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喷洒微酸性电解水对荞麦芽菜生长的影响.pdf

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1、第 28 卷 第 9 期 农 业 工 程 学 报 Vol.28 No.92012 年 5 月 Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering May 2012 159喷洒 微酸性电解水 对 荞麦芽菜 生长的影响曹薇,张春玲,李保明( 中国农业大学农业部设施农业工程重点实验室 , 北京 100083)摘 要 : 针对荞麦 ( F. tatarium) 芽菜生产过程中微生物污染造成的烂种 、 烂苗和食品安全问题 , 该文利用微酸性电解水在荞麦芽菜浸种和发芽过程中进行喷洒 , 考察微酸性电解水对荞麦种子发芽特性 、 种子

2、表面微生物和芽菜品质的影响 。试验结果表明 : 荞麦种子浸种宜采用有效氯浓度 ( available chlorine concentration, ACC) 为 40 mg/L、 pH 值为 5.0 的 微酸性电解水 , 发芽过程喷洒 ACC 为 50 mg/L 的微酸性电解水能有效控制荞麦芽菜表面细菌和真菌数量 , 增加芽菜的苗高以及还原糖 、 芦丁含量 , 对芽菜产量和干质量无影响 。关键词 : 杀菌 , pH, 试验 , 微酸性电解水 , 苦荞麦芽菜 , 浸种 , 品质doi: 10.3969/j.issn.1002-6819.2012.09.027中图分类号 : S129 文献标 志

3、 码 : A 文章编号 : 1002-6819(2012)-09-0159-06曹 薇 , 张春玲 , 李保明 . 喷洒微酸性电解水 对 荞麦芽菜 生长的 影响 J. 农业工程学报 , 2012, 28(9): 159 164.Cao Wei, Zhang Chunling, Li Baoming. Effect of spraying subacidic electrolyzed water on buckwheat sprouts growthJ.Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering (Transac

4、tions of the CSAE), 2012, 28(9): 159 164. (in Chinesewith English abstract)0 引 言 苦荞麦 ( F. tatarium) 属蓼科荞麦属草本双子叶植物 ,是独特的食药两用型经济作物 1-2, 营养丰富 。 用荞麦培育出的荞麦芽菜富含多种氨基酸 , 如亮氨酸 、 缬氨酸等 ,无机盐及 VB1、 VB2 等 ; 更为突出的是荞麦芽菜中富含芦丁 , 芦丁具有软化血管 , 降低血脂和胆固醇的功效 , 对心血管疾病 、 高血压 、 糖尿病等有较好的治疗作用 3。 芦丁含量可作为荞麦产品评价的重要因素 , 不同的荞麦产品中芦丁的含

5、量不同 , 可能是因为 芦丁降解酶存在的缘故 4。 芽菜生产过程中常遇高温高湿的环境条件 , 为微生物的滋生提供了有利的温床 ; 相对封闭的生产环境使微生物的繁殖和蔓延比开放环境下更快 , 常常会造成烂种和烂苗 , 严重影响芽菜的产量和品质 。 常规的方法是使用多菌灵 、 托布津和高锰酸钾等化学杀菌剂来控制病菌 ,然而芽菜培育期短 , 采收时会有大量化学成分残留 5。 如果在栽培场所因烂种 、 病苗及通气不良产生臭味与滋生蚊蝇 , 还需要进行杀虫处理 , 生产者常用杀虫剂进行灭虫 , 造成环境污染并且影响芽菜品质 。随着物理农业技术的发展 , 现已形成了电场与电解水复合杀菌的技术 体系 , 可

6、以利用高压直流电场处理种子来杀死附着于种子表面的真菌和细菌 , 减少外源带入收稿日期 : 2011-08-13 修订日期 : 2012-04-17项目基金 : 国家自然科学基金面上项目 ( 30871957); 教育部高校博士点基金项目 ( 200800190031) ; 2007 年教育部新世纪优秀人才支持计划 。作者简介 : 曹 薇 ( 1972), 女 ( 汉族 ), 江西九江 , 博士 , 教授 , 博士生导师 。 研究方向 : 农业生物环境与能源工程 。 北京市海淀区清华东路 17 号中国农业大学 ( 东校区 ) 67 信箱 , 100083。 Email: 通信作者 : 李保明 (

