1、1细胞工程试题 (黑色字体是重点)一、选择1、植物细胞表现出全能性的必要条件是：（C ）A、给予适宜的营养和外界条件B、导入其他植物细胞的基因C、脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件D、将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中2、植物体细胞杂交可以解决不同生物之间的问题（B）A、亲缘关系远 B、生殖隔离 C、地理隔离 D、组织分化3、动物细胞培养的正确过程是A 原代培养传代培养 细胞株 细胞系B 原代培养传代培养 细胞系 细胞株 C 传代培养 原代培养 细胞株 细胞系D 传代培养 原代培养 细胞株 细胞系4、在植物组织培养中，培养基的 pH 值一般为（B ）A 低于 5.0 B 5.55.8 C 6
2、.07.0 D 7.0 以上5、对于花药培养和花粉培养，下列说法正确的是（ A）A 花药培养属器官培养，花粉培养属细胞培养B 花药培养属细胞培养，花粉培养属器官培养C 两者都属于器官培养 D 两者都属于细胞培养6、植物组织培养形成的愈伤组织进行培养， 又可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为（ C） A、脱分化 B、去分化 C、再分化 D、脱分化或去分化7、下列不能作为植物组织培养的材料是：（ D）A、秋海棠的叶 B、马铃薯的块茎C、成熟的花粉 D、木质部中的导管细胞8、用植物组织培养技术可以培养或生产出（ D） 。A、次生代谢产物 B、无病毒植物 C、人工种子 D、A，B，C 均可9、经高温
3、灭菌后。培养基的 pH 会（A ）A 降低 B 升高 C 不变 D 不能确定10、生长素与细胞分裂素在植物组织培养中的作用是（B ）A 生长素促进芽的生长，细胞分裂素促进根的生长B 生长素促进根的生长，细胞分裂素促进芽的生长C 生长素与细胞分裂素均促进根的生长D 生长素与细胞分裂素均促进芽的生长11、 培养室里的湿度一般保持在( C )A 3040%；B 5060%；C 7080% ；D 8090%12、下列培养基中( C )无机盐的浓度最低。A MS 培养基；B B5 培养基； C White 培养基；N6 培养基13、高温易被破坏分解的植物激素是( B )_。A IAA； B GA；C N
4、AA；D Zt14、下列不属于活性炭在组织培养中作用的是( D )。A 吸附有毒物质；2B 减少褐变，防止玻璃化；C 创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长；D 增加培养基中的养分；15、下列不属于细胞分裂素类的植物激素是( BC ) 。A 6-BA；B NAA；C IAA；D Kt16、.下列不属于大量元素的盐是( C )。A NH4NO3；B KNO3；C ZnSO4.7H2O；D MgSO4.7H2O17、在原生质体的培养中，渗透稳定剂的作用是：A 稳定原生质体的形态而不使其被破坏 AB 支持作用C 提供营养D 调节 PH 值18、下列实验中可能获得单倍体植株的是( BD ) 。
5、A 小麦的茎尖培养；B 番茄花药培养；C 玉米胚乳培养；D 玉米花粉培养19、 下列实验中可能获得三倍体植株的是( C )。A 小麦的茎尖培养；B 番茄花药培养；C 玉米胚乳培养；D 玉米花粉培养20、原生质体纯化步骤大致有如下几步：将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，一般以500rmin 离心 15min。用吸管谨慎地吸去上清液。将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同) ，再次离心，去上清液，如此重复三次。将原生质体混合液经筛孔大小为 40100um 的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。用培养基清洗一
6、次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度为 104106ml。正确的操作步骤是：(C)AB C D 21、培养的丛生苗过密，生长弱，可能的原因有( BD )A、光照过强 B、温度过高 C、生长素过高 D、分裂素过高22、愈伤组织生长过紧密，平滑，粗厚，生长缓慢，其主要原因是( AC )A、糖的浓度过高 B、培养基的渗透压过低 C、生长素和分裂素的浓度过高 D、生长素和分裂素浓度过低 23、愈伤组织不分化、生长过旺、疏松，其原因有( C )A、糖的浓度过高 B、培养基的渗透压过低 C、生长素和分裂素过高 D、生长素和分裂素过低24、诱导试管苗生根时，培养基的调整应(
