1、紫外可见分光光度计的原理与使用方法,目录,紫外可见分光光度计的原理 紫外可见分光光度计的组成结构 紫外可见分光光度计的操作步骤 紫外可见分光光度计的校准 紫外可见分光光度计的日常维护，保养 紫外可见分光光度计的常见故障排除,紫外可见分光光度计的原理,它是利用物质的分子或离子对某一波长 范围的光吸收作用，对物质进行定性分析， 定量分析及结构分析，所依据的光谱 是分子或离子吸收入射光中特定波长的光 而产生的吸收光谱。 按照所吸收光的波长区域不同，分为 紫外分光光度法和可见光光度法，合称 为紫外-可见分光光度法,紫外可见分光光度计的特点,1 与其它光谱分析方法相比，其仪器设备和操作都比较简单，费用少
2、， 分析书读快。 2 灵敏度高 3 选择性好 4 精密度和准确度较高 5 用途广泛,紫外可见分光光度计的组成结构,光源,单色器,吸收池,检测器,信号显示系统,组 成 结 构,光源：提供符合要求的入射光。 要求：在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱， 具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。,紫外光源-氘灯(185-375 nm),可见光源-钨灯(320-1000nm),光 源,单色器：将光源发射的复合光分解成连续光谱并可从中选出任一波长单色光的光学系统。,棱镜单色器利用不同波长的光在棱镜内折射率不同将复合光色散为单色光。,光栅单色器一系列等宽、等距离的平行狭缝以光的衍射现象和干
3、涉现象为基础（平面反射光栅和平面凹面光栅）,单 色 器,单色器主要由狭缝、色散元件 和透镜系统组成。色散元件是棱镜和反射光栅的组合狭缝和透镜系统控制光的方向,吸收池：又叫比色皿，用于盛放待测溶液和决定透光液层厚度的器件。,主要有石英吸收池和玻璃吸收池两种。在紫外区须采用石英吸收池，可见区一般用吸收玻璃池。,吸 收 池,主要规格0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm和5.0cm,注意事项：手执两侧的毛面，盛放液体高度四分之三。,检测器：利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号。,常用的检测器有光电池、光电管及光电倍增管。,检测器,光电池 光电管 光电倍增管,信号显示器,以检流计或
4、微安表指示仪表数字显示和自动记录型装置,信号显示系统,紫外可见分光光度计的操作步骤,打开电源开关,检验吸收池的成套性 （具体过程在后面内容中操作）,选择工作波长（按设定键，以及增加、减小按钮，进行设定）,润洗比色皿，依次装入参比溶液和测量溶液,参比溶液于光路中，透射比模式下同时调0和100%,在吸光度模式下，测定测量溶液的吸光度,选择测量方式（按方式键选择透射比模式与吸光度模式）,同学们根据教师的要求用白纸片遮住光路，改变波长从750nm到400nm，观察白纸片中颜色的变化。,波长准确度的准确检查,谱钕滤光片吸收曲线,苯蒸汽的吸收曲线,紫外可见分光光度计的校准（一）,的溶液的透射比,以0.00
5、1mol.L-1HClO4为参比，以1cm的石英比色皿做吸收池，分别在235、257、313、350波长处测定相应溶液的透射比。,紫外可见分光光度计的校准（二）,透射比正确度的检验,JJG178-96规定 ：石英吸收池：220nm、蒸馏水； 350nm、 K2Cr2O7 0.001mol.L-1HClO4溶液； 玻璃吸收池：600nm、蒸馏水；,相对校正法：,用一套比色皿装待测试样的溶剂，以其中一个为参比，测定其他吸收池的吸光度。,若吸光度为零，或相等，即可配对。,若不相等，可选最小吸光度值的作参比，测定其它的吸光度，求修正值。,紫外可见分光光度计的校准(三),吸收池成套性检验,对仪器工作环境的要求 稳固的工作台 温度、湿度合适,仪器保养和维护方法 仪器工作电源光源使用注意事项单色器使用注意事项正确使用吸收池,紫外可见分光光度计的日常维护，保养,紫外可见分光光度计的常见故障排除,紫外可见分光光度计的常见故障排除,THE END,
