1、ICS DB 61陕 西 省 地 方 标 准DB 61/ XXXXXXXXX小麦品种抗白粉病鉴定技术规范Rule for resistance evaluation of wheat powdery mildew（征求意见稿）XXXX - XX - XX 发布 XXXX - XX - XX 实施陕 西 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布DB61/ XXXXXXXXXI前 言本规程依据GB/T 1.1-2009标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写有关规则起草。本规程由杨凌现代农业标准化研究推广服务中心提出。本规程由陕西省农业标准化技术委员会归口。本规程起草单位：西北农林科技大学、陕西省
2、种子管理站、杨凌现代农业产业标准化研究推广中心。本规程主要起草人：王保通、李强、姚撑民、康振生、周永明。本规程由西北农林科技大学负责解释。本规程为首次发布。DB61/ XXXXXXXXX1小麦品种抗白粉病鉴定技术规范1 范围本规范规定了小麦品种白粉病抗性鉴定技术和抗病性评价标准。本规范适用于小麦生产品种、新育成品种、区试品种、农家品种及抗源材料的白粉病抗性鉴定和抗性评价；陕西省小麦品种区域试验、生产试验和自然诱发鉴定中的小麦白粉病的病情调查和抗性评价。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（
3、包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T 613-2002 小麦白粉病测报调查规范 NY/T 967-2006 农作物品种审定规范 小麦 NY/T 1443-2007 小麦抗病虫性评价技术规范PSJG1101-2009 农作物品种抗病性鉴定指南3 术语与定义下列术语和定义适用于本标准。3.1 小麦白粉病 Wheat powdery mildew由小麦白粉菌 Blumeria graminis f.sp.tritici 引起的小麦真菌病害。3.2 反应型(侵染型) Infection type根据寄主植物过敏性坏死反应有无和反应程度来划分的病斑类型。4 病原物4.1 病原物来源采自引起陕西省小麦
4、白粉病的菌源地。在陕西省小麦产区不同生态区采集病株，经活体分离、纯化、毒性鉴定后，按毒性菌株毒性谱建立菌种库。4.2 接种体组成DBXX/ XXXXXXXXX2接种体一般为陕西省关中灌区、渭北旱塬和陕南等生态区内的小麦白粉病菌毒性谱较宽和毒性较强的混合接种体，或用特定生态区的小麦白粉病菌优势毒性菌株作为接种体，也可以根据委托单位要求从菌种库中选择。4.3 病原物分离与确定从发病植株叶片的典型病斑上进行分离纯化，经形态学鉴定确认为Blumeria graminis f.sp. tritici，单孢或单孢子堆分离，经一套已知基因载体品种致病性测定后，进一步在感病品种陕225或京双16上扩繁，保存备
5、用。4.4 小麦白粉病菌繁殖与保存4.4.1 小麦白粉病菌繁殖 采集的小麦白粉病样本先经一套已知基因载体品种进行毒性鉴定(方法省略，详见相关资料)，鉴定后的毒性菌株再接种于盆栽的扩繁品种( 陕优 225)上，置于 1520条件下培养、保湿。4.4.2 白粉病菌孢子的收集和保存 白粉病菌孢子收集可在采菌操作台中用玻璃罩法进行，也可用孢子收集吸器采集。采集的白粉病菌孢子转接到种植有感病品种陕 225 的试管苗中，置于有光照的 4培养箱中保存，1-2 个月转接一次。 5 鉴定5.1 室内苗期鉴定5.1.1 苗期盆栽法鉴定 在温室中进行，温室温度控制在171之间，自然光照。根据鉴定小麦品种（系）的数量
6、将待测的品种（系）和感病对照（可用陕225或京双16）播种于直径10cm小花盆（少量材料）或50穴的育苗穴盘中（大量材料），每品种（系）播种1盆（穴），58粒种子。播种后加盖透明塑料罩放在温室中培养。待小麦第一片叶完全展开后，用抖接法或扫抹法充分接种白粉菌分生孢子，接种的菌株可根据鉴定的需要和要求选择，可以是纯化的含不同毒性基因型的菌株，也可以是混合菌株。接种后加盖透明塑料罩放在温室培养，7d10d待感病对照陕225或京双16充分发病后，按5.3方法记载第一片叶的反应型。小麦品种（系）苗期抗白粉病鉴定结果记载表见附录表A1，鉴定结果报告单见附录表B1（单个品种）、表B2（多个品种）。5.1.2
