1、【目的】 了解药物在体内的分布动力学规律【原理】已知磺胺嘧啶等磺胺类药物在酸性环境下其苯环上的氨基(NH2)将被离子化而生成铵类化合物(NH3+).后者与亚硝酸钠反应可发生重氮化反应进而生成重氮盐(NN+).该化合物在碱性条件下可与麝香草酚生成橙黄色化合物.在525nm 波长下比色,其光密度与磺胺嘧啶的浓度成正比.具体反应过程为:根据上述原理,在给受试家兔一次静脉注射一定剂量的磺胺嘧啶后,于不同时间点采集其静脉血样,采用比色法对各样品中磺胺嘧啶的血药浓度进行定量分析,并以血药浓度对相应时间作图,从而获得磺胺嘧啶的静脉给药后的药时曲.【动物】 25g 以上小鼠2只【药品】 20磺胺嘧啶(sulf
2、adiazine,SD)、0.05%SD、7.5和15三氯醋酸、0.5亚硝酸钠、0.5麝香草酚(用20NaOH 配制)、1000u/mL 肝素生理盐水.【器材】 721分光光度计、 离心机、精密扭力天平、手术器械、组织研磨器、1mL 小鼠灌胃器、5mL 离心管、试管、移液器(0.011.0mL)、吸头、滤纸、硫酸纸、玻璃记号笔、计算机.【方法与步骤】参见图11标准管制备:精确吸0.05%SD 0.1mL 加入含7.5三氯醋酸1.4mL 的试管中,摇匀,加入0.5亚硝酸钠0.5mL,摇匀后,再加入0.5麝香草酚1.0mL.2取小鼠3只,禁食12小时不禁水,其中2只用20SD 灌胃0.1 mL /
3、10g,另1只用生理盐水灌胃0.1 mL /10g 作为对照.3给药小鼠分别于给药后30、60分钟各取1只断头取血(离心管内预先加入1000u/mL 肝素0.1mL 抗凝),取血后立即摇匀.对照小鼠在实验开始时同法取血.4取试管3只编号,分别于1号管(对照)、2号管(给药30分)和3号管(给药60分)内加7.5三氯醋酸各2.8mL,再加入抗凝血各0.2mL 用振荡器充分混匀.5取试管9支编号.预先称重硫酸纸.迅速剖取上述小鼠的肝、肾、脑并用滤纸沾去上面的血液.称取小鼠全脑,全肾及300-400mg 肝组织,分别置于组织研磨器中,加入生理盐水(0.5mL/100mg 组织),研碎后再加入15三氯
4、醋酸(0.5mL/100mg 组织)摇匀,制成匀浆后全部倾入试管中.6将对照鼠和各给药鼠的血及组织匀浆离心 10 分(1500 转/分),分别取上清液 1.5mL 放入另一相应试管中,加入 0.5亚硝酸钠各 0.5mL,充分摇匀后再加入 0.5麝香草酚 1.0mL,摇匀后为橙黄色.(详细步骤见图 1)7用分光光度计在 525nm 波长下以对照鼠样品管作空白管,分别测定各用药样品管的光密度值,代入到以下公式换算出血药浓度(g/mL)和组织药物浓度(g/g).样品管浓度(g/ mL)=(样品管光密度(OD)标准管浓度 )/ 标准管光密度(OD)血药浓度(g/ mL) = 样品管浓度稀释倍数(30)组织内浓度(g/g) = 样品管浓度稀释倍数(20)【结果与处理】用计算机绘制给药后不同组织中的药物分布图. 磺胺在体内的分布是：血液脑肝肾【注意事项】血液加到三氯醋酸试管内立即振摇,否则易出现凝血块.组织需先加生理盐水,研碎后再加三氯醋酸并立即摇匀,再稍加研磨即成匀浆