7、D )A、加大盐的浓度 B、加活性炭 C、加大分裂素的浓度 D、加大生长素的浓度 25、诱导试管苗分化丛芽，培养基的调整应( B )_。A 加大生长素的浓度 B 加大分裂素的浓度 C 加活性炭 D 降低盐的浓度。26、 植物组织培养可用于：( ABCD )。A 快速繁殖；B 脱除病毒；C 减少品种变异 D 育种；27、对生根培养不起作用的激素是：( A )A GA； B IAA； C NAA； D IBA28、芦荟经初代培养得到株无菌苗，以后按每天继代增殖一次，每次增殖倍数为3倍，一年后繁殖苗有( B )A 3410 株 B 4 312 株 C 310 株 D 412 株29、植物组织培养是指
8、（ C）A、离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织 B、愈伤组织培育成植株C、离体的植物器官、组织或培养成完整的植物体 D、愈伤组织形成高度液泡化组织30 经诱导融合得到的杂种细胞还需经过下列哪项措施才能得到杂种植株（ B）A、分离杂种细胞，直接接种便可获得B、筛选鉴定杂种细胞后，再经植物组织培养才能获得植株C、让杂种细胞自交获纯系植株D、杂种细胞经传代培养成植株31、植物体细胞融合完成的标志是（ A）A、产生新的细胞壁 B、细胞膜发生融合C、细胞质发生融合 D、细胞核发生融合32、植物体细胞杂交的目的中，错误的是（ D）A、把两个植物体的优良性状集中在杂交植株上B、克服远源杂交不亲和的障碍C、获
9、得杂种植株D、实现原生质体的融合33、下列有关单克隆的叙述正确的是（ C）A、是性细胞的无性繁殖 B、花粉离体培养可视为单克隆C、是原始细胞减数分裂产生的细胞群 D、上皮细胞无性繁殖产生的细胞群34、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的是（A ）A、经过免疫的 B 细胞 B、没经过免疫的 T 细胞C、经过免疫的 T 淋巴细胞 D、没经过免疫的 B 淋巴细胞35、单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面与常规抗体相比的特点是（ D）A、单克隆抗体的特异性、纯度低、灵敏度高、产量高B、单克隆抗体的特异性、纯度高、灵敏度低、产量高C、单克
10、隆抗体特异性、纯度高、灵敏度高、产量低D、单克隆体抗体的特异性强、纯度高、灵敏度高、产量高36、 “生物导弹”是指（D ）A、单克隆抗体 B、杂交瘤细胞C、产生特定抗体的 B 淋巴细胞 D 、在单克隆抗体上连接抗癌药物37、动物细胞工程技术的基础是（D ）A、动物细胞融合 B、单克隆抗体C、胚胎移植 D、动物细胞培养38、下列过程中，没有发生膜融合的是（ C）A、植物体细胞杂交 B、受精过程C、氧进入细胞中的线粒体 D、单克隆抗体的产生39、 关于杂交瘤细胞的叙述中，正确的是（ACD ）A、有双亲细胞的遗传物质 B、无增殖的本领C、可分泌出特异性抗体 D、有大量增殖的本领1、C 2、B 3、B
11、 4、B 5、A 6、C 7、D 8、D 9、A 10、B 11、C 12、C 13、B 14、D 15、BC 16 C 17、 A 18、BD 19、C 20、C 21、BD 22、AC 23、C 24、D 425、B26、ABCD 27、A 28、B 29、C 30、B 31、A 32 D 33、C 34、A 35、D 36、D 37、D 38、C 39、ACD 二、填空：1、 细胞工程的理论依据是：植物细胞全能性。 2、细胞工程实验室必要的设备有：水纯化装置、超声波清洗器、蒸汽压力消毒器、电热干燥箱、过滤除菌装置、超净工作台、培养箱、摇床、显微镜、显微操作仪、血球计数板、移液器。3、培养
