1、生物学中常用的试剂: 1.斐林试剂: 成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和 0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:将斐林试剂甲液和乙液混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热,如待 测液中存在还原糖,则呈砖红色。 2.班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。 3.双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和 0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待测液中先加入 2ml甲液,摇匀,再向其中加入 34滴乙液,摇匀。如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。 4.苏丹:用法:取苏丹颗粒溶于 95%的酒精中,摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染
2、成橘黄色(被苏丹染成红色)。 5.二苯胺:用于鉴定 DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。 6.甲基绿:用于鉴定 DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。 吡罗红:检测 RNA,呈红色7、50%的酒精溶液:用于洗去苏丹在脂肪上的浮色。 8、70%的酒精溶液:用于医学临床上的消毒灭菌。 9、95%的酒精溶液:冷却的体积分数为 95%的酒精可用于凝集 DNA 10、15%的盐酸:和 95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。 11. 龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色改良苯酚品红染液:检测染色体,红色健那绿:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿
3、色12.20%的肝脏、3%的过氧化氢、 3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和 Fe3+的催化效率。(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶) 13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、 2%的新鲜 淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。 14.碘液:用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。遇糖原变红 15.丙酮:用于提取叶绿体中的色素 16.层析液:(成分:20 份石油醚、2 份丙酮、和 1份苯混合而成,也可用 93号汽油)可用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开。 17.二氧化硅:在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。 18.碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研
4、磨时叶绿体中的色素受破坏。 19、0.3g/mL的蔗糖溶液:相当于 30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,可用于质壁分离实验。 20、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液:与鸡血混合,防凝血 21、氯化钠溶液:可用于溶解 DNA。当氯化钠浓度为 2mol/L、 0.015mol/L时DNA的溶解度最高,在氯化钠浓度为 0.14 mol/L时,DNA 溶解度最低。 浓度为0.9%时可作为生理盐水。 22、胰蛋白酶:可用来分解蛋白质。可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散于。 23、秋水仙素:人工诱导多倍体试剂。用于萌 发的种子或幼苗,可使染色体 组加倍,原理是可抑制正在分裂的细胞纺缍体的形成。 2
5、4、氯化钙:增强细菌细胞壁的通透性,可用于基因工程。 25石磊试剂:检验溶液酸碱性判断光合速率与呼吸速率快慢的关系; 26、NaHCO3/ Na2CO3 NaH/ NaH:酸碱 缓冲对调节 27NaCl:配制生理盐水(0.9%)或用于提取 DNA(0.14M 或 2M)28溴麝香草酚蓝水溶液:检测 CO2,由蓝变绿再变黄常用的实验方法 化学物质的检测方法1、淀粉碘液 2、麦芽糖斐林试剂 3、CO2Ca(OH)2 4、乳酸石蕊试剂 5、O2 熄灭、复燃 6、蛋白质双缩脲反应 实验结果的显示方法 1.光合速度CO 2吸收量 2.呼吸速度O 2消耗量3.原子途径同位素示踪法 4.细胞液浓度大小质壁分
