1、1第二章 蛋白质【知识精讲】一、蛋白质的基本结构单位氨基酸及其分类从各种生物体中发现的氨基酸已有 180 种。基本氨基酸：指 20 种直接参与蛋白质组成的氨基酸；非蛋白质氨基酸：180 多种天然氨基酸大多数是不参与蛋白质组成的，这些氨基酸被称为非蛋白质氨基酸。1、通式：从蛋白质水解物中分离出来的常见氨基酸有 20 种，除脯氨酸外，这些氨基酸在结构上的共同点是：与羧基相邻的 -碳原子上都有一个氨基，因而称为 - 氨基酸 。- 氨基酸除甘氨酸外，其 -碳原子都为一个不对称碳原子，因此都具有旋光性，且生物体内的 -氨基酸均为 L-构型。2、氨基酸的分类（1）按基本氨基酸 R 基的化学结构分类脂肪族氨
2、基酸及其三字符A含一氨基一羧基的中性氨基酸B含羟基氨基酸C含硫氨基酸D 含酰胺基氨基酸E含一氨基、二羧基的酸性氨基酸F含二氨基、一羧基的碱性氨基酸芳香族氨基酸及其三字符杂环族氨基酸及其三字符（2）按基本氨基酸 R 基的极性分类： （3）非蛋白质氨基酸：这些氨基酸一般不参与蛋白质的组成，但有一些是重要的代谢物前体或中间产物。如 -丙氨酸是辅酶 A（HS-CoA）的组成部分之一、-氨基丁酸是抑制性神经递质、L-瓜氨酸和 L-鸟氨酸参与尿素循环、D-丙氨酸和 D-谷氨酸参与细菌细胞壁中肽聚糖的组成等。3、氨基酸的理化性质：（1）氨基酸的晶体为离子晶格过去长期认为氨基酸在晶体或其水溶液中是以不解离的中
3、性分子存在的。后来发现氨基酸晶体的熔点很高，一般在 200 摄氏度以上，此外还发现氨基酸能使水的介电常数增高，而一般的有机化合物如酒精、丙酮使水的介电常数降低。如果氨基酸在晶体或其水溶液中主要是以兼性离子状态（即氨基酸分子内部有些基团带正电荷，有些基团带相等的负电荷，结果整个分子的净电何为零）存在，上述两个现象就易解释了。氨基酸晶体是以离子晶格组成的，像氯化钠晶体一样，维持晶格中质点的作用力是异性电荷间的吸引，而不象分子晶格那样以范德华力来维系，这种静电引力要比范德华力强得多。图：氨基酸通式生化P14图 2：生化P14非极性氨基酸不带电荷的氨基酸带正电荷的氨基酸 生化P15 图 3带负电荷的氨
4、基酸2（2）氨基酸在水溶液中的两性解离氨基酸完全质子化时，可以看成为多元酸：侧链不解离的中性氨基酸可看为二元酸；侧链解离的酸性氨基酸和碱性氨基酸可看为三元酸。等电点（pI）：指水溶液中，氨基酸分子净电荷为 0 时的溶液 pH 值。在等电点时，氨基酸分子基本处于兼性离子状态，少数解离为阳离子和阴离子，但解离成阳离子和阴离子的数目和趋势相等。此时，氨基酸分子在电场既不向正极移动，也不向负极移动。 等电点的计算对侧链不解离的中性氨基酸，其等电点是它的 pK， 1（表观解离常数）和 pK， 2 的算术平均值。对侧链解离的酸性或碱性氨基酸，其等电点是其兼性离子两边的 pK， 值的算术平均值。等电点对氨基
5、酸分子电荷数的影响pHpI 氨基酸带净负电荷；pH=pI 氨基酸净电荷为 0；pHKm 时，v=Vmax。例 2、绝大多数酶溶解在纯水中会失活，为什么？解析：酶溶液在蒸馏水中失活的原因是：（1）不能为酶催化反应提供最适 pH 环境，特别是当反应过程中，pH 发生变化时，不能起缓冲作用；（2）在蒸馏水中蛋白质容易变性；（3）酶在纯水中缺乏必须的离子，且对温度变化敏感，所以对酶来说，在蒸馏水中容易失活。例 3、多数酶的稀溶液在激烈震荡时会产生泡沫，此时即使酶分子并没有变化，也会导致酶活性降低或丧失，请说明这是为什么？解析：这是由于较稀的蛋白质溶液经激烈震荡会产生泡沫，增加水的表面张力，导致酶蛋白空
