1、佛山市中医院周末健康讲座 第 1 页 共 15 页液基细胞学在妇科与非妇科肿瘤筛查中的应用佛山市中医院病理科 毛荣军 主治医师病理学诊断的概念及作用 概念：应用病理学的研究技术对病变的组织或细胞性质、病因等作出分析判断的过程以及预后评估和对治疗的指导。 作用：定性、定源、定因、预后评估、指导治疗、医疗科研、鉴定医疗纠纷的最重要最直接的证据。病理学的研究方法 组织病理学检查 细胞学检查 电子显微镜超微结构检查 组织化学方法 免疫组织化学及荧光标记技术 分子病理技术细胞学检查-诊断细胞病理学 细胞学检查是临床诊断病理学一个重要组成部分，包括以下内容： 妇科：以宫颈细胞学检查为代表。 非妇科：呼吸道
2、细胞学检查（痰液、支气管刷片、针吸物及气管肺泡灌洗液）、消化道刷检物及冲洗液、胸腹水、尿液、脑脊液、分泌物、渗出物及囊肿液等。宫颈细胞学检查方法 宫颈传统巴氏涂片1945年Papanicolaou提出宫颈细胞涂片检查-巴氏涂片（Papsmear test）。宫颈传统巴氏涂片：木制刮板刮取宫颈及其阴道上皮细胞，均匀涂抹于载玻片上， 95%酒精固定15分钟以上，HE染色，封片。 液基薄层细胞学技术1996年美国食品和药品管理局(FDA)批准使用薄层液基细胞学检测：优化涂片质量、细胞采集量多、背景干净、清晰透明,厚薄均匀,染色效果好。宫颈传统巴氏涂片 优点：价格便宜、操作简单、使用方便。 缺点：高达
3、50%90%假阴性。 漏诊误诊原因：取材器上的病变细胞大多数没有被转移到载玻片上，研究表明，常规涂片有80% 以上细胞随取材器被丢弃；涂片质量差,不均匀、过厚、过多的黏液、血液或炎细胞遮盖了不正常细胞。有40%的涂片因涂片质量影响正确诊断。液基薄层细胞学技术 主要方法：膜式液基薄层细胞学制片技术(TCT)及自然沉淀式液基薄层细胞制片术(LCT/LBP) 。 发展趋势：膜式法(TCT)逐渐被自然沉淀法(LCT/LBP) 取代。 我国液基细胞学开展及应用现状：膜式(TCT)向离心沉淀式(LCT/LBP) 发展并被取代之；由进口产品逐步向国产方向发展。 基本技术方法：TCT：标本收集-放入细胞保存液
4、- 转移至微孔膜-清洁玻片- 染色-光镜观。LCT/LBP ：标本收集-放入细胞保存液-高速离心沉淀-清洁玻片-染色-光镜观察。 主要技术特征：清除杂质，多量病变细胞转移至玻片，细胞均匀平铺，背景干净，易于观察。第 2 页 共 15 页 2010 年 5 月 15 日主办：佛山市中医院 讲课地点：佛山市中医院体检康复楼九楼会议室传统巴氏涂片细胞学在宫颈癌前病变及恶性肿瘤筛查中的评估宫颈癌筛查现状 宫颈癌有明确的癌前病变并且持续很长时间。 巴氏涂片成功应用50余年，有效降低了宫颈癌的死亡率。 即使在宫颈癌筛查进行很好的地区，宫颈癌也未能被完全消灭。巴氏涂片达不到筛查的原因 患者原因：不进行年度的
5、巴氏涂片检查和其他健康检查。 隐瞒高危病史20岁以前有性活动多于俩个性伙伴有ASC 或SIL史 有性传播疾病(包括HPV)免疫缺陷(包括HIV)吸烟 取材前期处理不当涂片前24小时性交或灌洗，去掉了有诊断意义的上皮细胞。 临床医生原因没能做到满意的巴氏涂片没有提供相关的临床资料没有随访不正常的涂片没有对可疑病变取活检未注意到可疑临床症状短期内重复取材不顾“标本不满意” 的提示，采纳“阴性” 诊断 取材工具及制作涂片因素取材器的形状影响取材（棉签，塑料刮板等很难取到颈管细胞）取材器上的细胞不能充分转移到载玻片上 影响诊断的因素涂片中过多的血液，粘液及炎细胞。涂片厚，上皮细胞重叠。不正常细胞少、小
6、、形态温和。大量明显低度病变细胞掩盖了小的高度病变细胞。有些高度病变早期ASC是唯一发现。存在“诉讼” 细胞或拥挤的细胞团使诊断困难视力疲劳，注意力不集中。“金标准” 有错。 细胞学制片因素染色欠清晰染液中漂浮物污染贴错标签 病变本身因素不能脱落足以诊断的细胞位置高难取到黏液质地影响涂片病变越重出血坏死越明显满意标本率越低，假阴性率越高有些肿瘤巴氏涂片诊断较困难，如：疣状癌，微偏腺癌，腺癌，腺鳞癌，淋巴瘤和肉瘤有些肿瘤生长快可在两次常规筛查之间出现佛山市中医院周末健康讲座 第 3 页 共 15 页宫颈细胞学检查的改进措施 有性活动的女性每年都应做宫颈细胞学检查，有连续3次以上阴性、满意的涂片后