7、 1961), 男 ( 汉族 ), 浙江缙云 , 博士 , 教授 , 博士生导师 。 主要从事农业生物环境工程方面的研究 。 北京市海淀区清华东 路17 号 中国农业大学 ( 东校区 ) 67 信箱 , 100083。 Email: 的病原基数 ; 还可以利用电解水中酸性水的强氧化性杀死栽培空间与器具或苗体上所有的病原菌 , 这 2 种方法均为无公害方法 , 不会对环境造成污染 。 微酸性电 解 水( slightly acidic electrolyzed water, SAEW) 又称微酸性离子水 、 微酸性氧化电位水 , 是在外加直流电 场的 作用下 ,采用无 隔 膜电解方式电解稀盐 或

8、 稀酸溶液而得到 的 具有特殊理化特性的水 溶液 。 其 pH 值接近中性 ( 5.0 6.5),有效氯几乎完全以杀菌效果极强的次氯酸 分子 ( HClO)形式存在 , 其杀菌能力是次氯酸根 ( ClO) 的 80 150倍左右 。 低有效氯浓度的电解水与传统含氯消毒剂比较发现 , 氯的存在形式对杀菌效果起着至关重要的作用 6。研究表明微酸性 电解 水具有与强酸性 电解 水 以及 其他含氯消毒剂同等以上的杀菌能力 7-8。 据报道 , 低有效氯浓度的微酸性电解水就能达到较好的杀菌效果 , 并且具有较好的贮藏稳定性 9-10。 Zeng 等 11研究认为有效氯浓度为 65.5mg/L 的电解水能

9、在 0.5min 内完全杀灭白色念珠菌 , 电解水对真菌的杀灭效果随有效氯浓度的升高而增加 , 但受牛血 清蛋白等有机物的干扰 。 日本学者研究了以盐酸为原料制得的微酸性 电解 水的物理化学特性及其对蔬菜的杀菌效果 , 结果表明微酸性 电解 水可以迅速杀死蔬菜表面的各种致病菌 , 且可以较好 地 杀死高温下难以 杀灭的芽孢杆菌 12-15。 Zhang 等 16研究了微酸性电解水处理绿豆及绿豆芽 , 结果表明接近中性的 pH 值和低有效氯浓度的微酸性电解水能有效杀灭绿豆及绿豆芽表面的沙门氏菌和大肠杆菌 O157:H7, 并且不会影响绿豆种子的生理活性 。微酸性电解水 腐蚀性小 , 生产过程中无

10、氯气排放 ,对环境和操作人员无危害 17-18, 应 用范围广 , 无 废水排放 , 杀菌后还原成普通水 , 属于安全 、 绿色 、 环保的消毒剂 。 微酸性电解水以其杀菌高效 、 用途广泛 、 安全方 农业生物环境与能源工程 农业工程学报 2012 年160便 、 保障品质 、 清洁环境等特点可应用于芽苗菜生产 。本文致力于将微酸性电解水应用于荞麦浸种 、 发芽过程 ,抑制生产过程中微生物生长 、 繁殖而导致的病害 , 并考察微酸性电解水对芽菜品质的影响 , 为芽苗菜规模化 、无害化生产提供理论依据和数据支持 , 以期为微酸性电解水在农业生产领域的广泛应用和推广提供参考 。1 材料和方法1.

11、1 试验材料和设备1.1.1 供试种子供试荞麦种子 ( 绿宝苦荞麦 , 太谷县绿宝种业有限公司提供 ) , 千粒质量 :( 35.56 0.05) g。 选择饱满 、成熟 、 无机械损伤 、 大小一致的种子 , 适度晾晒备用 。1.1.2 主要试剂氯化钠 、 盐酸 、 无水乙醇 、 抗坏血酸 、 草酸 、 磷酸二氢钾 、 磷酸二氢钠 、 磷酸氢二钠 、 苯酚 、 氢氧化钠 、亚硫酸氢钠 、 四水合酒石酸钾钠 、 碘 、 碘化钾 、 无水葡萄糖 、 三氯化铝 、 醋酸钾等均为分析纯 ; 营养琼脂 、 孟加拉红培养基为生化试剂 ( 化学纯 ) ; 芦丁标准品 ( 中国药品生物制品检定所 , 化学对

