1、第6章 黄酮类化合物,-黄酮类的鉴定,鉴 定,一、薄层色谱法（TLC） 二、 纸色谱法（PC),一、 薄层色谱法一般采用吸附薄层，吸附剂大多用硅胶和聚酰胺。 （1）硅胶薄层色谱: 用于分离与鉴定弱极性黄酮类化合物分离苷元常用展开剂：甲苯-甲酸甲酯-甲酸；氯仿-甲醇等。（2）聚酰胺薄层色谱：分离含游离酚羟基的黄酮苷与苷元。展开剂：具有较强的极性，大多含有醇、酸或水如：乙醇水（3：2），水乙醇甲酸乙酰丙酮(5:1.5:1:0.5),聚酰胺薄层 (乙醇水）,二、纸色谱法（PC)PC适于分离各种天然黄酮类化合物及其苷类的混合物。 黄酮苷：一般采用双向展开,7,黄酮类化合物的检识和结构鉴定,第一相展开采
2、用醇性展开剂 如: BAW n-BuOH: HOAc:H2O=4:1:5上层TBA t-BuOH: HOAc: H2O=3:1:1水饱和n-BuOH 层析行为: Rf值: 苷元单糖苷双糖苷 一般:苷元在0.70以上，而苷则小于0.7。,第二相展开采用水性展开剂如：26% HOAc水溶液3% NaCl 水溶液HOAc:浓HCl:H2O= 30: 3 : 10 层析行为: 连接糖链越长, Rf 越大(0.5);苷元Rf较小，有的留在原点。,纸色谱,第I向 醇性展开剂 第II向 水性展开剂 （BAW、TBA、水饱和正丁醇） （28%HAc、3%NaCl、1%HCl）正相色谱 反相色谱 固定相（水）极
3、性 流动相 （ 有认为是吸附原理）,Rf规律：极性小的化合物Rf大 极性大的化合物Rf大 苷元单糖苷双糖苷 Rf规律与左边相反 母核相同，二-OH三-OH四-OH五-OH黄酮,主要应用：苷元的分离鉴别 黄酮苷及花色素类的分离鉴别,双相色谱,9,纸层析（PC）：采用双向纸层析。 苷元: 平面型分子: 黄酮(醇)、查耳酮的Rf小, 几乎留在 原点不动(Rf 0.02); 非平面型分子: 二氢黄酮(醇)、二氢查耳酮的Rf大, 因亲水性较强(Rf 0.10-0.30)。 层析检查方法： 观察荧光,用紫外光灯照射看到有色斑点，NH3处理 产生明显的色变。 用2%AlCl3甲醇液喷雾,UV灯下呈亮黄色荧光斑点。,习题,有下列四种黄酮类化合物 A、R1R2H B、R1H, R2Rha C、R1Glc, R2H D、R1Glc, R2Rha,比较其酸性及极性的大小:酸性( )( )( )( ) 极性( )( )( )( ) 比较这四种化合物在如下三种色谱中Rf值大小顺序: (1)硅胶TLC(条件CHCl3MeOH 4:1展开), Rf值( )( )( )( ) (2)聚酰胺TLC(条件60%甲醇水展开), Rf值( )( )( )( ) (3)纸色谱(条件8%醋酸水展开), Rf值( )( )( )( ),