7、可根据医生指导适当延长检查间隔。 所有不正常涂片都必须随访，观察到的可疑病变必须活检，祛除不满意因素后重复取材。 取材前24小时应禁止灌洗和性交。 取材工具采用宫颈刷。 取材必须在直接观察下进行，必须有一定压力，不能擦洗、清洁宫颈，窥器除水外不能用其他润滑剂。涂片要快、薄、充分，固定及时，标记明确，申请单要填写完全。 染液要新鲜，要经常过滤，妇科和非妇科分开染。LCT/LBP液基细胞学在宫颈病变筛查中的应用 宫颈癌的危害：宫颈癌的发病率位居女性恶性肿瘤第二位，仅次于乳腺癌。全世界最新统计，每年有近60万新发病例，死亡人数在20万以上，发病率以每年2%-3%的速度递增。目前我国的宫颈癌发病率和死
8、亡率呈上升趋势，并明显趋向年轻化，以36岁至50岁最为集中。我国已知宫颈癌患者40余万人，死亡率达11.3% ，已经远远高于发达国家4%的死亡概率，成为城市中死亡率增长最快的癌症。 宫颈疾病的病变时间：宫颈疾病从早期发现到恶性癌变需6-10年的时间，在这段时间内，现代医学手段完全可以把癌前病变检查出来。 LCT/LBP筛查实用人群 ：从未接受过宫颈液基细胞学筛查的患者过早性生活（18岁以前性交）性伴侣数目较多者曾患与性行为有关的疾病，如梅毒、艾滋病等HPV病毒感染长期慢性宫颈炎注意：在常规体检中，宫颈细胞学筛查重点是中青年人群，而不是老年人。 技术优势 几乎保留了取材器上的所得到的全部样本成比
9、例的提取，细胞成分全、分布均匀祛除样本中过多的血液和黏液，减少了对上皮细胞的覆盖细胞单层平铺减少了重叠大大降低了不满意标本的比率湿固定标本结构清晰易于鉴别每张涂片观察细胞量减少，减轻视力疲劳有利于辅助细胞学诊断工作开展宫颈LCT/LBP液基细胞学技术步骤塑料宫颈刷采集宫颈及阴道脱落细胞，置细胞保存液中，震荡30秒，加 4ml细胞分离提取液；全自动样本转移机转移8ml样本，离心 2min，去上清，再次离心10min，倒出上清，震 荡30秒；全自动制片染色机制片、染色，酒精脱水、二甲笨透明，封片。宫颈LCT/LBP液基细胞学技术关键标本的取材是重点之一 主要分为采样、漂洗、紧固、记录、送检几个步骤
10、。取材：应尽可能避开月经期。取材24小时以前，不能作阴道上药及冲洗，不能过性生活，宫颈分泌物较多时，应用棉签轻轻擦去粘液（不可用力擦），再行取材取材应在直视第 4 页 共 15 页 2010 年 5 月 15 日主办：佛山市中医院 讲课地点：佛山市中医院体检康复楼九楼会议室下进行，扫帚样采样器对取材部位保持一 定的压力，取材过程中如发现有明显出血时，应立即停止取材。尽 避免短期内重复取材（间隔应大于3个月），以免出现假阴性结果 。 宫颈LCT/LBP液基细胞学标本取材方法采样：扫帚样采样器的尖端插入宫颈管内，两边刷毛紧贴宫颈管的外口，柔和地向前抵住采样器，并按同一时针方向转动采样器5圈以上，以
11、取得足够量的标本。注意切勿来回转动。漂洗：将扫帚样采样器插入装有保存液的小瓶内，反复推向瓶底，迫使刷毛 全部散开，共重复10次。然后，在溶液中快速旋转采样器，以进一步将细胞样本漂洗下来（请将扫帚样采样器的刷头遗留在保存瓶内）紧固并记录：拧紧瓶盖并将患者的姓名和标本编号写在保 存瓶上的标签空白处（或将条形码一式两份分别贴在细胞学检查申请单和保存瓶上）。送检：详细填写细胞学检测申请单，连同标本保存瓶一并 送病理科检查。LCT/LBP制片技术关键 重点步骤：振荡,经过振荡这种物理作用力可以打散粘液与细胞间的连接,使粘液团松散,大团块变成几个小团块甚至瓦解,释放粘附其中的细胞。 振荡要求：振幅为8mm
12、且时间为30min时振荡效果最好。这可能主要是由于涡旋振荡使采集器上的细胞完全进入标本瓶内的液体中,液体旋动既分散了粘液、混匀了细胞又非常柔和,不会损伤细胞。振荡完后标本静置5min取液体中下制片;大粘液、血液、细胞团块和杂质因重力作用沉淀在瓶底,细胞成分主要集中在中间层,上层以水分、液体为主。所以制成的玻片细胞团块及杂质少而可用于诊断的细胞量却足够。若振幅、时间再提高或延长均对细胞形态、结构有一定影响。血液标本是含有粘液的标本里混有大量红细胞。最根本还在于祛除粘液,所以经过高振幅长时间振荡同样能得到好的效果。 震荡效果：此法制片后细胞均匀、规则铺开,背景清晰干净,最大程度减少粘液及血液因素的