12、照品 ); 3,5-二硝基水杨酸 ( 化学纯 ) ; 酚酞指示剂 ( 分析纯 )。1.1.3 主要仪器设备紫外可见分光光度计 ( TU-1810DS, 北京普析通用仪器有限责任公司 ); 分析天平 ( AL104, 上海梅特勒 -托利多仪器有限公司 , 精度 0.0001); pH/ORP 计 ( HM-30R,日本 東亜 一 一 一株式会社 ) ; 高浓度有效氯测定仪 ( RC-2Z, 日本笠原理化工业株式会社 ) ; DL-CJ-1DN医用型洁净工作台 , 智能生化培养箱 , 高压灭菌器 , 电热恒温水浴锅 , 微型漩涡混合仪 , 移液枪等 。试验采用的电解水制备装置是由沈阳东宇馨波尔公司

13、生产的电解水发生装置改装成的无隔膜单槽 试 验用电解水生成装置 ( 如图 1 所示 )。 其 主要由以下几部分组成 : 塑料电解槽 ( 长 13 cm、 宽 13 cm、 高 16 cm, 体积 2 704cm3)、 镀铂钛合金电极 ( 板状 , 长 19 cm, 宽 9.6 cm,厚 0.6 mm)、 电源系统以及控制器 。 电压可调范围为 040 V, 极板间距调节范围为 15 90 mm。图 1 试验用电解水生成装置Fig.1 Schematic diagram of preparation device of weakly acidicelectrolyzed water1.2 试验方

14、法1.2.1 微酸性电解水 (slightly acidic electrolyzed water,SAEW) 的制备以氯化钠为电解质 , 用自来水 ( 自来水的硬度为 124mg/L) 配制盐浓度为 0.02 moL/L( 以 Cl-计 )、 盐酸浓度为 0.2 mL/L 的混合溶液 , 采用无隔膜电解槽 , 在 20 V 电压下分别电解 3、 4、 5、 6 min, 得到有效氯浓度分别为20、 30、 40、 50 mg/L 的电解水 , 不同有效氯浓度的电解水分别调 pH 值至 2.5、 4.0、 5.0、 6.0。 制备好的电解水及时使用或者避光密闭贮存 。1.2.2 荞麦芽菜培育采

15、用育苗盘培育荞麦芽菜 , 包括选种 、 浸种 、 播种 、催芽 、 培育 、 采收几个步骤 。1) 浸种电解水的有效氯浓度为 30 mg/L, 采用不同 pH 值( 2.5、 4.0、 5.0、 6.0) 和电解水的 pH 值设定为 5.0, 采用不同有效氯浓度 ACC 为 20、 30、 40 mg/L 的电解水分别浸种 40 h, 浸种温度 22 。 选择适宜 pH 值和 ACC 的微酸性电解水作为荞麦芽菜培育浸种液指标 。2) 发芽荞麦芽菜生产过程亦即种子发芽的过程 , 采用育苗盘 ( 规格 : 60 cm25 cm5 cm) 培育 , 盘内铺 2 层无纺布 , 播种密度为 100 g/

16、盘 , 催芽期间遮阳网遮光 , 生产过程中适当遮光 , 避免强光直射 。 荞麦芽菜 生产过程中喷水方式按照表 1 方法进行 。表 1 荞麦种子发芽过程试验设计Table 1 Experimental design for buckwheat sprouting处理 处理方式处理 1 ACC 为 40 mg/L、 pH 值 5.0 的 SAEW 浸种 ; 发芽过程自来水喷洒处理 2 ACC 为 40 mg/L、 pH 值 5.0 的 SAEW 浸种 ; 发芽过程 ACC30 mg/L 的 SAEW( pH6.0) 和自来水交替喷洒处理 3 ACC 为 40 mg/L、 pH 值 5.0 的 SA