6、间结构破坏而失活。例 4、某酶在溶液中会丧失活性，但若此溶液中同时存在巯基乙醇可以避免失活，该酶应该是一种什么酶，为什么？解析：这种酶活性部位含有SH，容易与其它巯基发生氧化反应生成二硫键，加入巯基乙醇可以保护巯基，防止酶失活。例 5、根据以下各酶发挥作用的部位，指出它们大致的最适 pH 值（1）唾液淀粉酶 （2）胃蛋白酶 （3）胰脂肪酶 （4）胆碱酯酶解析：（1）中性 pH 值（在缺少氯离子时，pH 值可能会略微低一些）（2）pH 1-2（胃液的 pH 值）（3）pH 6-8，依赖于胆盐的浓度，胆盐为弱酸性的。（4）pH 9-10，因为胆碱酯酶催化乙酰胆碱分解，产物中的胆碱是强碱性的物质。例
7、 6、新掰下的玉米的甜味是由于玉米粒中的糖浓度高。但是掰下的玉米贮存几天后就不那么甜了，为什么？如果将新鲜玉米去掉外皮后浸入沸水几分钟，然后于冷水中冷却，储藏在冰箱中可保持其甜味，为什么？解析：新掰下的玉米贮存几天后就不那么甜了，其原因是玉米中的糖有 50%转化为淀粉了。玉米中催化糖转化为淀粉的酶在高温下变性，从而丧失了生物活性所致。18例 7、给鸽子喂一种实验饲料，发现鸽子无法维持平衡及协调，而且它们的血液和脑中丙酮酸的含量比正常鸽子高出许多倍，若给鸽子喂肉汁，此症状可以得以改善。问喂的实验饲料中缺乏何种维生素？解析：实验饲料中缺乏硫胺素（维生素 B1） 。因为焦磷酸硫胺素（TPP）是脱羧酶
8、的辅酶，为丙酮酸脱氢酶系中必须的成分（丙酮酸脱氢酶的辅酶） ，因此，缺乏硫胺素时丙酮酸会由于不能正常分解而积累。肉汁中含硫胺素。例 8、为什么维生素 A 和 D 可好几个星期吃一次，而维生素 B 必须经常补充？解析：维生素 A 和 D 是脂溶性的，可在人体中贮存，而维生素 B 是水溶性，在人体中不能贮存。例 9、新鲜鸡蛋能在冰箱中保持数周，如除去蛋清只留蛋黄，能在冰箱中保持数周不坏吗？为什么？解析：不能。这是因为蛋清中含有抗生物素因子和溶菌酶，可阻止细菌生长。例 10、含氮类激素作用的剂量是非常小的，为什么能产生非常大的生理作用？含氮类激素作用于靶细胞的剂量是非常小的，但是一旦与靶细胞上相应的
9、受体结合就会导致多个腺苷环化酶活化生成多个环化腺苷酸（cAMP） ；每个 cAMP 可激活多个蛋白激酶，每个蛋白激酶又可激活多个底物，这样下去就可导致非常明显的生理效应发生，这种逐级放大的作用称为级联放大作用。肾上腺素和胰高血糖素以及其它以 cAMP 为第二信使的激素都通过这种方式发挥作用。此外，促肾上腺皮质激素等以钙离子作用为第二信使，通过磷酸肌醇级联放大作用，在细胞膜内引起一系列的反应。例 11、为什么饮用浓咖啡有提神的作用？咖啡中含有咖啡碱，是环化腺苷酸（cAMP）磷酸二酯酶的抑制剂，即咖啡碱可阻止CAMP 的分解，而且具有十分强烈的作用。环化腺苷酸磷酸二酯酶在体内的作用是：当以cAMP
10、 作为第二信使的激素作用停止时分解 cAMP。如果该酶的活性被抑制，cAMP 不能被及时除去而继续起作用，从而增强激素的作用使神经兴奋。例 12、船员长期在海上航行，常常不能吃到新鲜的蔬菜和水果，最有可能产生什么样的营养缺乏症？解析：易患维生素 A 和维生素 C 缺乏症。新鲜蔬菜和水果中维生素 C 含量高，同时在新鲜蔬菜和胡萝卜中含有 、-胡萝卜素，可转变为维生素 A。其中 -胡萝卜素是主要的维生素 A 原，其转化率为 100%，-胡萝卜素转化率为 53%，-胡萝卜素转化率为28%。缺乏维生素 C 易患坏血症，主要症状是毛细血管易破裂出血；缺乏维生素 A 易患夜盲症、干眼病等。【试题精选】1、