13、干扰,值得一试。LCT/LBP标准化细胞片 液基薄层细胞片面积为134 mm2 ,涂片面积虽小但均具备充足有效诊断细胞,背景清晰,无污染,细胞可见三维结构,核质明了,且制片、染色俱佳。 经处理液处理后不仅去除了黏液、红细胞,而且保存了细胞的完整无损,细胞核、核质、核仁更加细腻、清楚,获得了三维立体结构。同时保全细胞抗原生物特性,对细胞免疫化学染色无任何影响。有利于肿瘤细胞的鉴别诊断。宫颈液基细胞学TBS报告系统The Bethesda System for Reporting Cervical Cytology 美国国家癌症研究所组织在马里兰州Bethesda会 议:1988/1991/200
14、1TBS的主要内容 标本质量评估 判度意见/结果 对诊断及治疗的建议常用英文缩写 NILM (negative for intraepithelial lesion or malignancy) 无上皮内病变或恶性病变 ASC (atypical squamous cells ) 非典型性鳞状细胞 ASC-US（ atypical squamous cells of undetermined significance）意义不明确的非典型性鳞状细胞 ASC-H（ atypical squamous cells，cannot exclude high-grade squamous intraepi
15、thelial lesion ）非典型性鳞状细胞， 不除外高级别鳞状上皮内病变 LSIL（low-grade squamous intraepithelial lesion）低级别鳞状上皮内病变佛山市中医院周末健康讲座 第 5 页 共 15 页 HSIL（high-grade squamous intraepithelial lesion）高级别鳞状上皮内病变 其他巴氏分类法与TBS分类法比较Papanicolaous The Bethesda System阴性，良性细胞改变： 正常、感染、反应性改变 核异质细胞 无确诊意义不典型细胞： ASCUS、AGUS 可疑恶性(癌) 细胞 低度鳞状上皮
16、内病变 (LSIL)： CIN、HPV 高度可疑恶性(癌) 细胞 高度鳞状上皮内病变 (HSIL)： CIN 、 恶性(癌) 细胞 癌 标本质量评估 临床资料，鳞状上皮细胞数量， 红细胞、粘液及炎症影响，有无宫颈管/ 移行区成分，其他 拒收 or 报 告说明。合格程度的判断因素 病人身份及标本的确认 必要的临床资料 足够数量的鳞状上皮 足够量的内宫颈/移行区细胞成分四条判断因素达到完全满意的要求：鳞状细胞10%；第四条：至少两团细胞，每团5个细胞。 基本满意，但其缺点为：缺乏临床资料、年龄、末次月经、妊娠、治疗史。部分血片、炎性分泌物过多，固定不好、空气干燥、污染等，致使50-70%的上皮细胞
17、不易判断。缺乏宫颈管上皮。 不满意：无申请单；鳞状上皮10%；血片、炎性分泌物过多，固定不好、空气干燥、污染等，致使75%以上的上皮细胞不易判断。鳞状上皮细胞数量一张液基图片最低细胞数量至少需要5000个保存完好和形态清楚的鳞状上皮细胞（简单估算） 满意：5000-20000判度意见/结果 无上皮内病变或恶性病变,包括多种微生物菌落、炎症、宫内节育器及放疗后的反应性和修复性改变 鳞状细胞异常 腺细胞异常 来源于子宫外的各种肿瘤非肿瘤性所见 微生物阴道滴虫真菌,形态学符合念珠菌属第 6 页 共 15 页 2010 年 5 月 15 日主办：佛山市中医院 讲课地点：佛山市中医院体检康复楼九楼会议室
