分光光度法测定枳实总黄酮含量。而柚皮苷紫外最大吸收峰与总黄酮相同,分别在283 nm处产生最大吸收,且柚皮苷可自中国药品生物制品检定所购买,因此,使用柚皮苷作为总黄酮测定的对照品。2.2.1对照品溶液的配制 精密称取柚皮苷对照品5. 28 mg ,置50ml量瓶中,甲醇定容至刻度,作为对照品溶液。2.2.2 标准曲线的绘制 精密吸取对照品溶液0. 5 , 1. 0, 1. 5, 2. 0, 2. 5, 3. 0 m

8、l于10 ml量瓶中,甲醇定容至刻度,以甲醇为空白, 在283 nm 处测吸收度。得回归方程为 : A= 0. 027C - 0. 001 , r = 0. 9999。线性范围为5. 2831. 68gml-1 32.2.3 供试品溶液的制备 将正交工艺所得的干浸膏,分别精密称取约50 mg 置25 ml容量瓶中,加甲醇定容至刻度,超声15 min后冷却至室温,加甲醇至刻度,摇匀,过滤,精密吸取续滤液5 ml置100 ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,得供试品溶液 【3】 。2.2.4 精密度试验 取标准对照液2.0mL,照2.2.3方法制备标准品供试液和空白对照江西中医学院毕业论文5液在28

9、3nm 波长处重复测定5次,其结果RSD 为1.04 %,表明仪器精密度符合要求。2.2.5 重现性试验 取同一供试品样品5份,每份3g,精密称定,按“供试品溶液的制备”项下的方法制备样品溶液,再按“对照品溶液的制备”项下的方法重复操作,计算总皂苷的含量。结果总黄酮的平均含量为9.73%,RSD=3.95%(n=5) 。由于RSDBC,再考查因素之间各水平之间的差异,发现最佳提取工艺为 A3、B 3、C 2,即 10 倍加水量,90min 提取时间的条件下提取二次。2.4.2 方差分析 结果详见表 3。表3 方差分析结果Tab 3 Results of variance analysis方差来

10、源 离差平方和 自由度 方差 F 显著性A 9.334 2 4.667 75.996 0.013B 0.444 2 0.222 9.326 0.097C 0.159 2 0.0795 0.383 0.723D 0.047 2 0.0235表3方差分析结果表明,加水量对提取液中总黄酮含量的影响有极显著意义,提取次数和提取时间的影响较小。通过对试验结果进行的正交分析可以确定陈皮煎煮工艺的最佳条件为A 3、B 3、C 2,确定最佳的提取方法为 A3、B 3、C 2,即用10倍量的水、90min的提取时间和2次得提取次数。3 验证试验以正交试验的最佳提取条件进行验证试验,经过三次平行试验,由结果可知,

11、应用优化后试验条件进行提取,提取率较高,重复性较好。4 讨论尽管有研究 4表明醇提枳实药材优于水提,但考虑到实验成本以及煎煮药材的便利性,本文最终还是选取了以水为溶剂的正交试验。在本次实验中,作者以枳实中的总黄酮为指标,通过对实验结果进行的正交分析可以确定该复方煎煮工艺的最佳条件为用 10 倍加水量,90min 提取时间的条件下提取二次,且验证试验也表明该工艺合理、稳定、提取率高,为实际生产提供了理论依据,同时本研究结果也对开发利用枳实资源具有一定的意义。江西中医学院毕业论文7参考文献:1 秦立伟,刘桂英.枳实厚朴汤治疗功能性消化不良 65 例J.光明中医,2011,26(1):73-742

12、韦黄杰,舒 斌,陈玉俊,等.分光光度法测定化橘红总黄酮含量 J .中成药,2005,27 (3) :3543 刘文娟,耿秋菊,蔡蓉.枳实药材中总黄酮提取工艺的研究J .时珍国医国药,17(11):2233-22354 王 淳, 刘振丽,宋志前,李林福,吕署一,郝兴辉.中药枳实提取工艺研究J.中国实验方剂学杂志,14(9)23-25江西中医学院毕业论文8文献综述枳实综述摘要: 枳实是临床消化科常用中药,且疗效显著,现对其基本信息,药性,药理作用,理化鉴别,提取等方面做如下综述。关键字:枳实 药理作用 提取工艺 含量测定 枳实为芸香科植物酸橙及其栽培变种或甜橙的干燥幼果,主产于四川、江西、福建、江