11、下图表示酶活性是温度的函数。在温度 t1 时：D19A、底物能量太高不能与酶形成稳定的复合物B、反应自发进行不需要酶的参加 C、反应产物变得不稳定D、酶的热变性发生 E、酶中肽键的发生水解2、下图表示酶促反应过程中温度和 10 分种内被转化的底物的关系。在 t1 和 t2 时发生反应的底物的量是相同的。这一现象合理的解释是：CA、在 t1 和 t2 时有活性的酶分子数是相等的B、在 t1 和 t2 时酶分子都与同样的量的底物起反应C、在 t1 时较多的酶分子有活性，但非催化反应速度比 t2 时的低D、在 t1 时较少的酶分子有活性，但非催化反应速度比 t2 时的高3、酶类：CA、进行没有它们的
12、存在就不能发生的反应B、使反应常数有利于反应产物的形成C、加速反应，其原因是酶减少了反应得以进行所需要的能量D、加速反应，其原因是使底物中的能量增加了E、上述所有答案都是部分正确。4、催化下面反应的酶是：BA、脱氢酶 B、脱羧酶 C、氧化酶 D、水解酶5、脂溶性维生素中有：AA、维生素 K B、吡哆素 C、硫胺素 D、维生素 C6、造成苯酮尿症是由于缺少由基因控制的：BA、一种激素 B、一种酶 C、肝细胞 D、智力低下207、凝血过程需要多种要素参与，下列与凝血无关的是：、纤维蛋白原 、白细胞 、血小板 、维生素8、哪一种酶一般不存在于人体中？CA、DNA 聚合酶 B、己糖激酶 C、几丁质酶
13、D、ATP 合成酶9、在一个合成连锁反应中：1 2 3 4 如果酶4 失效，在这种情况下，要使细菌能够正常生长，我们至少要向培养基中加入什么？EA、X B、A C、X 和 C D、C 、10、在酶的催化反应中，下面叙述的是竞争性抑制剂的影响？A（1）Vmax 不被改变（2）抑制作用可由底物浓度的增加而逆转（3）Km 增加（4）抑制剂结合在酶的不同位置。哪种综合的叙述是正确的？A、 （1） （2） （3） B、只有（1） （3） C、只有（2） （4）D、只有（4） E、 （1） （2） （3） （4）11、对于酶的别构效应，下列哪种阐述正确？AA、调节代谢过程的方式 B、活化酶活性的方式C、竞
14、争性抑制酶活性的方式 D、非竞争性地抑制酶活性的方式12、琥珀酸脱氢酶通常催化琥珀酸的脱氢反应。丙二酸在与此酶形成暂时性复合物方面和琥珀酸非常相似，但丙二酸本身不能由琥珀酸脱氢酶催化脱氢。在这一例子中，琥珀酸和丙二酸分别是：AA、前者为底物，后者为竞争性抑制剂B、前者为竞争性抑制剂、后者为底物C、前者为正调节剂（效应物） ，后者为负调节剂D、前者为负调节剂，后者为正调节剂（效应物） 。13、酶的竞争抑制剂具有：BA、同酶分子相似的结构 B、同底物分子相似的结构C、同编码酶的基因结构相似 D、将底物与酶相连的能力 E、永久性抑制酶的能力14、化学抑制剂乙酰胆碱脂酶的主要反应将会导致：CA、所有肌
15、肉完全松驰 B、仅骨骼肌（横纹肌）松驰C、大多数肌肉包括横纹肌和平滑肌收缩 D、仅部分横纹肌收缩E、仅部分平滑肌收缩15、有一种酶催化反应 P+Q 到 R，见下图。图中的实线表示没有酶时此反应的进程。在 t1 时，将催化此反应的酶加入反应混合物中。图中的哪条曲线能表示此反应的真实进程。（图中方括号中表示浓度）C21A、 B、 C、 D、 E、16、在煮过的和没煮过的土豆片上分别滴几滴过氧化氢。在土豆片 X 上出现泡沫，在土豆片 Y 上没有泡沫，以下哪一项是正确的解释？CA、土豆 X 是煮过的，因为过氧化氢只影响碳水化合物分解成单糖B、土豆片 X 是没煮过的，因为在没煮过的土豆片中的酶能使过氧化