18、菌群变化,提示细菌性阴道炎细菌,形态学符合放线菌属细胞变化,符合单纯疱疹病毒感染说明：真菌,形态学符合念珠菌属：念珠菌芽孢37 m，长圆形，假菌丝和菌丝嗜伊红到灰褐色;假菌丝和芽孢沿纵轴排列;在中性白细胞和鳞状细胞堆的背景中呈发芽树枝状的酵母菌（菌丝、芽孢或孢子）;上皮细胞被串起形成烤肉串外观。 萎缩 反应性细胞改变:炎症(包括典型的修复)放疗宫内节育器(IUD)球杆菌形态符合阴道变异菌群 较多鳞状细胞被球杆菌覆盖，常沿细胞膜边缘排列，外观似线索状而称为“线索细胞”（clue cells）。 小的球杆菌充满上皮细胞的背景中称为“细菌过生长”。杆菌形态符合放线菌属 锐角分支细丝样,似破棉球絮样的
19、纷乱团，周围见肿胀的细丝或“小棒”。 急性感染时可发现多量嗜中性白细胞。滴虫性阴道炎 滴虫呈梨形，约15- 30m。 滴虫在上皮细胞的边缘，与嗜中性白细胞混掺，鞭毛不清。 滴虫胞浆灰蓝色，有时见嗜伊红小颗粒。 滴虫核梭形，偏位于胞浆中， 长轴多与胞浆平行呈深灰色。 上皮细胞胞浆红染，核周晕出现。 可伴随纤毛菌感染。疱疹病毒感染有关细胞学改变 细胞增大并且大小不一。 细胞多核、核拥挤但不重叠。 核呈胶质状似毛玻璃样，核边缘部深染似核套。 核内可见嗜深曙红色包涵体，大小不一不规则，其周围有晕。萎缩性反应性细胞改变 萎缩性鳞状细胞和外底层样细胞核增大淡染。 以中、底层细胞为主。 外底层样细胞胞浆红染
20、或桔红，并且核固缩似不全角化细胞。炎症反应性细胞改变 核增大为正常中层鳞状细胞核 12.5 倍, 颈管细胞增大更明显。 偶见双核或多核。 核轻度深染，染色质细而均匀。 可见核固缩和核碎裂； 核形整齐光滑，大小一致。 有时见小核仁。 胞浆丰富，可见空泡和核周空晕，其周围胞浆不增厚。 可见储备细胞增生和化生细胞。 修复细胞除有上述特点外，核仁明显；细胞呈单层片状出现；常无单个异常核，核极佛山市中医院周末健康讲座 第 7 页 共 15 页向一致，可见规则核分裂。修复细胞修复细胞的核仁明显；细胞呈单层片状出现；常无单个异常核，核极向一致（水流状核极向），可见规则核分裂。上皮细胞异常 ASCUS 意义未
21、明确的非典型鳞状细胞 LSIL 低度鳞状上皮内病变(CIN)包括HPV感染所致挖空细胞 HSIL 高度鳞状上皮内病变(CIN、) 鳞状细胞癌ASC-US（意义不明确的非典型性鳞状细胞） 核大于正常中层细胞核的2.5-3倍 N/C轻度增加 核、细胞形状轻度异常 核轻度深染，染色质分布均匀 核轮廓光滑、规则、核轮廓不规则 可见双核细胞 应建议3-6个月后复查ASC-US的临床意义 炎症、刺激、IUD：3- 6个月内复查。 涂片固定不好： 3-6个月内复查。 癌前病变、癌： 立即阴道镜活检。 ASC-US诊 断比例不超 过LSIL的2-3倍。注意：因许多因素可导致诊断为：ASCUS，对于此诊断，我们
22、建议都取活检最为安全。细胞改变与HPV感染有关 核周空穴细胞：核增大轻度深染、核周具不规则空晕，胞浆呈蓝、 红或嗜双色，弥散或成片出现。 细胞出现清楚的核周空晕，边缘胞浆浓集，核异常时可诊为 HPV感染；只有核周空晕，无核异常不能诊断HPV感染。LSIL（低度鳞状上皮内病变） 细胞单个或片状排列 核异常，一般限于胞浆成熟的细胞内 核大于正常中层细胞核，至少3倍 核大小、形状中度不一致 双核或多核细胞常见，核仁少见或不明显 核深染，染色质分布均匀。HSIL（高度鳞状上皮内病变） 细胞单个、片状排列 核异常，大多数具不成熟胞浆，花 边状、淡染或致密化生型胞浆，偶见胞浆呈成熟或致密角化型 核增大，实
23、际可能比LSIL要小；与LSIL 相比胞浆面积减少 N/C 明显增大 核明显深染，染色质呈细颗粒状或块状，但分布均匀，核仁常不明 显。鳞状细胞癌 细胞呈单个或成团分布；第 8 页 共 15 页 2010 年 5 月 15 日主办：佛山市中医院 讲课地点：佛山市中医院体检康复楼九楼会议室 细胞表现HSIL的所有特征，还具有突出的大核仁及不规则染色质分布； 肿瘤性代谢物（坏死碎片，陈旧性出血）常见。腺上皮细胞病变 AGUS意义未明确的非典型腺上皮细胞 宫颈管腺癌 宫内膜腺癌 宫外来源腺癌 腺癌（来源不明）AGUS（非典型性宫颈腺细胞） 细胞呈片状排列，轻度拥挤重叠 核为正常颈管细胞核的2-3倍 细