7、 离体叶段法鉴定 当温室培养的待测品种（系）和感病对照第一叶完全展开时，在超净台上选取麦苗第一叶，剪3cm长度叶段, 每品种（系）剪3个叶片，整齐排列在直径10 cm培养皿中的水琼脂培养基上（培养基含苯骈咪唑60 g/ml）。然后用提前繁殖的选定菌株的孢子粉在接种筒内对上述离体供试品种（系）的叶段进行接种，接种后盖上培养皿盖，置于171的光照培养箱中培养（16 h光照，8 h黑暗）7d10d后，按5.3方法调查、记载品种（系）的反应型。小麦品种（系）苗期抗白粉病鉴定结果记载表见附录表A1，鉴定结果报告单见附录表 B1（单个品种）、表B2 （多个品种）。5.2 田间成株期抗性鉴定5.2.1 鉴定
8、材料种植方法DB61/ XXXXXXXXX3田间成株期抗性鉴定圃设置在小麦白粉菌人工诱发鉴定圃或病害常发区域自然诱发鉴定圃。品种种植采用开畦条播、等行距配置方式(图1) 。畦埂宽50 cm，畦宽250 cm，畦长视地形、地势而定；距畦埂125 cm处顺畦种1行诱发行，品种可选用陕225或京双16或当地感病品种，在诱发行两侧20 cm横向种植鉴定品种，行长100 cm，行距33 cm，每行播种1个品种（约5 g6 g种子），每隔20行种植一行当地感病品种做对照，重复13次。顺序排列、编号，鉴定圃四周设100 cm宽的保护区。田间鉴定病圃的栽培条件（品种、土壤类型及施肥）须均匀一致。田间管理上要多
9、灌水，多施氮肥，创造有利于发病的环境。注：实线表示诱发行和对照品种；虚线表示鉴定品种图 1 鉴定圃田间配置示意图5.2.2 接种时期及方法田间成株期抗性鉴定一般在小麦拔节后期接种。接种前，根据鉴定需要选择小麦白粉菌菌株，在温室内（温度控制在171 ）感病品种陕225或京双16幼苗上繁殖。当感病品种充分发病后，采用扫抹法把病菌孢子接于病圃的诱发行上，每隔500 cm接 100 cm诱发行。为确保发病充分需在 2 d3 d后于不同接种点再接种一次。接种前(5 d7 d)、后田间需浇灌( 或喷灌)保湿。5.2.3 调查时期和方法分别于小麦扬花期和灌浆期各调查一次，根据5.3方法对接种材料每行随机选取
10、10株左右进行调查并记载病情级别（反应型或严重度），调查2次。小麦品种（系）成株期抗白粉病鉴定结果记载表见附录表A2，鉴定结果报告单见附录表 B1（单个品种）、表B2 （多个品种）。5.2.4 最高病情级别个体确认每个品种（系）取 2 次调查结果的最大值。如果每个重复最高病情级别植株只有 1 株（叶），就需要对该株小麦主要特征特性与该品种典型特征特性进行比较，在确认符合该品种典型特性后，该株小麦所表现出的病情级别就作为划分该品种（系）抗性类别的主要依据。如该株小麦不符合该品种典型性，应不记载病情。按上述规定逐株向下确认，直到某病情级别被确认为止。若一个鉴定群体中出现明显的抗、感类型，应在调查表
11、中注明“抗性分离”，用/表示。在开展鉴定调查时，鉴定人员与复核人员一同进行，鉴定人员对鉴定植株病情级别进行判断，经复核人员确认后记载。5.3 病情级别划分标准5.3.1 苗期和成株期病情级别分级标准按反应型（侵染型）分级（见表 1）表 1 苗期和成株期病情级别分级标准病情级别 症 状DBXX/ XXXXXXXXX40 级 植株无病斑0; 级 坏死反应，叶片有枯死斑1 级 病斑小于 1mm，菌丝稀薄透绿2 级 病斑小于 1mm，不透绿3 级 病斑大于 1mm， ，病斑较多，菌丝层较厚，不连片4 级 病斑大于 1mm， ，病斑多，菌丝层厚且连片5.3.2 成株期病情级别划分标准-按严重度分级 （见
12、表 2）分级方法是将植株由上而下划分9个相等的区段，根据各区段病位高度及叶片严重度二个因素综合定级（见表2，图2）。表 2 成株期病情级别划分标准严重度 症 状0 级 全株无病1 级 第一段叶片有少数病斑（病斑占叶面积 2以下）2 级 第二段叶片有少数病斑（第一段叶片轻度发病）3 级 第三段叶片轻度发病，第二段叶片中度发病，第一段叶片严重发病4 级 第四段叶片轻度发病，第三段叶片以下中到严重发病5 级 第五段叶片轻度发病，第四段叶片以下中到严重发病6 级 第六段叶片轻度发病，第五段叶片以下中到严重发病7 级 第七段叶片轻度发病，第六段叶片以下中到严重发病8 级 第八段叶片轻度发病，第七段叶片以