17、EW 浸种 ; 发芽过程 ACC50 mg/L 的 SAEW( pH6.0) 和自来水交替喷洒对照组 自来水浸种 ; 发芽过程自来水喷洒注 : 每 12 h 喷洒 1 次 , SAEW 与自来水交替喷洒 , 喷洒量为 250 mL/盘 ;ACC 为有效氯浓度 , SAEW 为微酸性电解水 。1.2.3 菌落计数采用平板菌落计数法 。 称取各处理组样品 5 g 置于无菌自封袋中 , 加入 50 mL 无菌去离子水 , 自封袋封口 ,于微型漩涡混合仪上振荡并手动揉搓 , 充分洗脱样品表面微生物 。 然后吸取该悬浊液 1 mL 置于盛有 9 mL 无菌生理盐水的试管中 , 进行 10 倍梯度稀释 ,

18、 吸取 0.1 mL稀释液于已凝固的营养琼脂培养 基上 , 涂布均匀 , 静置30 min 后倒置于 37 恒温培养箱培养 24 h 后计数 。 吸取1 mL 稀释液于无菌平板中 , 加入灭菌后晾至 45 左右的孟加拉红培养基 , 摇匀 , 静置至培养基凝固 , 倒置于 28的培养箱培养 48 h 后计数 , 每个处理设 3 个平行 。1.2.4 糖含量测定采用 3,5-二硝基水杨酸比色法 19。1.2.5 芦丁含量测定 20将荞麦芽菜烘干研磨成粉末 , 精密称取样品粉末第 9 期 曹 薇等 : 喷洒微酸性电解水 对 荞麦芽菜 生长的影响 1610.2 g, 置于 50 mL 三角瓶中 , 加

19、 60%乙醇约 40 mL, 在80 恒温水浴锅中浸提 2 h, 期间每隔 15 min 搅拌 1 次 ,趁热过 滤 , 滤于 50 mL 容量瓶中 。 用少量 60%乙醇溶液洗涤残渣与容器 , 洗液并入容量瓶中 , 再加乙醇稀释至50 mL, 摇匀 。 精密量取 1 mL, 置于 10 mL 比色管中 ,分别加入 0.1 mol/L 三氯化铝溶液 1 mL、 1 mol/L 的醋酸钾溶液 1.5 mL, 用 60%乙醇定容至 5 mL, 摇匀 , 放置30 min, 在波长 420 nm 处测定吸光度 , 从标准曲线上查出供试样品溶液中芦丁的含量 。1.3 数据处理利用 Excel 2003

20、 统计分析试验数据 , 计算标准误差并制图 。 应用 SAS 9.1 软件邓肯多重比较对数据进行显著性分析 。2 结果与分析2.1 不同 pH 值的电解水浸种对荞麦种子发芽率的影响采用 pH 值分别为 2.5、 4.0、 5.0、 6.0, 有效氯浓度均为 30 mg/L 的电解水浸种 , 从图 2 可以看出 , 在 0 到96 h 的发芽时间内 , 各处理组发芽率缓慢增加 , 没有明显的发芽率跃变 。 但不同 pH 值的电解水处理的荞麦种子发芽率均明显高于对照组 , pH 值为 5.0 的处理组发芽结束时发芽率最高 , 达 71.3%。种子发芽率低 , 不仅使荞麦芽菜产量降低 , 而且未发芽

21、种子由于自身的生理缺陷易于遭受微生物侵袭 , 导致芽菜生产过程的微生物病害发生 。 因此 , 选择 pH 值 为5.0 的微酸性电解水浸种 , 提高荞麦种子的发芽率 , 为荞麦芽菜创造良好的生产条件 。注 : 有效氯浓度为 30 mg/L。图 2 不同 pH 值的电解水浸种对荞麦种子发芽率的影响Fig.2 Effects of electrolyzed water with different pH values ongermination percentage of buckwheat seeds2.2 不同有效氯浓度 ( ACC) 的微酸性电解水浸种对荞麦种子发芽率的影响荞麦种子浸种采用有

22、效氯浓度 ( ACC) 分别为 20、30 和 40 mg/L, pH 值均为 5.0 的微酸性电解水 , 自来水浸种作对照 , 结果如图 3 所示 。由图 3 可以看出 , 从 0 开始到 24 h, 各组种子发芽率均较低 。 从 24 开始到 72 h, 各处理组种子发芽率上升很快 , 超过 50%, 而对照组发芽率仍然变化比较缓慢 ,发芽率不足 40%。 从 72 开始到 96 h, 各组种子发芽都呈现缓慢甚至停滞增长 , 发芽率基本达到最大值 。 ACC 为20、 30 和 40 mg/L 的微酸性电解水及对照组的发芽率分别为 59%、 60%、 75%和 46%, 各处理组的发芽率均

