1、氨摹酸和乍物资源2009，31(1)：4043Amino AcidsBiotic Resources中国淡水三角涡虫的核型分析高 艳，高媛，张世聪，黄诗笺。(武汉大学生命科学学院，武汉430072)摘要：用空气干燥法对安徽肥东龙泉山、安徽滁卅I琅讶山、云南昆明海源寺龙潭和湖北恩施龙洞河4产地淡水三角涡虫的染色体组进行研究。结果表明：云南昆明海源寺龙潭的涡虫细胞中染色体数目有16条，24条和32条共3种类型，核型公式分别为2x=2n=16=16m，2x=3n=24=24m和2x=4n=32=32m。安徽肥东龙泉山、安徽滁卅I琅砑山和湖北恩施龙洞河的涡虫细胞中染色体数目有16条和24条两种类型，核
2、型公式分别为2x=2n=16=16m和2x=3n=24=24m。染色体组型分析初步鉴定上述4产地淡水三角涡虫均为日本三角涡虫(Dugesiajaponica)。另外本文还对淡水三角涡虫的混倍体现象进行了探讨。关键词：淡水三角涡虫；核型；中国中图分类号：Q953 文献标识码：A 文章编号：10068376(2009)01004004涡虫属扁形动物门，在动物进化史上是最早出现三胚层和两侧对称体制的动物，在动物系统演化中具有重要地位，其核型的多样性和生殖方式的多样性一直是动物遗传和进化领域的研究热点。核型在物种分类上具有重要作用。Kawakastu依据核型的差异将中国、日本等东亚国家的淡水三角涡虫分
3、为日本三角涡虫(Dugesia japonica)和琉球三角涡虫(Dugesia ryukyuensis)2个种。在国内的涡虫分类研究中，仅马金友等旧。对河南淇县鱼泉、浙江杭州龙井、河南济源不老泉、北京樱桃沟4个产地淡水三角涡虫的核型进行了分析，张栩等1对湖北省武汉市珞珈山、江苏太湖东山岛、贵州省遵义市凤凰山3个产地的淡水三角涡虫的核璎进行了分析。本文对我围另4个产地淡水三角涡虫的核型进行了研究，以期为我国三角涡虫的分类学研究进一步提供遗传学证据。1材料和方法11 材料实验所用淡水三角涡虫分别采自安徽肥东龙泉山、安徽滁州琅讶山、云南昆明海源寺龙潭和湖北恩施龙洞河。12 方法121染色体制片参照
4、李光鹏的空气干燥法H J，略有改动。收稿日期：20081110作者简介：高艳，女(1987一)本科生，Email：gaoyan27126COllrl基会项目：国家基础科学人才培养基金资助项目J0630648t通讯作者122显微观察与核型分析在40 X光学显微镜下观察染色体装片，选取染色体分散良好的细胞，统计细胞中染色体的数目，每个产地统计至少200个细胞。在所观察的细胞中，选出5个着丝粒清楚，分散好，背景清晰，染色体比较平直的细胞在数码显微镜100油镜下拍照、然后用Motic Images Advanced 32测量照片中每条染色体的全长、长臂长度和短臂长度，算出每条染色体的相对长度，臂比和着
5、丝点指数，根据上述测量结果进行染色体分组和编号，并使用Excel做核型分析。2结果21 细胞染色体数目统计4产地淡水三角涡虫细胞染色体数目统计见表1。结果显示：所研究的4产地淡水三角涡虫均为混倍体，染色体基数为8，存在2n=2x、2n=3x和2n=4x共3种倍性的细胞。22核型分析221安徽肥东龙泉山淡水三角涡虫核型分析安徽肥东龙泉山淡水三角涡虫细胞染色体的中期分裂相及核型图见图l和图2，核型参数统计见表2。222安徽滁州琅讶山淡水三角涡虫核型分析安徽滁州琅讶山淡水三角涡虫细胞染色体的中期分裂相及核型图见图3和图4，核型参数统计见表3。万方数据高艳等： 中国淡水三角涡虫的核型分析 41l又l鼍
6、6又lI l置I4鼍l8图1 安徽肥东龙泉山淡水三角涡虫染色体的中期分裂相及核型图(二倍体)h t ilt2ll6l l又1l鼍7l置l4II I8图2安徽肥东龙泉山淡水三角涡虫染色体的中期分裂相及核型图(三倍体)图3安徽滁州琅砑山淡水三角涡虫染色体的中期分裂相及核型图(二倍体)I l，一I11l_ I f：Xtt6；譬lIIl l，l it4lII8图4安徽滁州琅砑山淡水三角涡虫染色体的中期分裂相及核型图【三倍体)表2安徽肥东龙泉山淡水三角涡虫核型参数 表3 安徽滁州琅砑山淡水三角涡虫核型参数；。oz；I，l：，I：0I：l，In。R，又。lZI；l。l，Il万方数据42 氨基酸和生物资源2
7、23云南昆明海源寺龙潭淡水三角涡虫核型分析云南昆明海源寺龙潭淡水三角涡虫细胞染色体的中期分裂相及核型图见图5、图6和图7，核型参数统计见表4。_箩-天X 鼻又2 3 4 6 7，一8图5 云南昆明海源寺龙潭淡水三角涡虫染色体的中期分裂相及核型图(二倍体)图6云南昆明海源寺龙潭淡水三角涡虫染色体的中期分裂相及核型图(三倍体)X X斗XlX l。鬈I，t誓7塞XY2戈太乒jIlI夭IIl墨墨矗l薯誓8图7云南昆明海源寺龙潭淡水三角涡虫染色体的中期分裂相及核型图(四倍体)表4 云南昆明海源寺龙潭淡水三角涡虫染色体组型参数224湖北恩施龙洞河淡水三角涡虫核型分析湖北恩施龙洞河淡水三角涡虫细胞染色体的中