13、苏等地。56 月间采摘或采集自落的果实,自中部横切为两半,晒干或低温干燥,较小者直接晒干或低温干燥。用时洗净、闷透,切薄片,干燥。生用或麸炒用。药品化义:“枳实专泄胃实,开导坚结,故主中脘以治血分,疗脐腹间实满,消痰癖,祛停水,逐宿食,破结胸,通便闭,非此不能也。若皮肤作痒,因积血滞于中,不能营养肌表,若饮食不思,因脾郁结不能运化,皆取其辛散苦泻之力也。为血分中之气药,惟此称最。 ”1. 基本信息枳实 1又名鹅眼枳实,英文名是 Immature Bitter Orange、Immature Sweet Orange Fructus Aurantii Immaturus 拉丁名是.Citrus

14、aurantium L.或者 Citrus sinensis (L.)Osbeck,一般以植物的幼果入药。按功效分类属于理气药,消食药,性苦、辛、寒,归脾、胃、肝心经,功效主治有积滞内停、痞满胀痛、大便秘结、泻痢后重、结胸、胃下垂、子宫脱垂脱肛。用法用量有内服:水煎,3-10g;或入丸、散。外用:适量,研末调涂;或炒热熨 2。2. 药理作用2.1 对心血管系统的作用 枳实对心血管的药理作用早在上世纪就有报道,例如其显著的升压效应,类似于去甲肾上素,且持续时间长,增强收肌收缩力,减缓心率和增加心血输出量,增大冠脉流量。增大肾血流量,改善末梢微循环等。这些药理作用已经广泛应用于临床。现代研究又发现

15、枳实可浓度依赖性地增加家兔主动脉张力,使主动脉平滑肌收缩。酚妥拉明、异搏定、无钙 Krebs 液均可明显减小枳实的作用,此江西中医学院毕业论文9作用可能与激活平滑肌细胞膜上的肾上腺素能 受体、胆碱能 M 受体及异搏定 Ca2+ 敏感通道有关,并对脑外存在一定的依赖性,与平滑肌细胞膜上组胺 H1 受体无关 3。2.2 对胃肠平滑肌的作用 枳实能显著提高食极小鼠的酚红排空率,改善食积小鼠胃肠活动功能减弱的状态 4。枳实能使大鼠消化间期移行性复合运动 MMC 活动时相延长,即增加周期内的峰电位数增加,并能使绵羊小肠电活动增强,减短 MMC II 相时程,提高 III 相的发生机率和峰电强度 5,因平

16、滑肌的收缩强度和收缩持续时间与峰电位发放的频率多少有关,故能增强平滑肌的收缩强度和收缩持续时间 6。对于 IDMEC(小肠消化间期综合肌电),枳实可使其周期和 I 相时程缩短,II 相时程延长,峰电位数增加,从而加强小肠运动 7。无论是使 IDMEC 的峰电位增高还是使 MMC 活动相时程延长,均能使平滑肌收缩加强,从而对消化起到一定的促进作用。2.3 对子宫的作用 药理研究证实枳实能使家兔子宫收缩有力,张力增强,收缩节律增强,但对小鼠的离体子宫则主要表现为抑制作用,枳实水提醇沉物能兴奋离体家兔环行阴道平滑肌,并能诱发肌条的节律性收缩活动或增强原有自发性收缩肌条的收缩力及收缩频率 8。2.4

17、对血液流变学的影响 枳实对健康大鼠及血癌模型大鼠均存在明显的抗血小板聚集及抑制红细胞聚集的作用,其作用优于阿司匹林,并呈明显的量效关系。枳实活血化瘀作用可能是通过对血小板聚集、红细胞聚集的抑制作用达到的,枳实有望作为一种有效的血小板聚集抑制剂在临床中应用 9。2.5 镇痛作用 枳实的挥发油不但能够对胃肠平滑肌产生效应,还能够对大鼠离体肠平滑肌的收缩呈先兴奋后抑制得作用,而且可明显减少醋酸引起的小鼠扭体反应次数及自发活动次数,并表现出了一定程度的镇痛和中枢抑制作用 10。2.6 抗菌作用 枳实挥发油对耐药金葡萄球菌存在抑制作用,柠檬烯则有镇咳、祛痰、抗菌的作用;芳樟醇则有防腐抗菌、抗病毒、镇静的作用 11。2.7 抗氧化作用 研究表明枳实提取物能够有效地清除羟自由基、超氧阴离子自由基、DP-PH 自由基,还具有抑制脂质过氧化作用,具有进一步研究和开发的价值 12。2.8 护肝和降血糖作用 枳实提取物治疗组与糖尿病模型组比较,血糖水平明显降低,谷胱甘肽含量显著增加,谷胱甘肽过氧化物酶活性、丙二醛和 NO 含量显著减小。超过氧化物歧化酶活性有所增强。光镜下枳实提取物治疗组肝组织细胞损伤较糖尿病组降低,显示具有增强肝脏的抗氧化的能力,降低肝细胞损伤的作用,同时高剂量时能显著降低血糖 13。

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