16、氢不起作用C、土豆片 X 是没煮过的，因为植物中含有酶，促使过氧化氢的分解，但酶会在高温中失效。D、土豆片 X 是没煮过的，因为过氧化氢分解土豆片中的酶。17、关于酶的下列说法中哪个是对的？AA、假若酶的三维结构被瓦解，那么它的正常活性就会部分或全部丧失B、酶提供使反应开始所必需的活化能C、酶活性与温度和 pH 无关D、一个酶分子只起一次作用，然后就被破坏了第六节 核酸【知识精讲】核酸的研究已有 100 多年的历史。1868 年，瑞士的一位年青科学家 Miescher 从外科绷带上脓细胞的细胞核中分离出了一种有机物质，它的含磷量之高超过任何当时已经发现的有机化合物，并且有很强的酸性。由于这种物
17、质是从细胞核分离出来的，当时就称它为核素，即现在我们所说的脱氧核糖核酸（DNA） 。一核苷酸核酸是一种线形多聚核苷酸。在核酸的早期研究工作中，曾把注意力集中在对核酸降解产物的研究上。1、碱基 核酸中碱基分为嘌呤碱与嘧啶碱两大类（1）嘌呤碱：常见的有腺嘌呤（A）和鸟嘌呤（G） ，均为嘌呤衍生物，其分子很接近平面。（2）嘧啶碱：核酸中常见的嘧啶有胞嘧啶（C） 、胸腺嘧啶（T）和尿嘧啶（U） ，均为嘧啶衍生物，为平面分子。（3）稀有碱基：核酸中还有一些含量很少的碱基，其中 tRNA 中含有较多的稀有碱基。稀有碱基种类极多，且大多数是甲基化，如黄嘌呤、次黄嘌呤（I） 、甲基次黄嘌呤（I m） 、5-甲
18、基胞嘧啶、5-羟甲基胞嘧啶等。2、核苷：由五碳糖环上的 C1的半缩醛羟基与嘧啶碱 N1的氢，或与嘌呤碱 N9的氢之间缩合而成 N-C 键，称为 N-糖苷键。由于 C1的半缩醛羟基的位置有 -、-两种构型（异头体）之分，因此 N-糖苷键应有 -N-糖苷键或 -N-糖苷键之分，核酸分子中为 -N-糖苷键。 图 37：嘌呤碱生化上P331图 38：嘧啶碱生化上P331图 39：稀有碱基生化上P331223、核苷酸：核苷中五碳糖 C5上的羟基被磷酸酯化，就形成核苷酸 ，生物体内游离的核苷酸多是 5-核苷酸。用碱水解 RNA 时，可得到 2-或 3-核糖核苷酸。二脱氧核糖核酸（DNA）DNA 是主要的遗
19、传物质，是遗传信息的载体。1、DNA 碱基组成规律：所有双链 DNA 中 A=T、C=G；DNA 的碱基组成具有种的特异性；对同一个体而言，DNA 的碱基组成没有组织和器官的特异性，不随生长发育阶段、营养状况和环境的改变而改变。2、DNA 的一级结构：DNA 分子的一级结构是由数量极其庞大的四种脱氧核糖核苷酸通过 3-5磷酸二酯键连接起来的直线形或环形多聚体，没有侧链。遗传信息贮存于 DNA的脱氧核苷酸序列中。现在测定 DNA 序列已成为分子生物实验室的常规方法。脱氧核苷酸链的两端是不同的，一端为 3-羟基端，另一端为 5-磷酸端。3、DNA 的空间结构 目前公认的 DNA 双螺旋结构模型的建
20、立，主要有两方面的根据：一是 DNA 碱基组成的定量分析；二是对 DNA 纤维和 DNA 晶体的 X-射线衍射图象分析。由于当时还不能得到 DNA分子的结晶，Watson 和 Crick 所用的资料来自于相对湿度为 92%时所得到的 DNA 钠盐纤维。这种 DNA 称为 B-DNA，生物体内的 DNA 几乎都有以 B-DNA 存在。（1）B-DNAB-DNA 的结构：A、两条反向平行的脱氧核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕成的右手螺旋（简单地说，右手螺旋是指当一条脱氧核苷酸链从左下方走向右上方时，总位于另一脱氧核苷酸链的上面） ；B、嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内侧，并以 A-T（两个氢键） 、C-G