23、高于对照组 , 由此可知 , 微酸性电解水对荞麦种子萌发 具有促进效果 , 低 ACC 范围内 , ACC 越高种子发芽率越高 。图 3 不同有效氯浓度的微酸性电解水浸种对荞麦种子发芽率的影响Fig.3 Effects of weakly acidic electrolyzed water at differentavailable chlorine concentrations on germination percentage ofbuckwheat seeds2.3 不同 pH 值的电解水浸种对荞麦种子表面微生物的影响采用不同 pH 值的电解水浸种 , 浸种结束 后测定荞麦种子表面细菌和

24、真菌数量 。 由图 4 可以看出 , 不同 pH 值的酸性电解水浸种对荞麦种子表面细菌和真菌均具有杀灭效果 , 浸种后种子表面的细菌和真菌数量明显少于对照组 ( 自来水浸种 ), 分别低于对照组约 0.5 1.0 和 0.661.23 个对数值 。 pH 值 5.0 的微酸性电解水浸种对种子表面细菌和真菌的杀灭效果最好 , 因此可采用 pH 值 5.0 的微酸性电解水浸种以减少种子表面的细菌和真菌数量 。图 4 不同 pH 值的电解水浸种对荞麦种子表面微生物的影响Fig.4 Effects of electrolyzed water treatments at different pHvalu

25、es on microbial counts of buckwheat seed surface2.4 不同 ACC的微酸性电解水浸种对荞麦种子表面微生物的影响采用不同 ACC 的微酸性电解水浸种 , 分别测定浸种结束时种子表面细菌和真菌总数 , 结果如图 5 所示 。 从图 5 可以看出 , 不同 ACC 的微酸性电解水浸种对荞麦种子表面细菌和真菌均具有较好的杀灭效果 。 ACC 为 20、30 和 40 mg/L 的处理组种子表面残留菌落数均少于对照农业工程学报 2012 年162组 , 种子表面细菌分别比对照组低 0.79、 1.54 和 2.08 个对数值 , 真菌分别比对照组低 0.

26、66、 1.58 和 2.12 个对数值 。 比较 3 个处理组可见 , ACC 越高杀菌效果越好 , ACC为 40 mg/L 的微酸性电解水杀菌效果最好 。图 5 不同有效氯浓度的微酸性电解水浸种对荞麦种子表面微生物总数的影响Fig.5 Effects of weakly acidic electrolyzed water at differentavailable chlorine concentrations on microbial counts of buckwheatseed surface2.5 不同处理对荞麦芽苗菜培育过程细菌数量的影响荞麦芽菜培育过程喷洒按照表 1 设计方案

27、进行 , 分别在第 1、 3、 5、 7 天测定芽菜表面细菌总数 , 结果如图6 所示 。图 6 不同处理对荞麦芽菜培育过程中细菌数量的影响Fig.6 Effects of different treatments on bacteria population inprocess of buckwheat sprouts production从第 1 天到第 7 天 , 芽菜表面细菌数缓慢增加 。 第 7天即芽菜采收时对照组和各处理组细菌数分别比第 1 天增加了 2.0、 1.57、 0.9 和 0.33 个对数值 。 这表明 , 用微酸性电解水喷洒的芽菜 , 其表面细菌数量得到了一定程度的控

28、制 , 发芽过程喷洒 ACC50 mg/L 的微酸性电解水效果好于 ACC30 mg/L 的微酸性电解水 , 而仅采用微酸性电解水浸种 , 发芽过程用自来水喷洒处理对芽菜表面细菌的控制效果明显比处理 2 和 3 差 , 但稍好于对照组 。这表明微酸性电解水浸种能减少浸种后种子表面细菌 ,但培育过程不作处理 , 细菌仍然会大量繁殖 。 因此 , 芽菜生产过程中对细菌数量的控制非常重要 。2.6 不同处理对荞麦芽苗菜培育过程真菌数量的影响荞麦芽菜培育过程各处理组芽菜表面真菌数量的变化情况如图 7 所示 。图 7 不同处理对荞麦芽菜培育过程中真菌数量的影响Fig.7 Effects of diffe