12、基成分主要包括：无机成分 、碳源 、维生素、植物生长物质、有机附加物、植物激素类、固化剂和悬浮剂。4、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，而且还能维持组织细胞的渗透压。5、琼脂在固体培养时，是作为培养基的固化剂，一般用量为 4-10g/L。6、常用的生长素有吲哚乙酸（IAA） 、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D） 、吲哚丁酸（IBA） 、奈乙酸（NAA）等，常用的细胞分裂素激动素（KT） 、6-苄基氨基嘌呤（6-BA） 、玉米素（Zt ） 。7、外植体污染原因从病源分面主要有_ 和_ 两大类。8、防褐变的措施有：1、植物种类和基因型：选出褐变程度较轻的材料来进行培
13、养、2、外植体的妈材部位和生理状态、3、培养基的成分、4、培养时间和培养条件。9、外植体灭菌一般先用_ ，再用_浸泡_min 。10、质量较好的愈伤组织多呈_ 色，_适中。11、由愈伤组织再生植株有两条途径_ 和_ 。12、胚胎培养包括_、_、_、_及_ 。13、幼胚培养时其发育过程有_、_ 、_三种方式。14、离体胚的培养分为_、_两种。15、花药和药粉培养技术主要包括_ 、_ 、_ 及_16、对多数植物来说，_或_的花粉最容易形成花粉胚或_。17、单细胞培养的方法常有_、_ 、_、_等。18、由植物器官分离单细胞_是分离单位细胞的最好材料，常用的分离方法有_ 和_ 19、原生质体分离的方法
14、有_ 和_ 。20、为获得高质量的原生质体，应选择_ 的植物体_部分。21、酶解法得到原生质体常用的酶有_、_ 、_ 。22、常用的渗透压稳剂是 ，包括_、_ 、_ 、_等。23、原生质体培养方法有_、_、_ 。24、原生质体融合主要方法有 _、_ 、_ 。25、植物常用脱毒方法_、_、_ 、_、_等。26、无病毒苗特点_、_、_、_ 。27、热处理脱毒有_ 、_ 。28、脱毒苗的鉴定方法有_、_ 、_ 、_ 、_ 。29、种质保存具体的保存方法可分为_ 、_、_ 、_。30、超低温保存方法有_、_ 、_、_。531、影响茎尖脱毒及成活的因素有_、_、_、_32、愈伤组织通过再分化形成再生植株
15、的方式主要有三种_、_、_33、生长素与细胞分裂素的比例低则产生苗，比例高则生根，比例大致相等则产生无结构的愈伤组织。34、由愈伤组织再生植株有两条途径_器官发生途径_和_体细胞胚发生途径。35、在花粉培养过程中，适宜的花粉发育时期为_。36、_、_和_并称为植物组织培养的三大难题。37、植物材料酒精灭菌的时间一般在 30s 范围，升汞灭菌一般在 612min 范围。38 常用灭菌方法有：热力灭菌、紫外线杀菌、电力辐射灭菌。 39、原生质体纯化的方法有_过滤-离心法_和_漂浮法_ 。40、从再生植株倍性来看，小孢子培养通常产生_植株，胚培养通常产生_ 植株， _通常产生三倍体植株。 41、去掉
16、细胞核的方法有：_盲吸区核法_、_功能去核法法_、化学诱导去核法_。42、在组织培养中，不耐热的物质用_法灭菌，而培养基常用_法灭菌。_占主导地位；比值_促进芽的生长，这时_占主导地位。43、在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以_mm、带_个叶原基为好。44、植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为_培养和_培养。45、在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成_，而与脱毒效果成_。46、大多数植物组织培养的适宜温度范围是 2327，培养基的 PH 值范围是 5.5-6.5。47、花药培养是_培养，花粉培养属于_培养，但二者的培养目的一样，都是要诱导花粉
17、细胞发育成单倍体细胞，最后发育成_。48、原生质体的融合可实现_的杂交，其融合的方式分为_和_两类。49、具有防止褐变作用的维生素是。50、防止植物材料产生褐变的主要措施有条：1、选择合适的外植体和培养条件、2、使用抗氧化剂、3、连续转接。51、原生质体的融合可实现远缘的杂交，根据其融合的效果分为对称融合和不对称融合两类。52、植物常用脱毒方法_物理方法_、_化学方法_、_生物方法_ 等。53、植物细胞工程包括_、_、_、_、_、_等。54、通过器官发生再生植株的方式有_、_、_。55、单细胞的主要分离方法_、_。56、转基因的方法有：直接导入法、载体介导法、花粉管通道法、病毒感染法。57、人
