1、贵州大学植物生理学综合性实验报告题目：逆境对玉米生长的影响（丙二醛的测定）学院：生命科学学院专业：生物科学类班级：生物 102学号：1007040161姓名：袁晓玲指导老师：罗睿2012-6-21题目：逆境对玉米生长的影响（丙二醛的测定）1、前期处理：在苗期对玉米进行处理，一共有四盆玉米苗，标号为 A、B、C 和 D。其中 A 为对照组，不做任何处理，只是每天浇 25mL 自来水；B 盆：向其中喷洒草酸溶液； C 盆：向其中喷洒氢氧化钾溶液；D 盆：向其中喷洒氯化钠溶液； B、C 和 D 盆中喷洒的溶液浓度均为 0.1mol/L，并且每天喷洒 25mL。这样处理四天后，测量各个盆里玉米叶片的丙
2、二醛的含量。二、丙二醛含量的测定1、实验目的熟悉测定丙二醛（MDA）含量的常用的方法。2、实验原理植物器官在逆境条件下或衰老时，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛（MDA）是其产物之一，通常将其作为脂质过氧化指标，用于表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。在酸碱和盐环境条件下，丙二醛可与巴比妥酸（TBA）反应生成红棕色的 3，5,5三甲基噁唑2,4二酮，在 532nm 处有最大吸收波长。但该反应会受到可溶性糖的极大干扰，糖与 TBA 的反应产物在 532nm 处也有吸收，但其最大的吸收波长在 450 处。采用双组分分光光度计法可分别求出 MDA 和可溶性糖的含量。该法针对混合液中的两个
3、组分，它们的光谱吸收峰虽有明显的差异，但吸收曲线彼此又有些重叠，可根据LambertBeer 定律，通过代数方法，计算出一种组分由于另一种组分存在时对 OD 值的影响，最后分别得到两种组分的含量。 3、器材与试剂 （1）实验仪器：分光光度计、研磨器、恒温水浴、试管、量筒、烧杯。 （2）实验试剂：三氯乙酸、石英砂、硫代巴比妥酸（TBA）溶液（用 10%TCA 配制 0.6%的 TBA 溶液） 。 （3）实验材料：盆栽玉米。 4、实验步骤（1）MDA 的提取 ：取各个盆中玉米的叶片 1g 将其剪碎，加入 10%三氯乙酸（TCA）2mL 和少量石英砂，研磨；进一步加入 8mLTCA 充分研磨，将匀浆
4、液倒入试管中，静置20 分钟，然后提取上清液，上清液即为样品提取液。（2）显色反应及测定：吸取 2mL 提取液，加入 2mL0.6%TBA 液，混匀，置于沸水浴中沸煮 15min，迅速冷却，静置。取上清液测定 532nm 和 450nm 处的 OD 值。对照管以 2mL水代替提取液。（3）计算：根据 LambertBeer 定律， （以蔗糖为例）得C1=0.01171A450C2=6.4510-6 A5320.5610-6A450 式中 C1 为蔗糖与 TBA 反应产物的浓度，单位是 mol/L；C 2 为 MDA 与 TBA 反应产物的浓度，单位是 mol/L。5、实验结果各个组所在不同波长
5、下测得的 OD 值：根据各个组在不同波长下测得的 OD 值分别算出蔗糖和 MDA 分别于 TBA 反应产物的浓度 C1 和 C2：3、结果分析（1）处理期玉米的变化：刚喷洒各种试剂时，玉米苗并没有立即死亡，两天以后才开始有根腐烂的情况出现，并且在此期间，玉米苗很纤细，叶片逐渐变黄，萎蔫。原因：植物在受到逆境胁迫表现出受到损伤的现象之前，植物会对逆境胁迫做出适应性的调节反应，在喷洒的浓度不是很大，量不是很多的情况下，并不会马上表现出受损现象，然而随着喷洒的时间增多，最终还是会经受不住而出现了受损的现象，根逐渐开始腐烂，叶片变黄，开始萎蔫。此外，叶片变黄可能还有另外一个原因，那就是由于“营养不良”
6、。因为在此期间没有为其额外的添加矿物质营养，而使得土壤中的矿质营养元素缺乏而导致，例如缺乏磷，氮等元素。（2）通过测定玉米叶片中丙二醛的含量，由上述实验结果得知：蔗糖与 TBA 反应产物的浓度（C 1）：CDBAMDA 与 TBA 反应产物的浓度（C 2）：CD A B植物在经受逆境胁迫时，可溶性糖会增加，这是由于逆境可以诱导蛋白质转变成可溶性物，可以促使合成酶的作用下降，解酶的作用增强。检测结果表明喷洒氢氧化钾溶液对玉米的伤害最大，而氯化钠溶液次之，草酸溶液最小。而在 MDA 与 TBA 反应产物的浓度中对照组却大于 B 组，其原因可能是对照组喷洒的是自来水，其含有一定的消毒剂。喷洒氢氧化钾
7、溶液对玉米生长的影响：玉米对 PH 的适应范围为 58，最适应的 PH 值为 6.57 中性土壤，喷洒氢氧化钾碱性溶液使得土壤中的 PH 值增大，从而影响玉米的生长，土壤呈碱性，最终导致玉米的根部坏死腐烂死亡，由于氢氧化钾溶液使强碱，所以对玉米的生长影响也就最大。编号 C1（mol/L ） C2（mol/L）A（对照组） 3.4210-3 1.44310-6B（加入草酸） 4.2510-3 1.38310-6C（加入氢氧化钾） 5.6710-3 2.52210-6D（加入氯化钠） 5.4110-3 2.41210-6编号 OD 值（532nm） OD 值（ 450）A（对照组） 0.249 0
8、.292B（加入草酸） 0.246 0.363C（加入氢氧化钾） 0.433 0.484D（加入氯化钠） 0.414 0.462喷洒氯化钠溶液对玉米生长的影响：盐胁迫会对植物造成如吸水困难、生物膜破坏及生理破坏絮乱等各种伤害，在 0. 1mo l/L 氯化钠溶液胁迫下前两天与对照相比没有太大变化,根系较对照长但细弱, 第三天开始，叶片逐渐发黄, 生长开始受到抑制。喷洒草酸溶液对玉米生长的影响：土壤中含有大量铝的氢氧化物，土壤酸化后，可加速土壤中含铝的原生和次生矿物风化而释放大量铝离子，形成植物可吸收的形态铝化合物。植物长期和过量的吸收铝，会中毒，甚至死亡。过量消毒剂对植物生长的影响：因为消毒剂常常具有强氧化性，减少了土壤中的有机成分，使土壤偏碱或过酸，过量的消毒剂会对植物造成伤害甚至死亡。