24、胞核大小轻度不一致 核轻度深染 常见核仁 胞浆丰富，细胞边界清晰AGUS（非典型性宫内膜腺细胞） 310个细胞成小群排列 核轻度增大 核轻度深染 可见小核仁 细胞边界不甚清晰 与宫颈内膜细胞比较，胞浆缺乏腺 癌 细胞呈团片状、团块状排列或弥散分布。 核增大、核边增厚而不规则。 核仁增大、增多。 胞浆蓝染、可能红染，可有空泡出现。 可同时出现异常鳞状细胞，为腺鳞癌或腺癌鳞化。 可出现癌性背景。细胞学检查的非常重要环节 获取达到要求的细胞学标本 制备良好的涂片 合格的细胞学诊断医生医师资格证书+医师执业证书 临床医生与病理医生的沟通 根据中山医科大学附属三院对58292例研究液基细胞学检测的资料,
25、 该组患者年龄为16-76岁；对性质不明的非典型鳞状上皮细胞/腺上皮细胞（ASC-US/AGC）及其以上的上皮细胞阳性病例中的1129例进行阴道镜活检；同期进行宫颈传统巴氏涂片5112例纳入研究, 患者年龄为22-71岁。结 果 上皮细胞异常58292例LCT 涂片中,上皮 细胞异常阳性涂片3172例(5.44%),ASC-US 2250例，占 3.86；ASC-H 105例，占0.18；LSIL 495例，占0.85；HSIL 210例，占0.36；SCC(鳞癌） 18例，占0.03；AGC 88例，占0.15；佛山市中医院周末健康讲座 第 9 页 共 15 页ACC(腺癌) 6例，占0.0
26、1。 细胞学与病理活检符合率: ASC-H 97.8(87/89例)LSIL 98.4(307/312例)HSIL 98.9(176/178例)鳞癌 100.0(18/18例)腺癌 100.0(6/6例) LCT诊断ASC-US中510 例进行活检：114例CIN I, 20例CIN II, 7例CIN III , 2例鳞癌； LCT诊断为 AGC中16例活检结果显示, 2例CIN I, 1例CIN II。 结论液基细胞学对宫颈上皮细胞异常的检出 Bjorn Strander等：CIN2或CIN3、原位腺癌或癌的发现率，LCT较巴氏法高出40%。 本研究：液基细胞学的阳性率（5.44%）较巴氏
27、（3.69%）高，其中：液基对低级别病变（ASC-US、AGC 、LSIL）的检出率 较巴氏高（P 0.05），而高级别病变（HSIL、ASC-H、鳞癌、腺癌）的检出率与巴氏无差异（P0.05），显示对低级别病变的诊断上，液基的灵敏度较高，而假阴性率较巴氏为低。 制片技术的改进 观察视野的集中 诊断方法的改进 研究显示：LSIL、ASC-H、 HSIL、鳞癌、腺癌的LCT细胞学与活检符合率为: 98.4、97.8、98.9、100.0和100.0。 显示对LSIL及更高级别的病变，液基细胞学检出的灵敏度高，假阴性率（漏诊率）低，建 议细胞学确认LSIL 及以上病变者必须进行阴道镜检查。 510
28、例ASC-US 中包括114 例CIN I 、20例CIN II、7例CIN III 和2例鳞癌（过轻诊断率28.0%，143/510例）；16例 AGC中包括2例CIN I 和1例CIN II（过轻诊断率18.7%，3/16例）。分析原因(1) 出血、炎性及癌性渗出影响取材、上皮细胞过少、破坏以及遮盖细胞；（2）医生的诊断经验。对临床表现接触性出血、 宫颈糜烂明显、阴道 镜发现肿物的ASC-US 和AGC 患者尽早进行活检，以免贻误治疗。液基细胞学对微生物感染的检出 液基的阳性检出率（4.63%）较巴氏（1.02%）高（P 0.05）；其中HPV/类似HPV 感染、念珠菌感染、细菌过度生长较
29、巴氏高（P 0.05）；而疱疹和滴虫检出率与巴氏无差异（P0.05）。 最近文献报道，微生物感染率11.78-12.91%， 细 菌3.97-5.10%，霉菌2.63-4.8%，滴虫 1.06-2.17%，HPV 1.51-2.79%，疱疹 0.21%。结果显示，本地区念珠菌及病毒感染率较高，其次为细菌感染，而液基对三者的检出敏感性较巴氏为好，液基细胞学可以作为诊断宫颈特异性微生物感染的有效方法。液基细胞学检测在非妇科肿瘤筛查中的应用 重要价值：历史性技术突破。 应用价值：涵盖广泛，包括痰液、胸腹水、尿液、刷检物、积液、针吸液、溢液、渗出液、囊液、灌洗液、冲洗液及分泌物等。其中以痰液及胸腹腔积