18、工种子的结构_、_、_。58、单克隆抗体的制备包括_、_、_、_、_。59、根据细胞生长形态可以将动物培养细胞分为_、_60、组织工程的三要素_、_、_ 三、名词解释1、细胞工程（cell engineering）：应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。62、细胞培养（cell culture）：是指生物细胞和组织在离体条件下的生长和增殖。3、细胞核移植(nuclear transplantation)：利用显微操作技术将细胞核与细胞质分离，然后再将不同来源的
19、核与质重组，形成杂种细胞。4、染色体工程(chromosome engineering ) ：把单个的染色体或染色体组转入或移出受体细胞，从而形成新的染色体组合和遗传构成。5、胚胎工程(embryonic engineering)：以生殖细胞和胚胎细胞为对象进行的操作，主要包括体外受精、胚胎切割、胚胎移植等。6、干细胞（stem cell）：动物体内具有分化潜能，并能自我更新的细胞，分为胚胎干细胞和组织干细胞。7、组织工程：应用生命科学与工程学的原理与技术，在正确认识哺乳动物的正常及病理两种状态下的组织结构与功能关系的基础上，研究、开发用于修复、维护、促进人体各种组织或器官损伤后的功能和形态的
20、生物替代物的一门新兴学科。8、植物细胞工程：以植物组织细胞为基本单位，在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作，使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而改良品种或创造新物种，或加速繁殖植物个体，或获得有用物质的过程。9、脱分化：离体培养条件下，一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生组织细胞状态或胚性细胞的状态的过程。10、再分化：脱分化后的分生细胞（愈伤组织）在特定的条件（离体培养）下，重新恢复细胞分化能力，并经历器官发生形成单极性的芽或根，或经历胚胎发生形成双极性的胚状体，进一步发育成完整生物体。11、细胞全能性：一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能力。12、外植体：植物组
21、织培养中用来进行无菌培养的离体材料，可以是器官、组织、细胞和原生质体等。13、愈伤组织：脱分化后的细胞，经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性的、松散的细胞团。14、细胞分化：是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。15、极性：植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。 16、决定：指胚胎细胞在发育过程中发生的不可逆的特化现象。17、体细胞遗传与变异：组织培养条件下所表现的遗传与变异特征18、外遗传变异（epigenetic variation）：不涉及基因结构的变化，而只是在基因表达水平上的变异，在离体条件下却可以经过培
22、养继代，长期保存。19、生理适应（physiologic adaptation）：在某种外界条件存在时才表现出变异，外界条件不存在时，变异也随之消失。20、不定根：从茎、叶上生出的根叫做不定根 22、不定芽：不是从叶腋或枝顶发出，而是从叶子、根上或从树干上发出的芽23、离体无性繁殖(propagation in vitro) ：利用离体培养技术，将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行离体培养，在短期内获得大量遗传形状一致的个体的方法。24、单株无性系或单芽无性系：离体无性繁殖得到的植株群体来自一个单株或单芽，他们的遗传组成相同，称为单株无性系或单芽无性系 25、植物脱毒（
23、virus elimination）：利用植物组织培养技术，脱除植物细胞中浸染的病毒，生产健康的繁殖材料。26、体细胞胚或胚状体：离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程所形成的7胚的类似物（不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞） 。27、初代培养：直接从体内取出的细胞、组织和器官进行的第一次的培养物28、继代培养：将初代培养产物转入继代培养基上,使愈伤组织分化出丛生芽、不定芽继续增殖、胚状体发育成完整植株 29、指示植物：具有能够辨别某种病毒的专化性症状的寄主植物。30、酶连免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）：通过化学的方法将
