1、 药理实验室简介陆道培血液肿瘤中心是以诊断和治疗血液系统疾病和恶性肿瘤为主要诊疗特色的中心，能更准确的反应药物代谢情况，从而指导临床个体化药物治疗，提高用药的有效性和安全性。陆道培血液肿瘤中心是以诊断和治疗血液系统疾病和恶性肿瘤为主要诊疗特色的中心，为了满足临床科室对于化疗及移植病人化疗药、免疫抑制剂等药物的血药浓度监测及药物代谢相关的代谢酶基因多态性的需求，更准确的反应药物代谢情况，从而指导临床个体化药物治疗，提高用药的有效性和安全性，我们现开展治疗药物监测(环孢素、他克莫司、甲氨蝶呤)及药物代谢酶CYP2C19*2和 CYP2C9*3基因多态性检测。项目介绍：一。 治疗药物监测(TDM)临
2、床治疗药物监测的目的是通过测定血液中或其它体液中药物的浓度并利用药代动力学的原理使给药方案个体化，以提高药物的疗效，避免或减少毒副反应，其中对于化疗药物及免疫抑制剂的使用，治疗药物监测显得尤为重要。现国内大多采用免疫法进行检测，该法对试剂的依赖程度高，试剂盒昂贵，检测药物种类有限，尤其不能区分原型药及代谢药，特异性及结果准确性较差。为提高检测灵敏度及结果的准确性，为临床个体化用药提供更可靠的依据，我们采用高效液相色谱-质谱法(LC-MS/MS)进行血液中目标药物浓度的监测，采用先进的 AB Sciex 4000QTRAP 质谱仪进行检测。与传统的光谱法、免疫法相比，高效液相色谱-质谱法(LC-
3、MS/MS)灵敏度及专属性高、重现性好，用目标离子特征性碎片定量，特异性强，干扰降低，更能准确反映目标药物的血药浓度，为临床应用治疗窗窄、毒副作用大、个体代谢差异大的药物提供了可靠的依据，减少因药物过量造成的毒副作用以及药量过低导致的疗效不佳，指导临床个体化用药。二。 CYP450药物代谢酶基因多态性检测为辅助个体化用药，我们现开展“CYP2C9*3、CYP2C19*2基因型 DNA 序列测定分析” 项目，采用基于测序方法分析患者是否为纯合型、杂合型CYP2C9*3或 CYP2C19*2基因型。细胞色素氧化酶 P450(CYP450)是人类肝脏中一种重要药物代谢酶系统，能代谢多种内源性底物、药
4、物和外源性化合物，主要包括三种超家族：CYP1、CYP2 和 CYP3。CYP2C9是 CYP2C 亚家族中的一种同功酶，大约 10%的临床常用药经由CYP2C9氧化代谢，包括甲苯磺丁脲、 S-华法林、苯妥因、格列甲嗪、格列本脲、托拉噻咪、络沙坦、厄贝沙坦和许多非甾体类抗炎药物(如布洛芬、氯诺昔康、双氯芬酸和萘普生等药物)。迄今已发现 CYP2C9存在30 种等位基因，CYP2C9*1 为具有强代谢活性的野生型基因，CYP2C9*3是中国人中最常见的弱代谢基因型，CYP2C9*3 能显著地损害 CYP2C9的催化功能，但对不同的底物药物催化代谢的影响不同，具有显著底物依赖性。弱代谢型 CYP2
5、C9导致酶活性降低，其药物代谢能力呈“正常基因纯合子 ; 正常基因与弱代谢基因杂合子 ;弱代谢基因纯合子或杂合子”的趋势。在血液病化疗和骨髓移植中，常用的抗癌药物如环磷酰胺、异环磷酰胺、依托泊苷等的代谢速度和 CYP2C9的基因型相关。 CYP2C9的基因型及共同服用的调节 CYP2C9活性的药物均会影响这些药物的代谢速度。CYP2C19是 CYP2C 亚家族中的一种同功酶，它参与多种药物的代谢，包括质子泵抑制剂、三环类抗抑郁药、抗癫痫药、抗精神病药、降糖药、抗凝药、抗疟疾药以及一些抗癌药物，如美芬妥英、安定、苯巴比妥、普耐洛尔、奥美拉唑、氯胍以及兰索拉唑、泮妥拉唑等。CYP2C19至少存在1
6、8种等位基因，CYP2C19*1 为具有强代谢活性的野生型，而其余基因型均导致代谢活性降低。CYP2C19*2在中国人群中的频率较高，与药物代谢关系最为密切，其它等位基因发生的频率很少。CYP2C19 药物代谢能力呈现为 “强代谢型基因纯合子 ; 强代谢型与弱代谢型基因杂合子 ; 弱代谢型基因纯合子或杂合子” 的变化趋势。在血液病化疗和骨髓移植中，常用的抗真菌药伏利康唑的代谢酶主要是CYP2C19，次要代谢酶为 CYP2C9和 CYP3A4。15-20% 的亚洲人群是CYP2C19弱代谢型，其中主要为 CYP2C19*2基因型。 CYP2C19的基因型及共同服用的调节 CYP2C19活性的药物
7、均会影响伏立康唑的血药浓度。AB Sciex 4000QTrap 质谱仪简介AB Sciex 4000QTRAP 四级杆-线性离子肼复合型质谱仪能在同一质谱上同时提供超高灵敏度的定量分析和定性分析功能，串联四级杆的扫描方式和线性离子肼的扫描方式相结合，使其在药物发现、毒理研究、代谢组学、法医学、临床研究等诸多领域发挥重要作用，它是超低含量组分的快速、自动化定量定性分析的最理想工具。它具有诸多优点：1。 串联四极杆和线性离子阱技术相结合，同一台质谱能同时提供超高灵敏度的定量和定性分析功能;2。 m/z 范围：52800 amu( 四极杆模式);50 2800 amu(线性阱模式);3。 具有串联
8、四极杆的母离子扫描、中性丢失扫描、MRM 等独有的功能，从而保证了高灵敏度和特异性;4。 高灵敏度的全扫描 MS、CID-MS/MS 、多级质谱扫描(MS3)、增强多电荷扫描功能(EMC)、时间延迟碎裂功能(TDF)扫描功能，增强了定性分析能力 ;5。 线性离子阱技术具有更大的离子容纳能力和空间，因此克服了传统离子阱由于阱的体积小而带来的“空间电荷效应影响，离子容量和捕获效率比传统离子阱高;6。 TurboV 离子源，灵敏度高，适应流速范围宽，方便易用;7。 Q2 LINAC 高压碰撞室技术提高离子从接口到检测器的传输效率，有效消除记忆效应，降低 MRM 每个离子对的驻留时间，重现性好，适合于高通量、多组分分析。