21、（三个氢键）碱基对的形式存；C、磷酸与脱氧核糖在外侧，彼此通过 3，5-磷酸二酯键相连接，形成 DNA 的骨架；脱氧核苷酸链的走向由磷酸二酯键的方向决定，习惯上以 35为正方向；D双螺旋结构上有二条螺旋形凹沟，较深的为大沟，较浅的为小沟；E双螺旋平均直径 2nm，两个碱基对之间相距的高度，即碱基堆积距离为 0.34nm，两个脱氧核苷酸之间的夹角为 36，因此 B-DNA 的螺距（每转一周的高度）为 3.4nm，每个螺距上有 10 个碱基对；F碱基互补配结原则是 DNA 复制、转录、逆转录、翻译等过程的分子基础。B-DNA 的重要特性：A、DNA 的长度 DNA 往往是很长的，如大肠杆菌染色体
22、DNA 由 410 6碱基对（bp）组成，其长度为 1.410 6nm。这是一种极其不对称的分子，因此一般方法所制备的 DNA 样品往往是降解了的 DNA 片段。B、DNA 分子上的碱基产生互变异构体的机率不大。氢原子在碱基上具有较固定的位置，即一般只存在异构体中的一种类型，这是使 DNA 稳定的重要因素之一。另外，氢原子偶尔也会在碱基间移动而产生异构体，这是 DNA 复制时引起突变的原因之一。C、维持 DNA 稳定性的因素有：碱基堆积力、氢键、盐键（磷酸基团上的负电荷与介质中的阳离子之间） 、范德华力等。D、DNA 分子的可塑性：在溶液中 DNA 分子有较大的可塑性，即 DNA 分子常发生弯
23、曲、缠绕或伸展等现象，这是由于脱氧核苷酸链骨架上共价键的转角引起的。图 40：核苷生化上P332图 41：核苷酸生化上P332图 42：3-5 磷酸二酯键、DNA 书写方法生化上P334 ，图 43：DNA 空间结构生化上P33523E、 染色质形成染色体染色质是 DNA 分子与蛋白质共同组成的化合物。核小体是染色质的基本结构单位（染色质的一级结构）：核小体的核心是由四种组蛋白（H 2A、H 2B、H 3、H 4）各两个分子构成的扁球状体，DNA 双螺旋在组蛋白八聚体分子的表面盘绕 1.75 圈，其长度相当于 140 至 168 个碱基对，这种组蛋白的核心大小约为11115.7nm 的扁球形粒
24、子。在相邻的两个核小体之间，由长约 50-60 个碱基对的 DNA连接，称为连接线，在连接线部结合一个组蛋白质分子 H1，一级结构使 DNA 的长度大约压缩了 8 倍。螺线体（染色质的二级结构）：螺线体是由核小体经螺旋化形成的中空线状体结构，它的外径约为 30nm，相邻螺旋间距为 11nm，螺线体的每一周螺旋包括 6 个核小体，因此DNA 的长度在这个等级又压缩了 6 倍。超螺线体（染色质的三级结构）：在螺线体的基础上，染色质进一步螺旋化形成中空的线状体结构，外径为 400nm， ，其长度在这一级别又压缩了 40 倍。染色体（染色质的四级结构）：在超螺线体的基础上，再一次螺旋化，长度压缩了 5