8、期分裂相及核型图见图8和图9，核型参数统计见表5。图8 湖北恩施龙洞河淡水三角涡虫染色体的中期分裂相及核型图二倍体)摹罩I al X：l l孳x xIx，Y x t I蔓_ l I曼一) o O图9湖北恩施龙洞河淡水三角涡虫染色体的中期分裂相及核型图(三倍体)X，；I1IooIl，I，II：I6-II-II，II万方数据高艳等： 中国淡水二角涡虫的核型分析 43表5湖北恩施龙洞河淡水三角涡虫染色体组型参数3 结果本研究中安徽肥东龙泉山、安徽滁州琅讶山及湖北恩施龙洞河的淡水三角涡虫均为二倍体细胞和三倍体细胞的混合倍体，核型公式为2n=2x=16=16m、2n=3x=24=24m。云南昆明海源寺龙
9、潭淡水三角涡虫为二倍体、三倍体和四倍体细胞的混合倍体，核型公式为2n=2x=16=16m、2n=3x=24=24ITI、2n=4x=32=32m。据Tamura“1报道，日本三角涡虫(Dugesia jnponica)的染色体基数为8，核型公式为2n=2x=16=16m、2n=3x=24=24m，存在二倍体、三倍体和混合倍体。琉球三角涡虫(Dugesia ryukyuensis)的染色体基数为7，核型公式为2n=2x=14=12m+2sm、2n=3x=21=18m+3sm，同样存在二倍体、三倍体和混合倍体。马金友等旧1在研究河南济源不老泉的日本三角涡虫时曾发现一些四倍体个体(2n=4x=32=
10、32m)。本研究结果显示上述4产地淡水三角涡虫的染色体基数均为8，核型均属于2n=2x=16=16m、2n=3x=24=24m、2n=4x=32=32m这3种情况中的数种，和13本三角涡虫核型相同，而明显有别于琉球三角涡虫。故得出结论：上述4产地淡水三角涡虫可能为一个种，属于日本三角涡虫。4讨论混倍体现象在淡水三角涡虫中较为常见。Tamura怕1对远东地区的日本三角涡虫和琉球三角涡虫进行核型分析时均发现混倍体现象。马金友心1和张栩日1在研究国内不同产地的日本三角涡虫时也发现混倍体。本研究中除湖北恩施龙洞河的涡虫外其余3产地的淡水三角涡虫均为较明显的混倍体。马金友1在研究河南省修武县云台山、济源
11、市上架的三角涡虫时发现随着从无性生殖到有性生殖的转换，涡虫染色体经历了完全的三倍体一二倍体和三倍体的混合型一二倍体的转变。Knakievicz等7 3认为涡虫的生殖方式可能受到种群密度，水盐度，饲喂食物种类等多种因素的影响。因此本研究中出现的大量的混倍体可能和其生殖方式的转换有关，但还有待野外观察和进一步的形态学及细胞学分析。参考文献1Kawakatsu M，Oki I，Tamura STaxonomy and geograph-ical distribution of Dugesia japonica and Dugesiaryukyuensis in the Far EastJHydrob
12、iologia，1995，305：55612 马金友，吕九全，陈广文等中国淡水三角涡虫(Dugesia sp)的染色体研究(I)J遗传学报，2003，30(11)：1 0451 0503 张栩，黄诗笺中国淡水三角涡虫染色体组型的研究J水生生物学报，2007，31(3)：1031064李光鹏淡水涡虫染色体的制备方法J动物学杂志1992。27(5)：30315Tamura S，Oki I，Kawakatsu MA review of chromosomalvariation in Dugesia japonica and Dryukyuensis in theFar EastJHydrobiolo
13、gia，1995，30：79846 马金友，陈广文，刘德增中国淡水涡虫染色体和生殖的关系J动物学杂志，2004，39(5)：25297 Reproductive modes and life cycles of freshwater planarians(Platyhelminthes，Tricladida，Paludicula)fromsouthern BrazilJInvertebrate Biology，2006，125(3)：212221Karyotype Analysis of the Freshwater Planarians(Dugesia sp)from ChinaGAO Ya