24、酶与抗体或抗原结合起来，形成酶标记物。然后将它与相应的抗原或抗体起反应，形成酶标记的免疫复合物。结合在免疫复合物的酶，在遇到相应的底物时，催化无色底物生成有色底物，通过比色计可以准确测定。31、花药培养(anther culture):把发育到一定阶段的花药接种在人工培养基上,使其发育和分化成为植株的过程.32、花粉培养(pollen culture):也叫小孢子培养(microspore culture),是从花药中分离出花粉粒,使之成为分散的或游离的状态,通过培养使花粉粒脱分化,进而发育成完整植株的过程.33、胚胎培养：使胚或具胚器官在离体无菌条件下发育成幼苗的技术。34、胚培养：在无菌条
25、件下将胚从胚珠或种子中分离出来，置于培养基上进行离体培养的方法 35、早熟萌发(early mature sprouting)：未经完成正常的胚胎发育过程而形成幼苗的现象36、胚性发育(embryonal development)： 幼胚接种到培养基上以后，仍然按照在活体内的发育方式发育，最后形成成熟胚(有时甚至可能类似种子)，然后再按种子萌发途径出苗形成完整植株。37、植物离体受精：从花粉萌发到受精形成种子，从种子萌发到幼苗形成的整个过程，均在试管内完成。38、污染：在组培过程中培养瓶内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育，从而导致培养失败的现象。39、褐变：接种后，其表面开始变褐，有时甚至
26、会使整个培养基变成褐色的现象。40、玻璃化：培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水渍状现象。41、细胞悬浮培养(cell suspension culture)：将单个游离细胞或小细胞团悬浮在液体培养基中进行培养增殖的技术。42 最低有效密度：在悬浮细胞培养中，使悬浮培养细胞能够增殖的最少接种量43、细胞同步化：同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期。44、细胞平板培养：将制备好的单细胞悬浮液，按照一定的细胞密度，接种在固体培养基上进行培养，45、看护培养：用一块愈伤组织或植物离体组织看护单细胞使其生长增殖的一种单细胞培养方法47、植物次生代谢产物： 48、植板率：能长出细胞团
27、的单细胞在接种单细胞中所占的比例来表示。49、原生质体（protoplast ）：是指除去了细胞壁后的裸露的植物细胞。50、原生质体培养（protoplast culture）：将植物细胞游离成原生质体，在适宜的条件下，依据细胞的全能性使其再生细胞壁，进行细胞的分裂分化，并发育成完整植株的过程。51、体细胞杂交：两个离体细胞通过一定诱导技术使质膜接触而融合在一起随后导致两个细胞核物质融合的技术。52、人工种子（artificial seeds）：狭义 的概念是指植物离体培养中产生的胚状体（包括体细胞胚和性细胞胚） ，包裹在含有养分和具有保护功能的物质中，并在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。广义
28、 而言，人工种子是在胚状体或一块组织（顶芽、腋芽） 、一个器官8（小鳞茎等）之外加上必要的营养成分（人工胚乳）后，用具有一定通透性而无毒的材料将其包裹起来，形成的与天然种子相似的颗粒体53、种质：是决定生物遗传性状，并将遗传信息从亲代传递给子代的遗传物质。54、种质库：是指以种为单位的群体内的全部遗传物质，它有许多个体的不同基因所组成。又称基因库。55、种质资源：具有种质并能繁殖的生物体统称为种质资源或遗传资源。56、抗原：进入动物体内对肌体的免疫系统产生刺激作用的外源物质。58、.单克隆抗体：动物脾脏有上百万个 B 淋巴 细胞，一个细胞就是一个克隆，它针对抗原上的一个抗原决定族产生的抗体。5
