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实验四 探究影响酶活性的因素.doc

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1、实验四 探究影响酶活性的因素一实验目的:1探究不同温度和 PH 对过氧化氢酶活性的影响。2培养实验设计能力。二方法步骤:提出问题作出假设设计实验(包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格)实施实验分析与结论表达与交流。实例 1:比较过氧化氢酶和 Fe3+的催化效率一)实验原理:鲜肝提取液中含有过氧化氢酶,过氧化氢酶和 Fe3+都能催化 H2O2 分解放出 O2。经计算,质量分数为 3.5%的 FeCl3 溶液和质量分数为 20%的肝脏研磨液相比,每滴 FeCl3 溶液中的Fe3+数,大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的 25 万倍二)方法步骤:步骤 注意问题 解释取

2、4 支洁净试管,编号,分别加入 2mL H2O2 溶液不让 H2O2接触皮肤H2O2 有一定的腐蚀性将 2 号试管放在 900C 左右的水浴中加热,观察气泡冒出情况,与 1 号对照向 3 号、4 号试管内分别滴入 2 滴 FeCl3 溶液和 2 滴肝脏研磨液,观察气泡产生情况不可用同一支滴管肝脏研磨液必须是新鲜的肝脏在制成研磨液由于酶具有高效性,若滴入的 FeCl3 溶液中混有少量的过氧化氢酶,会影响实验准确性因为过氧化氢酶是蛋白质,放置过久,可受细菌作用而分解,使肝脏组织中酶分子数减少,活性降低研磨可破坏肝细胞结构,使细胞内的酶释放出来,增加酶与底物的接触面积2-3min 后,将点燃的卫生香

3、分别放入 3 号和 4 号试管内液面的上方,观察复燃情况放卫生香时,动作要快,不要插到气泡中现象:3 号试管产生气泡多,冒泡时间短,卫生香猛烈复燃,4 号试管产生气泡少,冒泡时间长,卫生香几乎无变化避免卫生香因潮湿而熄灭实例 2:温度对酶活性的影响一)实验目的:1初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。2探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。二)实验原理:1淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖(淀粉水解过程中,不同阶段的中间产物遇碘后,会呈现红褐色或红棕色。)麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注:市售 a-淀粉酶的最适温度约 600C三)方法步骤:操作 注意问

4、题 解释取 3 支试管,编上号,然后分别注入 2mL 可溶性淀粉溶液另取 3 支试管,编上号,然后分别注入 1mL 新鲜淀粉酶溶液将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成 3 组,分别放入热水(约 600C)、沸水和冰块中,维持各自的温度 5min不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液防止混合时,由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化,反应温度不是操作者所要控制的温度,影响实验结果。分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后,保持各自温度时间不能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间维持各自的温度 5min在 3 支试管中各滴入 1-2 滴碘液,摇匀后观察这 3 支试管中溶液颜色变化并记录碘液

5、不能滴加太多 防止影响实验现象的观察用表格的形式显示实验步骤试管序号 加入试剂或处理方法A B C a b c可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL / / /1新鲜淀粉酶溶液 / / / 1mL 1mL 1mL2 保温 5min 600C 1000C 00C 600C 1000C 00C3 将 a 液加入到 A 试管,b 液加入到 B 试管,c 液加入到 C 试管中,摇匀4 保温 5min 600C 1000C 00C 5 滴入碘液,摇匀 2 滴 2 滴 2 滴 6 观察现象并记录 实例 3:PH 值对酶活性的影响操作步骤:用表格开式显示实验步骤:(注意操作顺序不能错)试管序号 加入试剂或处理方法1 2 31 注入新鲜的淀粉酶溶液 1mL 1mL 1mL2 注入蒸馏水 1mL / /3 注入氢氧化钠溶液 / 1mL /4 注入盐酸 / / 1mL5 注入可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL6 600C 水浴保温 5min 7 加入斐林试剂,边加边振荡 2mL 2mL 2mL8 水浴加热煮沸 1min 9 观察 3 支试管中溶液颜色变化变记录

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