30、液应用最为常见。 基本操作原理：与妇科宫颈细胞学相近，仅保存液具有一定的差异。由于痰液粘液较多，制片前常先除去粘液成分。痰液LCT/LBP 液基细胞学检测价值 痰液直接涂片细胞学检查是早期诊断肺癌的重要方法之一,尤其对隐性肺癌具有独特的作用易行,患者无痛苦,容易接受,是非损伤途径早期诊断肺癌的最佳手段。然而该方法的阳性诊断率一直很难提高,重要的原因是痰液内细胞成分混杂,坏死细胞碎屑较多,加之粘液的干第 10 页 共 15 页 2010 年 5 月 15日主办：佛山市中医院 讲课地点：佛山市中医院体检康复楼九楼会议室扰,常将癌细胞包裹、掩蔽,故假阴性问题比较突出 。液基细胞学检测系统,LCT/L
31、BP) 是1999 年获美国食品与药品管理局( Food and Drug Administ ration , FDA)批准用于临床的一项新技术,通过祛除标本内的粘液、杂质及炎性细胞,制成视野清晰的薄层涂片,在宫颈细胞学诊断上已得到了细胞学工作者的一致认可。痰液LCT/LBP 液基细胞学检测现状 痰标本传统直接涂片检查在国内开展非常普遍，但是阳性检出率非常低 痰标本液基细胞学检查在国内正在兴起，但是制片质量存在许多不足。 传统涂片的阳性检出率都低 医疗条件差，检查费用低等因素是造成国内普遍开展痰传统涂片检查的原因 痰液基细胞学制片在国内外都开展得很少 国内缺少专业的细胞学诊断医生痰液LCT/L
32、BP 液基制片与传统涂片的比较 制片效果：传统涂片收集细胞少；细胞固定不及时；杂质成分不能有效祛除，严重影响制片质量；涂片过厚，黏液和炎细胞遮挡视野，假阴性率高。液基制片能完全解决传统涂片以上存在的问题。 提高阳性检出率：300%。液基细胞学制片是将所有痰标本都收集起来，祛除杂质成分后先混匀，再转移，只要咳出的痰标本中有肿瘤细胞就不会漏诊。这是痰液基制片阳性率显著提高的关键所在。 费用：与宫颈液基细胞学检查价格一致影响痰液传统涂片阳性率的因素 人为的随机取样导致病变细胞不能准确的转移至载玻片上 过多的黏液及过厚的炎性细胞遮挡视野 传统涂片取材时，医生凭经验挑取少量标本进行制片，极易漏掉肿瘤细胞
33、。痰液LCT/LBP 基制片镜下特点 背景干净，杂质成分少 细胞均匀平铺，便于观察 细胞无退变，细胞体积与传统涂片比较感觉稍微缩小 采用离心自然沉降式技术，腺癌的三维立体结构非常明显。痰液LCT/LBP 液基细胞学的取材 留痰方法：1. 咳痰前需用清水漱口，清除口腔内唾液，食物残渣。住院病人最好早晨进食前咳痰，注意不要饮用牛奶等。2.向病人解释正确咳痰对诊断的重要性，嘱咐病人深呼吸，从肺部深处用力咳出痰液1-2口（约3至5毫升）、吐入痰液专用保存瓶中，避免“口水样”泡沫痰及鼻吸痰。3.拧紧瓶盖，并适当摇晃几下，以便保存液与痰标本混匀。在瓶壁上写好病人的姓名，年龄，取样日期，填写好申请单送检。
34、4.病人如果痰量少，难以咳出，可以采取超声雾化吸入诱导取痰。 留痰时间教科书多主张晨痰,因为患者经一夜睡眠后,异常分泌物常积聚在呼吸道内,细胞来源较广泛。但是晨痰有其不可克服的缺陷: 晨痰在体内停留时间较长 ,细胞往往发生不同程度的退变; 老年人尤其是有慢性咽炎、鼻咽炎的人,清晨的头几口痰往往是上呼吸道的分泌物 ,使诊断的准确性降低。因此,我们认为晨痰并非良好的细胞学检材。如患者痰量较多或留痰并不困难的病例, 最好在早晨排痰以后,留取上午8 - 9时的新鲜痰比较适宜。因为这些痰合格率较高,细胞退变较少,有利于细胞学检查。痰液LCT/LBP 液基细胞学制片程序 前期处理：固定消化黏液过滤黏液丝清
35、洗两次离心收集细胞成分。 机器制片：全自动制片染色机进行佛山市中医院周末健康讲座 第 11 页 共 15页痰液LCT/LBP 液基细胞学制片应用小结 痰液液基薄层细胞涂片的涂片面积比传统涂片缩小,但细胞 的总采集量大大增加。传统细胞涂片法以痰为例,仅是一口痰的一小部分采集到玻片上,而液基薄层细胞涂片法却是整口痰经处理后全部被采集到玻片上,且可采集2 张玻片以上。审片面积缩小,有利于更仔细地审片,传统涂片审片需要7 min ,液基细胞学检测审片时间平均为2. 5min。液基细胞学检测同时还具有自动涂片、染色,减少了人工操作和接触标本的机会,避免了感染机会,提高了诊断细胞病理学的标准化、自动化。因