29、rent treatments on fungus in productionprocess of buckwheat sprouts由图 7 可以看出 , 真菌数量的变化情况与细菌相似 ,随着时间的增加都缓慢增加 。 比较第 7 天和第 1 天的真菌总数 , 对照组 、 处理 1、 2、 3 分别比第 1 天增加 1.8、1.37、 0.93 和 0.75 个对数值 。 各处理组和对照组比较可以见 , 采用微酸性电解水浸种对芽菜生产过程真菌总数均有不同程度的控制效果 , 而生产过程喷洒微酸性电解水会得到更好的效果 , ACC 越高 , 控制效果越好 。2.7 不同处理对荞麦芽苗菜品质的影响从

30、表 2 可以看出 , 荞麦芽菜培育过程中不同的喷洒处理对芽菜品质的影响不同 。 与对照组相比 , 处理 1 可提高芽菜还原糖含量和芦丁质 量分数 , 对芽菜苗高 、 百株鲜质量和干质量 ( 120C 烘干至恒质量后的质量 ) 无显著影响 ; 处理 2 可显著提高芽菜百株鲜质量 、 还原糖和芦丁质量分数 ( P0.05); 处理 3 可显著提高芽菜还原糖和芦丁质量分数 ( P0.05)。 处理 1、 2、 3 对应于表 1 试验设计的处理方式 。 因此 , 微酸性电解水浸种有助于增加荞麦芽菜还原糖含量和芦丁含量 , 培育过程喷洒微酸性电解水对二者含量的增加效果更显著 。 而培育过程喷洒的有效氯浓

31、度是 30 mg/L还是 50 mg/L的微酸性电解水对品质影响没有显著差别 ( P0.05)。表 2 不同处理对荞麦芽菜品质的影响Table 2 Effects of different treatments on quality of buckwheatsprouts处理组 苗高 /cm 百株鲜质量 /g 干质量 /g还原糖质量分数 /(mgg-1)芦丁质量分数 /(mgg-1)对照组 16.01.4a 25.940.04b 0.230.02a 5.020.005c 35.500.30b处理 1 16.31.7a 25.920.06b 0.230.00a 5.060.006b 39.750

32、.26a处理 2 17.51.6a 27.480.09a 0.220.02a 5.340.002a 42.000.11a处理 3 17.22.2a 25.960.04b 0.230.01a 5.340.001a 42.500.20a注 : 表中干质量是指每 5 g 新鲜芽菜于 120C 烘干至恒质量后的质量 。3 结 论1) 采用 pH 值为 5.0、 有效氯浓度为 40 mg/L 的微酸第 9 期 曹 薇等 : 喷洒微酸性电解水 对 荞麦芽菜 生长的影响 163性电解水浸种 , 有助于提高荞麦种子的发芽率 , 并可以有效降低浸种过程种子表面细菌和真菌数量 。2) 荞麦芽菜培育过程喷洒有效氯浓

33、度为 50 mg/L 的微酸性电解水能有效控制芽菜表面细菌和真菌数量 。3) 与对照相比 , 微酸性电解水浸种有助于增加荞麦芽菜还原糖含量和芦丁含量 , 培育过程喷洒微酸性电解水对这两者含量的增加效果更显著 , 而培育过程喷洒的有效氯浓度为 30 和 50 mg/L 的微酸性电解水对品质影响没有显著差别 。 采用微酸性电解水浸种和喷洒不影响荞麦芽菜苗高 、 百株鲜质量和干质量 。参 考 文 献 1 Holasova M, Fiedlerova V, Smrcinova H, et al. Buckwheat-the source of antioxidant activity in funct

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46、 subacidic electrolyzed water onbuckwheat sprouts growthCao Wei, Zhang Chunling, Li Baoming(Key Laboratory of Structure and Environment in Agricultural Engineering, Ministry of Agriculture,China Agricultural University, Beijing 100083, China)Abstract: According to the problems of seeds and sprouts d

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