6、离和复原 5.细胞是否死亡质壁分离的复原 6.甲状腺激素作用饲喂法 7.生长素作用向光性 8、胰岛素作用切除、移植胰腺 实验条件的控制方法 1、增加水中氧气增加水生植物、通 O2 2、减少水中氧气减少水生植物、通 N2 3、除去容器中的 CO2NaOH 4、除去叶中原有的淀粉 _暗处理 5、除去叶中叶绿素脱色处理 6、除去光合对呼吸的干扰遮光处理7、如何得到单色光棱镜折射 8、血液抗凝加柠檬酸钠试剂 检验物质 反应颜色斐林(要加热) 还原糖 砖红色沉淀双缩尿 蛋白质 紫色苏丹三/四 脂肪 橘黄/红碘 淀粉 蓝色DNA 二苯胺(加热) 蓝色DNA 甲基绿 绿色RNA 吡啰红 红色线粒体 健那绿(
7、唯一的活体染色剂)蓝绿色染色体 龙胆紫 紫色染色体 醋酸洋红 红/紫红色乙醇 重铬酸钾 灰绿色二氧化碳 溴麝香草酚蓝 由蓝变绿再变黄一、化学物质的检测方法淀粉碘液 (蓝色)还原性糖斐林试剂班氏试剂(砖红色)CO2Ca(OH)2 溶液( 澄清石灰水变浑浊)乳酸pH 试纸O2余烬复然蛋白质被蛋白酶水解 、双缩脲试剂(紫红色)脂肪苏丹染液 (橘黄色 )、苏丹染液 (红色)DNA二苯胺(蓝色)染色体龙胆紫溶液,醋酸洋红溶液二、实验条件的控制方法1、加水中氧气泵入空气或吹气或放入绿色植物2、减少水中氧气容器密封或油膜覆盖或用凉开水3、除去容器中 CO2NaOH 溶液4、除去叶中原有淀粉置于黑暗环境5、除
8、去叶中叶绿素酒精水浴加热6、除去光合对呼吸干扰给植株遮光7、如何得到单色光棱镜色散或透明薄膜滤光8、血液抗疑加入柠檬酸钠9、线粒体提取细胞匀浆离心10、骨无机盐的除去盐酸溶液11、灭菌方法培养基用高压蒸汽灭菌;接种环用火焰灼烧灭菌; 双手用肥皂冼净,擦干 后用 75%酒精消毒;实验室或接种箱用甲醛蒸汽或紫外灯灭菌;整个过程都在实验室无菌区或酒精灯旁进行。三、实验结果的显示方法光合速度O2 释放量或 CO2 吸收量或有机物生成量水生植物可依气泡的产生量或产生速率;离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目;植物体上的叶片可依指示剂(如碘液) 处理后叶片颜色深浅。呼吸速度O2 吸收量或 C
9、O2 释放量或有机物消耗量原子或分子转移途径放射性同位素示踪细胞液浓度大小质壁分离植物细胞是否死亡质壁分离甲状腺激素动物耗氧量,发育速度等生长激素生长速度(体重、体长变化)胰岛素作用动物活动状态菌量菌落数,亚甲基蓝褪色程度四、实验中控制温度的方法1、还原糖,DNA 鉴定沸水浴加热2、酶促反应水浴保温3、用酒精溶解叶中的叶绿素酒精要隔水加热、4、细胞和组织培养以及微生物培养恒温箱培养五、实验中常用器材和药品的使用1、NaOH:用于吸收 CO2 或改变溶液的 pH2、Ca(OH)2:鉴定 CO23、CaCl2 提高细菌细胞壁的通透性4、HCl:解离或改变溶液的 pH5、NaHCO3:提供 CO26
10、、NaCl:配制生理盐水或用于提取 DNA7、琼脂:激素或其他物质的载体或培养基的凝固剂8、亚甲基蓝:用于检测污水的细菌含量9、酒精:用于消毒、提纯 DNA、叶片脱色及配制解离液10、蔗糖:测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原、作为碳源和能源物质11、滤纸:过滤或纸层析12、纱布、尼龙布:过滤,遮光13、龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色14、柠檬酸钠血液抗凝剂六、一些常见的实验方法、根据颜色来确定某种物质的存在:淀粉+I2(蓝色);还原性糖 +斐林试剂(砖红色);脂肪+苏丹 ( 橘黄)或+苏丹(红色);蛋白质+双缩脲试剂(紫色);大肠杆菌+伊红和美蓝(菌落为深紫色,有金属光泽)
11、、用颜色标记法来确定原肠胚三个胚层的分化情况。、用荧光标记法来证明细胞膜具有一定的流动性、同位素示踪法:光合作用产生氧气的来源; 光合作用中二氧化碳的去向;噬菌体侵染细菌实验证明 DNA 是遗传物质,蛋白质不是遗传物质;DNA 的复制是半保留复制。、确定某种元素为植物生长必需的元素的方法:水培法(完全培养液与缺素完全培养液对照 )、获得无籽果实的方法:用适宜浓度的生长素处理花蕾期已去雄的子房,如无籽蕃茄、诱导染色体变异,如无籽西瓜。、确定某种激素功能的方法:饲喂法,切除注射法,阉割移植法,切除口服法。、确定传入、传出神经的功能:刺激+观察效应器的反应或测定神经上的电位变化。、植物杂交的方法雌雄
12、同花:花蕾期去雄+套袋 +开花期人工授粉+ 套袋雌雄异花:花蕾期雌花套袋+开花期人工授粉+套袋、确定某一显性个体基因型的方法:测交; 该显性个体自交。、确定某一性状为显性性状或隐性性状的方法:具有一对相对性状的纯合体的杂交自交,观察后代是否有性状分离。、确定某一个体是否具有抗性基因的方法:确定小麦是否具有抗锈病基因,用锈病菌去侵染,一段时间后,观察有无锈斑出现。、鉴定血型的方法:用标准血清与待测血型混合,在显微镜下观察血液的凝集情况。、育种的方法:杂交育种;人工诱变育种 ;单倍体育种;基因工程育种; 细胞工程育种;多倍体育种等。、测定种群密度的方法:样方法; 标志重捕法、生态瓶的制作方法;瓶必须透明,且封闭、分离微生物的方法:平板划线法;用选择培养基培养 (如:圆褐固氮菌的分离,金黄色葡萄球菌的分离,细菌和酵母菌的分离)、测定微生物群体生长的方法:测定细菌的数目-显微计数测定细菌的重量-取一定体积的培养基,经离心分离,反复洗涤后,称湿重,或烘干后称干重