36、此值得临床广泛推广使用。痰液LCT/LBP 液基细胞学应用小结 常规涂片方法具有以下不足之处: 背景细胞太多太杂 ,如活检、刷检标本涂片中,背景上红细胞太多;痰涂片内有大量的支气管分泌物,背景污秽。 取材时,由于选材不当或其他原因,易将标本中有癌细胞容易肿胀、退变而影响诊断,肿瘤细胞明显变形,核质模糊,获得的标本能及时注入液基中保存备用,细胞不易变形。能最大限度地收集到癌细胞成分。标本中的红细胞、炎症细胞及黏液等各种污秽物能有效地被过滤清除,涂片背景较清晰。涂片范围小,细胞分布均匀,镜检省时、省力、快捷。LCT/LBP检查还可以根据需要制作多张涂片,以备做免疫细胞化学检查。鉴于上述优缺点,传统
37、检查方法可与LCT/LBP检查方法对照应用,以加强互补性、提高阳性率和分类分型的准确率。其他非妇科液基细胞学检测 包括尿液、胸腹水、刷检物、积液、针吸液、溢液、渗出液、囊液、灌洗液、冲洗液及分泌物等。 操作方法与宫颈及痰液液基细胞学相似，只是保存液及细胞学取材具有各自的特点要求。这些非妇科标本液基细胞学制片与传统直接涂片比较，病变检出率具有显著提高。这里着重介绍尿液、胸腹水的标本取材。尿液LCT/LBP 液基细胞学检测的应用 尿液细胞学检查是健康人群泌尿系统肿瘤普查的主要方法之一，据资料和临床经验表明，尿中发现的移行细胞癌可早于临床影像学或临床检查之可见肿物数月至数年，近年来，由于细胞学制片技
38、术的进步，使细胞学诊断肿瘤的阳性率和准确性均有大幅度的提高。尿液LCT/LBP 液基细胞学检测内容 尿液细胞学检查是观察标本中有无恶性肿瘤细胞，细胞来自泌尿系统，包括肾脏，输尿管，膀胱和尿道。 尿液细胞学检查正常值：未找到肿瘤细胞。 尿液细胞学检查临床意义： 主要用于发现泌尿系统恶性肿瘤及癌前期病变，约95为移行上皮细胞癌。移行上皮细胞癌按照癌细胞的分化程度又可分为移行细胞癌0级（乳头状瘤），移行细胞癌级、移行细胞癌级、移行细胞癌级，鳞状上皮细胞癌和腺癌少见。有泌尿系统肿瘤的病人可能出现无痛性血尿，即尿液中出现血液。即使病人没有感到腹背部疼痛，小便时也无痛感，也应引起警惕。尿液LCT/LBP
39、液基细胞学检测方法 每位查体人员常规留取3次新鲜尿液，连续3天每天1次，每次取新鲜尿液35-50ml,以1500r/min，离心5min后弃去上清液，沉淀物转移至 LCT/LBP专用保存液瓶, 半小时后应用LCT/LBP制片，HE染色。如何提高尿液阳性检查率 为什么尿液的细胞学检查要连续送三次? 连续送检三次能够提高尿液中癌细胞阳性检出率：第一次阳性检出率70，第二次阳性检出率80，累积二次阳性检出率提高到90。癌细胞多少每次检查亦有差异：常常三次尿中两次或一次见少数退变癌细胞，其中另一次发现保存比较好的癌细胞。三次综合判断才能明确诊断。尿液LCT/LBP 液基细胞学检测主要事项第 12 页
40、共 15 页 2010 年 5 月 15日主办：佛山市中医院 讲课地点：佛山市中医院体检康复楼九楼会议室 提高尿液细胞学检查阳性检出率关键是送检合格的尿液和合格的制片。 合格的尿液(即对诊断提供足够细胞成分的尿液)：自然尿应收集中段尿。女性病人收集尿最好由护士导尿，若条件不允许，女性病人留尿时用纱布覆盖阴道外口，以防尿液被污染。血尿者，应收集粉色尿液，若陈旧性血尿或血色浓时勿收集，因为尿液中陈旧性红细胞或红细胞太多影响供诊断的细胞成分。装尿液容器干净以避免污染。留尿液立即送检，以保持细胞成分结构清晰。每次收集lOOml即可。 合格的制片：尿液集中细胞成分要求。lOOml尿液用普通离心机分离沉渣
41、，先分装 50ral两离心管中，3000rrain 15分钟。吸弃上清液；离心 5min后弃去上清液，沉淀物转移至LCT/LBP专用保存液瓶, 半小时后应用LCT/LBP制片，HE染色。尿液LCT/LBP 液基细胞学检测小结 移行细胞癌多数发生于老年人，因此老年人体检时除尿常规外，应做细胞学检查。根据北京医院的统计资料，体检563例共发现癌细胞病例10例，占1.8%，全部病例均有组织学证实，必须指出，体检前均无症状，临床上也没有任何肿瘤的证据，完全是细胞学首先提出癌的问题，因此我们认为老年人常规进行尿细胞学检查是早期发现移行细胞癌的简单易行的方法，值得推荐。尿液LCT/LBP 液基细胞学检查优