14、n，GAO Yuan，ZHANG ShiCong，HUANG ShiJian(College of Life Science，Wuhan University，Wuhan 430072，China)(下转第63页)万方数据吴敏等：假单胞菌酶法转化DI一ATC合成L一半胱氨酸 63Progress on Enzymatic Synthesis of L-Cysteine fromDLATC by Pseudomonas spWU Minl，CHEN weiqin92，WANG Puh，HE Junya01(1 Institute of Biopharmaceutical Engineering，
15、Zhejiang University of Technology，Hangzhou 310032，2 School of BiologicalOki I;Tamura S Taxonomy and geographical distribution of Dugesia japonica and Dugesiaryukyuensis in the Far East外文期刊 19952.马金友;吕九全;陈广文 中国淡水三角涡虫(Dugesia sp.)的染色体研究()期刊论文-遗传学报 2003(11)3.张栩;黄诗笺 中国淡水三角涡虫染色体组型的研究期刊论文-水生生物学报 2007(03)4
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17、southern Brazil外文期刊 2006(03)本文读者也读过(10条)1. 陈广文.王英丽.王惠珂.付瑞敏.张建锋.刘德增.CHEN Guang-Wen.WANG Ying-Li.WANG Hui-Ke.FU Rui-Min.ZHANG Jian-Feng.LIU De-Zeng 中国五台山多目涡虫(涡虫纲,三肠目)染色体及核型分析期刊论文-动物分类学报2008,33(3)2. 王松.鲍方印.戚永跃.徐景霞.WANG Song.BAO Fang-yin.QI Yong-yue.XU Jing-xia 鹞落坪自然保护区商城肥鲵的资源分布及生境选择期刊论文-氨基酸和生物资源2009,31
18、(1)3. 马金友.吕九全.陈广文.徐存拴.刘德增 中国淡水三角涡虫(Dugesia sp)的染色体研究()期刊论文-遗传学报2003,30(11)4. 陈广文.马克世.刘德增 中国淡水三角涡虫的染色体研究会议论文-5. 马克世.李淑梅.陈广文 河南省铜山湖淡水三角涡虫核型研究期刊论文-安徽农业科学2009,37(34)6. 刘长海.白重炎.陈宗礼.廉振民.高晓燕.黄焕焕.LIU Chang-hai.BAI Chong-yan.CHEN Zong-li.LIAN Zhen-min.GAO Xiao-yan.HUANG Huan-huan 陕北淡水涡虫组织形态学初步观察期刊论文-四川动物2007
19、,26(4)7. 高沛业.谢焕松.周鸣鸣 卷丹水提物的急性毒性和遗传毒性研究期刊论文-安徽农业科学2011,39(12)8. 张栩.黄诗笺.ZHANG Xu.HUANG Shi-Jian 中国淡水三角涡虫染色体组型的研究期刊论文-水生生物学报2007,31(3)9. 汪之波.陈有华.李晓鸿.李甲蝉.王辉.张宗舟.WANG Zhi-bo.CHEN You-hua.LI Xiao-hong.LI Jia-chan.WANGHui.ZHANG Zong-zhou 白水江自然保护区藻类名录初报期刊论文-氨基酸和生物资源2009,31(1)10. 刘昌利.郭伶俐.田华祥.马永富.LIU Chang-li
20、.GUO Lin-li.TIAN Hua-xiang.MA Yong-fu 涡虫用于地表水水质监测的研究期刊论文-皖西学院学报2008,24(2)引证文献(4条)1.胡晓凤.王晓安 山东昆嵛山细形山地涡虫染色体组型的研究期刊论文-四川动物 2011(5)2.陈广文.董自梅.武丽敏.田士瑞.刘德增 河南两产地日本三角涡虫的染色体和核型多样性分析期刊论文-河南师范大学学报（自然科学版） 2011(1)3.陈广文.田士瑞.刘涛.刘德增 中国云南三产地淡水三角涡虫核型分析期刊论文-水生生物学报 2011(2)4.陈广文.董自梅.田士瑞.王清华.刘涛.刘德增 河北3产地日本三角涡虫的染色体变异与核型多样性分析期刊论文-动物学杂志 2010(6)引用本文格式：高艳.高媛.张世聪.黄诗笺.GAO Yan.GAO Yuan.ZHANG Shi-Cong.HUANG Shi-Jian 中国淡水三角涡虫的核型分析期刊论文-氨基酸和生物资源 2009(1)