25、倍。人的一条染色体中 DNA 的长度平均为几个厘米，而一条染色体只有几个微米长，所以DNA 在染色体内压缩程度约为八千至一万倍。（2）A-DNA：相对湿度为 75%时所获得的 DNA 钠盐纤维，与 B-DNA 一样也为右手螺旋，但螺旋体较宽而短。RNA 分子的双螺旋区、RNA-DNA 杂交双链与 A-DNA 结构相似。（3）Z-DNA：为左手螺旋，只有一条大沟，无小沟。天然 DNA 的局部可出现 Z-DNA，这说明 B-DNA 与 Z-DNA 之间是可以互变的，有人认为这种互变可能正是基因有无活性及活性变化的基础。（4）环形 DNA：生物体内有些 DNA 是以双链环形 DNA 形式存在的，如某
26、此病毒 DNA、细菌质粒 DNA、真核细胞线粒体 DNA 和叶绿体 DNA、许多细菌的染色体 DNA 也是环形的。三核糖核酸（RNA）1、RNA 的结构RNA 分子也是无分支的线形分子，与 DNA 主要差异为：一般为单链、五碳糖为核糖、没有 T，有 U、有一些稀有碱基等。2、RNA 的类型 ：mRNA、rRNA、tRNA（1）tRNA 的生物学功能：在蛋白质合成过程中起转运氨基酸的作用；参与蛋白质合成的起始等。tRNA 的分子结构特点：由 70-90 个核苷酸组成，沉降系数为 4S（s 为沉降系数，表示单位离心场中某物质的沉降速度，单位为秒。蛋白质、核酸、核糖体的沉降系数介于 110 -13到
27、 20010 -13之间。为方便起见，把 10-13秒作为一个单位，叫斯维得贝格单位，用 S 表示）碱基组成中有较多的稀有碱基3-末端为都为 CCA，用来接受活化的氨基酸5-末端大多为 pG，也有 pC 的。tRNA 的二级结构呈三叶草形，由氨基酸臂、二氢尿嘧啶环、反密码环（环中部为3 个碱基组成，次黄嘌呤核苷酸常出现在反密码子第一个碱基位置上） 、额外环、TC 环等五个部分组成。tRNA 的三级结构形状象一个倒写的 L 字母。（2）mRNA绝大多数真核细胞和某些病毒的 mRNA 的 3-末端为一段由 200 个 A 组成的图 44：染色质的四级结构遗传P16图 45：tRNA 结构生化上P3
28、4524polyA，是在 mRNA 转录后经 polyA 聚合酶的作用下添加上去的，与 mRNA 从细胞核到细胞质的转移有关；也与 mRNA 的半衰期有关（新合成的 mRNA，其 polyA 长，而衰老的 mRNA，其polyA 缩短。原核细胞的 mRNA 一般无 polyA. 真核细胞的 mRNA 的 5-末端还有一个结构，叫 G-帽，5-末端的鸟嘌呤的 N7被甲基化，其作用是抗 5-核酸外切酶对 mRNA 的降解，同时还可能与蛋白质合成的正确起始作用有关。（3）rRNA ：含量大，约占 RNA 总量的 80%，是构成核糖体的骨架。大肠杆菌中的核糖体中有三类 rRNA：5S、16S、23S；
29、动物细胞核糖体中有四类rRNA：5S、5.8S、18S、28S。四核酸的性质1、紫外吸收：嘌呤碱与嘧啶碱具有共轭双键，使碱基、核苷、核苷酸、核酸在 260nm处有最大吸收值。2、核酸的变性（1）降解：指多核苷酸链骨架上的共价键（3 ，5-磷酸二酯键）的断裂。（2）变性：指核酸双螺旋区的氢键断裂，不涉及共价键的断裂。热变性与酸碱变性 ：引起核酸变性的因素很多，其中由温度升高引起的变性，叫热变性；由酸碱度改变引起的变性，叫酸碱变性。 DNA 熔点（熔解温度、Tm）：DNA 的热变性是爆发式的，变性作用发生在很窄的温度范围内，通常把 DNA 的双螺旋结构失去一半时的温度称为该 DNA 的熔点。影响