42、点 所用尿量较多，收集细胞较多 细胞涂片前已经固定，因此涂片中细胞很少干涸引起的变化，结构较清晰 细胞基本上为单层排列，较少重叠 清除了部分红、白细胞，有利于涂片观察。 胸腹水LCT/LBP 液基细胞学检查 胸腹水细胞学检查是临床使用最多的诊断方法，除了检测有无癌细胞外，还可以检查有无间皮肿瘤及淋巴瘤等，对临床的诊治具有重要意义。过去以直接涂片为主要手段，检查的准确性受到一定的影响。自从液基细胞学的发明以来，对胸腹水的应用已取得了较为满意的结果。除痰液、尿液、胸腹水外其他非妇科液基细胞学检测 包括刷检物、积液、针吸液、溢液、渗出液、囊液、灌洗液、冲洗液及分泌物等液基细胞学检测。 方法：除了保存
43、液作为专用外，其他流程同痰液、尿液及胸腹水液基细胞学检查方法一致。获取含有病变细胞的物质后迅速放入专用保存液中并震荡、离心，按照LCT/LBP液基细胞学检测。流程进行制片。乳头溢液 （一）乳腺可触及肿块伴有溢液者的标本采集 用手指轻轻地按摩和挤压，使溢液溢出，并及时用玻片承接。 （二）乳腺无肿块发生乳头溢液者的标本采集 用手指从乳晕周围朝乳头方向轻轻按摩和挤压并即时用玻片承接。 （三）乳头表面有黄绿色黏稠物的标本采集 先用消毒棉签将粘稠物擦去，继续从乳晕至乳头按摩挤压促使溢液流出。 （四）乳头表面有结痂伴有溢液者的标本采集 有时乳头表面因有结痂而妨碍溢液流出，此时应先将结痂剥去后再按摩挤压乳头
44、乳晕促使溢液流出。液基细胞学在妇科与非妇科肿瘤筛查中的重要作用 应用广泛。 阳性检出率高。 假阳性低。 操作程序自动化。 费用可以接受。佛山市中医院周末健康讲座 第 13 页 共 15页鼻窦炎的防治佛山中医院耳鼻喉科 陈锦明 主治医师定义 鼻窦炎可分为急性化脓性鼻窦炎和慢性化脓性鼻窦炎，急性化脓性鼻窦炎是耳鼻喉科常见病，多继发急性鼻炎，主要鼻窦粘膜的急性化脓性炎症，严重者累及骨质，并引起周围组织和邻近器官的并发症。或转入慢性化脓性鼻窦炎，主要以手术治疗为主。鼻窦解剖 鼻窦是围绕鼻腔、藏于某些面颅骨和脑颅骨内的含气空腔，一般左右成对，共4对。依其所在颅骨命名，即上颌窦、筛窦、额窦和蝶窦。窦内粘膜
45、于鼻腔粘膜连接，各有窦口与鼻腔相同。病因 全身病因 过度疲劳、受寒受湿 营养不良、维生素缺乏 生活工作环境不卫生 贫血、糖尿病、甲状腺功能不足 上呼吸道感染、 急性传染病 流感、麻疹、猩红热、白喉 局部病因 鼻腔疾病：急慢性鼻炎、鼻中隔偏曲、中鼻甲肥大、变应性鼻炎、鼻息肉、鼻腔异物和肿瘤等 邻近器官的感染病灶：扁桃体炎、腺体肥大炎、上第2尖牙、第1、2磨牙的牙根感染。 直接感染：鼻窦外伤、异物进入鼻窦、游泳跳水不当或用力擤鼻致污水进入鼻窦。 鼻腔填塞物时间过久 气压聚变：鼻窦腔负压，炎性物及污物吸入鼻窦致病菌 肺炎双球菌、溶血型链球菌、葡萄糖球菌、卡他球菌 杆菌：流感杆菌、变形杆菌、大肠杆菌
46、厌氧菌临床表现 全身症状 上感或急性鼻炎症状加重、发热畏寒、食欲不振 局部症状 鼻塞：持续单侧或双侧、嗅觉减退 流脓涕：鼻腔大量脓性或粘脓性鼻涕、厌氧菌恶臭、后流咽喉恶心咳嗽咳痰等 头痛：前组感染额部颌部、后组感染颅底枕部预防第 14 页 共 15 页 2010 年 5 月 15日主办：佛山市中医院 讲课地点：佛山市中医院体检康复楼九楼会议室 增强体质，改善生活及工作环境。经常锻炼身体，提倡冷水洗脸或冷水浴、日光浴。劳逸适度，饮食调和。 谨防感冒和其他急性传染病。 积极治疗贫血和糖尿病 合理治疗急性鼻炎、鼻腔、咽部和牙的各种慢性疾病，保持鼻腔鼻窦通气引流和预防感染扩散。 提倡正确的擤鼻法：紧压一侧鼻翼，轻轻擤出对侧鼻腔的鼻涕；或将鼻涕吸入咽部再吐出。治疗 抗炎治疗 最主要 全身足量抗生素治疗，及时控制感染，防止发生并发症和转为慢性。 局部治疗 血管收缩剂滴鼻，可以粘膜消肿减轻鼻塞，改善引流 如1%麻黄素滴鼻剂 针刺迎香、鼻通穴 或行穴位按摩，可减轻鼻塞。 体位引流 目的是