13、下中到严重发病9 级 整体叶片严重发病，穗部不同程度发病图 2 小麦白粉病 0-9 级分级标准示意图6 抗性评价DB61/ XXXXXXXXX56.1 抗性类别划分标准6.1.1 按反应型划分抗性分级标准按反应型划分标准见表3。表 3 按反应型划分抗性分级标准抗性类别最高反应型级别缩写 类别0 级 I 免疫0;级 HR 高抗1 级 R 抗2 级 MR 中抗3 级 S 感4 级 HS 高感6.1.2 按严重度划分抗性类别按严重度划分抗性级别见表4。表 4 按严重度划分抗性类别抗性类别最高严重度级别缩写 类别0 级 I 免疫1-2 级 HR 高抗3-4 级 MR 中抗5-6 级 MS 中感7-8
14、级 HS 高感9 级 ES 极感6.2 有效性判别感病对照品种的抗性反应型级别达到34级或严重度级别达到79级时，该批次鉴定有效。6.3 重复鉴定同一鉴定品种两年鉴定抗性类别不同的，则需要做第三次抗性鉴定。6.4 抗性评价6.4.1 在有 3 年鉴定的结果中，如有 2 年的抗性类别是一致的，则此抗性类别作为最终鉴定结论。6.4.2 达到免疫-抗或感-高感类别的鉴定品种，当两年抗性类别不一致时，以记载的被确认的最高病情级别所对应的抗性类别为准。6.4.3 人工接种鉴定，同一鉴定品种的抗性级别如果两年抗性级别相差 1 个等级，取抗性级数值较大的鉴定结果，对照 6.1 标准重新划分抗性类别；如果两年
15、抗性级别相差 2 个级别以上（包括 2 个级别）的，则需要做第三次抗性鉴定，取位于中间的抗性级别，重新划分抗性类别。DBXX/ XXXXXXXXX66.4.4 同一鉴定品种的抗性级别一年在 5 以上，另一年在 5 以下的, 则需要做第三次抗性鉴定，按其中两年鉴定级别相同或相似抗性级别划分抗性类别。7 鉴定报告7.1 人工接种鉴定一般以鉴定品种对特定生态区内不同毒性菌株的混合接种体或特定毒性菌株（群）的抗性反应出具鉴定报告。鉴定报告一般以单个品种单独出具。如集中批量送样的，也可以多个品种出一份报告。鉴定报告格式见附录表 B.1 小麦品种白粉病抗性鉴定结果报告单（单个品种）和表 B.2小麦品种白粉
16、病抗性鉴定结果报告单（多个品种）。7.2 鉴定报告要盖鉴定单位公章，要有鉴定人和复核人签字。DB61/ XXXXXXXXX7A A附 录 A（资料性附录）A.1 小麦品种（系）苗期抗白粉病鉴定记载表表 A1 小麦品种（系）苗期抗白粉病鉴定记载表鉴定方法：盆栽法鉴定 离体叶段法鉴定 鉴定地点：播种时间： 接种时间: 接种菌株： 调查时间：各级反应型级别株数品种编号品种名称品种来源 0 级 0; 级 1 级 2 级 3 级 4 级最高反应型级别抗性类别鉴定人： 年 月 日 复核人： 年 月 日DBXX/ XXXXXXXXX8A.2 小麦品种（系）成株期抗白粉病鉴定记载表表A2 小麦品种（系）成株期
17、抗白粉病鉴定记载表鉴定方法：自然诱发接种 人工诱发接种 鉴定地点：播种时间： 接种时间: 接种菌株： 调查时间：各级严重度级别株数品种编号品种名称品种来源 0 级 1-2 级 3-4 级 5-6 级 7-8 级 9 级平均严重度级别抗性类别鉴定人： 年 月 日 复核人： 年 月 日DB61/ XXXXXXXXX9B B附 录 B（资料性附录）B.1 小麦品种白粉病抗性鉴定结果报告单（单个品种）表 B.1 小麦品种白粉病抗性鉴定结果报告单（单个品种）报告编号： 第 页 共 页品种编号 品种名称委托鉴定单位 鉴定编号样品接收时间 样品数量鉴定项目 鉴定依据鉴 定 结 果接种体来源 混合接种体 特定
18、接种体 1 特定接种体 2 特定接种体 3 特定接种体 4鉴定地点鉴定依据鉴定方法种植日期接种日期调查日期鉴定参数 反应型 严重度 反应型 严重度 反应型 严重度 反应型 严重度 反应型 严重度鉴定值抗性类别CK 抗性类别鉴定结论备注鉴定人： 年 月 日 复核人： 年 月 日鉴定单位（公章）： 年 月 日DBXX/ XXXXXXXXX10B.2 小麦品种抗白粉病性鉴定结果报告单（多个品种）表 B.2 小麦品种白粉病抗性鉴定结果报告单（多个品种）报告编号： 第 页 共 页混合接种体 特定接种体 1 特定接种体 2成株期病圃鉴定法 温 室 苗 期鉴 定 法 成株期病圃鉴定法 温 室 苗 期鉴 定 法 成株期病圃鉴定法 温 室 苗 期鉴 定 法反应型 严重度 反应型 反应型 严重度 反应型 反应型 严重度 反应型品种编号品种名称 最高病级抗性类别最高病级抗性类别最高病级抗性类别最高病级抗性类别最高病级抗性类别最高病级抗性类别最高病级抗性类别最高病级抗性类别最高病级抗性类别备注：1. 接种体组成： 2. 种植时间： 接种时间： 调查时间： 3接种方法： 田间管理情况： 鉴定人： 年 月 日 复核人： 年 月 日鉴定单位(公章)： 年 月 日DB61/ XXXXXXXXX11