30、Tm 值大小的因素：均一性越高，Tm 越窄；G-C 的含量越高，Tm 越高；离子强度（中性盐的浓度）越高，Tm 越高；RNA 也会发生变性，但 Tm 较低，变性曲线比 DNA 缓和。增色效应：DNA 变性后，紫外吸收增加的现象3、核酸的复性复性：变性的 DNA 在适当的条件下，又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构，复性后的 DNA，其生物活性能基本恢复。退火：指热变性后的 DNA 慢慢冷却至室温，其理化性质和双螺旋结构得以复原的过程。减色效应：DNA 单链重组（即复性）后，紫外吸收下降的现象4、核酸杂交 将不同来源的 DNA 放在试管中，经热变性后，慢慢冷却。若这些异源 DNA 之间在
31、某些区域有相同的序列，则 DNA 复性过程中，会形成杂交 DNA 分子；DNA 与互补的 RNA 之间也可以发生杂交。目前实验室中应用最广的是用硝酸纤维素膜作支持物进行的杂交。Southern 印迹法：DNA-DNA 分子杂交技术。Nouthern 印迹法：DNA-RNA 分子杂交技术。Western 印迹法：利用抗原-抗体反应，分析蛋白质的技术。五DNA 的限制性内切酶已发现的 DNA 限制性内切酶有 100 多种，主要在细菌中。这类酶具有高度的专一性，能识别 DNA 上的特定位点，将两条链都切断，形成粘性末端（末端为单链）或平末端（末端为双链）DNA 限制性内切酶可降解外源性 DNA，对自
32、身 DNA 不起作用，因为在自身 DNA 的酶切位点有甲基化修饰而受到保护。【例题精析】例 1、下列因素中哪个不是诱变剂？D图 46：G- 帽结构 生化上 P34525A、 -射线 B、紫外线 C、吖啶 D、乙酸解析：-射线是能量极高的电离辐射，可通过直接或间接的方式诱发突变，紫外线也可诱发突变，紫外线的最有效波长为 270 纳米，它相当于核酸的吸收峰，因此可以引起DNA 碱基对的突变和染色体的断裂。吖啶类染料能和 DNA 结合，造成碱基对的增加或缺失，从而诱发移码突变。乙酸参加正常代谢，不是诱变剂。例 2、如果 E.coli 染色体 DNA 的 75%用来编码蛋白质，假定蛋白质的平均分子量为
33、60103，请问：若 E.coli 染色体 DNA 大约能编码 2000 种蛋白质。求该染色体 DNA 的长度是多少？该染色体 DNA 的分子量大约是多少？（以三个碱基编码一个氨基酸，氨基酸的平均分子量为 120，核苷酸对平均分子量为 640 计算）解析：设 E.coli 染色体的碱基对为 X，则编码蛋白质的基因片段中应有的碱基对为：（200060000/120）3=0.75X，X=4106（碱基对）染色体的长度=0.34410 6=1.36106 nm染色体 DNA 的分子量=640410 6=2.56109例 3、有一噬菌体的突变株其 DNA 长度为 15m，而野生型的 DNA 长度为 1
34、7m，问该突变株的 DNA 中有多少个碱基缺失？解析：突变株的 DNA 比正常株 DNA 短 2m，相当于缺失碱基数：210 3（nm）0.34nm=5.8810 3(碱基对)例 4、有两个 DNA 样品，分别来自两种未确认的细菌。这两个 DNA 样品中腺嘌呤碱基含量分别占它们 DNA 总碱基的 32%和 17%。其中哪一种 DNA 是取自温泉（64）环境下的细菌，哪一种是取自嗜热菌？解析：A 占总碱基 32%的 DNA 取自温泉，A 占总碱基 17%的 DNA 取自嗜热菌，因为其 G-C 碱基对含量高，变性温度高，因此在高温下更稳定。例 5、两个 DNA 分子，其长度相等，碱基组成不同，一个
35、含 20%的 A+T，另一个含 60%的 A+T，哪个分子的 Tm 高一些？解析：含 20%A+T 的 DNA 的 Tm 高一些，因其含有 80%的 G+C，因为 C-G 碱基对间有三个氢键，而 A-T 碱基对间含两个氢键，因此使含 G-C 碱基对多的 DNA 变性一半时所需的能量更多，即熔点温度更高。【试题精选】1、由 DNA 和蛋白质构成的真核生物染色体的基本单位是：CA、核苷酸 B、核苷 C、核小体 D、类核2、生物存在的大分子中，最长的可能是：AA、DNA B、RNA C、纤维素 D、淀粉 E、蛋白质3、下列物质中，因改变结构而可能导致生物学活性丧失的是：AA、核酸 B、淀粉 C、脂类
36、 D、几丁质4、在双链 DNA 分子中，T 占 15%，那么 G 占：C26A、15% B、30% C、35% D、85%5、从某种病毒中提取出核酸，经测定，其碱基的组成中 A 与 T 含量相等，C 与 G 的含量相等。以下有关这种病毒核酸种类的结论哪个正确：CA、RNA B、单链 DNA C、双链 DNA D、环状 DNA6、以下的核苷酸链是：AA、DNA B、mRNA C、tRNA D、rRNA7、在测定肺结核菌的 DNA 碱基组成后，发现腺嘌呤占总碱基的 18%，部：G+C 的含量占总碱基的百分比？DA、18% B、32% C、36% D、64%8、以下哪项对 RNA 来说是正确的？DA
37、、 （G+C）=（A+U） B、 （G+A）=（C+U）C、 （G+C）（A+U） D、上面都不对9（多选） 、真核生物中，在核中制造的大部分 RNA 在从核中转运到细胞质中受到 3 种修饰。其中哪种修饰有助于保护 RNA 不被核酶所降解：A、BA、一种甲基鸟苷帽子添加到它的 5端B、一种多聚腺苷酸尾添到它的 3端C、内含子被拼接后去掉10、粘细菌叫做“社会”细菌，因它们能以多细胞聚生，形成这些多细胞结构的细菌之间可用化学信号通讯，这些化学信号之一是 cAMP。科学家在半固体表面上培养粘细菌，其表面上细菌可以移动。在培养皿上使用了 cAMP 梯度，也就是 cAMP 的浓度在培养皿的一边高，而另
38、一边低，那么发现细菌在培养皿的哪一地方呢？AA、在 cAMP 浓度高的一边 B、在 cAMP 浓度低的一边C、在 cAMP 浓度适中的一边 D、分散在培养皿的所有地方11、几乎所有的动物细胞都含有相同的基因，但细胞和细胞在结构、功能上不同，这是因为它们合成不同的：BA、rRNA 分子 B、mRNA 分子 C、组蛋白 D、核糖体12、生物学家假定最早出现的遗传物质是 RNA，以下哪项是其主要原因？CA、米勒产实验产生了 RNA B、RNA 结构上比 DNA 更原始 C、称为核酶的 RNA 催化一些化学反应 D、DNA 在疏水介质中不稳定E、RNA 在所有动物中都有13、下面的哪种结合键在 DNA
39、 的结构中是不存在的？EA、3-5磷酸二酯键 B、N-葡萄糖苷键 C、H 键D、疏水作用键 E、二硫键14、蚕的丝腺细胞能产生大量的蛋白质，这种蛋白质叫丝心蛋白。这些细胞不产生血液中的蛋白质，因此推测丝腺细胞：B27A、只有丝心蛋白基因 B、有血蛋白和丝心蛋白基因C、有丝心蛋白基因和其他基因，但没有血液蛋白基因 D、比合子的基因少15、从最简单的（即包含最少种类的蛋白质分子）到最复杂的（即包含最多的不同蛋白质分子）排序?AA、疯羊病病原蛋白、HIV 病毒、真核核糖体、线粒体B、真核核糖体、HIV 病毒、疯羊病病原蛋白、线粒体C、疯羊病病原蛋白、HIV 病毒、线粒体、真核核糖体D、HIV 病毒、疯羊病病原蛋白、真核核糖体、线粒体E、疯羊病病原蛋白、真核核糖体、HIV 病毒、线粒体