29、9、多克隆抗体：是针对不同抗原决定族的单克隆抗体混合物60、动物细胞与组织培养：从动物体内取出细胞或者组织，模拟体内的生理环境，在无菌、适温和丰富的营养条件下，使离体细胞或者组织生存、生长并维持结构和功能的一门技术。62、原代培养：取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞在传代之前称为原代培养。63、细胞系：由原代培养初步纯化，获得的以一种细胞为主，能在体外长期生存的不均一的细胞群体64、细胞株：细胞系经过克隆或其他方法而得的单一类型的细胞群体。65、胚胎移植（embryo transfer）：供体发情排卵并经过配种后，在一定时间内从其生殖道取出受精卵或胚胎，然后把它们移植到另外一头与供体同
30、时发情排卵、但未经配种受体的输卵管或子宫角。66、超数排卵(superovulation) ：利用促性腺激素处理，使得卵巢中有更多的卵泡发育，更多的卵被排出，67、多倍体动物：细胞中含有超过正常体细胞染色体组数的动物。四、问答：1、细胞工程是什么？ 它包括哪些研究内容？答：细胞工程是指按照一定的设计方案， （2 分）应用细胞生物学、发育物学、遗传学和分子生物学的理论和方法， （2 分）通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行的实验操作，获得重构的细胞、组织器官及个体，创造优良品种和产品的综合性生物工程。 （3 分）2、简述植物细胞工程在植物基因工程和种子工程中作用和意义。3、植物组织培养技术主要包括
31、哪些环节？各环节的主要工作内容？4、论述离体培养可能出现的异常现象及防止措施？5、论述瞩望生长调节物质在组织培养中的作用？6、胚胎培养技术在育种工作中有哪些应用？7、论述茎尖培养脱毒的原理，方法及影响其脱毒效果的因素。8、试述植物组织培养中影响器官分化的因素有哪些？在实验研究中应该如何考虑这些因素 以达到较好的器官分化效果？ 9、简述植物组织培养的基本原理和操作程序，以及植物激素在组织培养中的作用；并试述组织培养技术在转基因植物研究中的作用10、请论述月季无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程11、请阐述原生质体的分离、纯化和活力鉴定的技术过程。12、阐述培养基配制的全过程(己配制好
32、母液) 。13、请阐述单克隆抗体的制备过程914、请阐述动物克隆的程序五、简答1、 植物组织培养的类型？2、在植物组织培养中，通过哪些途径可以得到完整的植株？3、培养基一般包含哪些成分？4、外植体怎样选择？答：一、外植体的部位直接影响器官分化的类型。对大多数植物来讲，茎尖是较好的部位，由于其形态已基本建成，生长速度快，遗传性稳定， 。一些培养较困难的植物，则往往可通过子叶或下胚轴的培养而奏效。二、外植体的发育年龄是影响器官形成的重要因素。一般来讲，幼年组织比老年组织有较好的形态发生能力。另外，具有变态器官（如鳞茎、球茎、块茎等）的植物，在培养中往往也容易形成相应的变态器官。三、较大的外植体有较
33、大的再生能力。因此，选择材料时应充分考虑以上各种因素，才能增加成功机会。5、按种后离体培养物对光、温、湿有何具体要求？6、简述外植体消毒的一般步骤。7、母液配制意义是什么？8、细胞分裂素和生长素的母液如何配置？9、你怎样理解有菌环境和无菌环境？10、采用高压蒸汽锅高压灭菌时，应注意哪些事项?11、生长调节物质的种类及其主要作用有：答：（1）生长素：促进细胞分裂与生长，有利于细胞脱分化形成愈伤组织；（3 分）（2）细胞分裂素：促进细胞分裂，调节器官分化，延长衰老，增进蛋白质合成；（2 分）（3）赤霉素：促进细胞的伸长生长，刺激体细胞胚进一步发育成植株。 （2 分）12、生长素在植物组织培养中起什
34、么作用，常见的生长素有哪几种？13、细胞分裂素在植物组织培养中起什么作用，常见的细胞分裂素有哪几种？14、请讲述无菌操作接种的全过程。15、离体培养中器官发生的方式16、影响器官分化的因素17、影响离体培养细胞遗传变异的因子18、离体培养过程中如何减少变异的发生？19、微繁的意义？答：意义有：（1）繁殖速度快，经济效益高 ；（2）占用空间小，不受季节限制，便于工厂化育苗；（3）保持植物种性，具有良好品质；（4）繁殖各种珍稀、濒危、名贵、突变物种；（5）便于国家和地区间种质交换；（6）安全方便地保持植物种质。20、影响原生质体融合的因素主要有：答：（1）原生质体的质量：高质量的原生质体是细胞融合
35、的首要条件；（3 分）（2）融合方法：首先考虑电融合，其次是 PEG 融合；（ 2 分）（3）融合参数：经过实验找到所采用融合方法的合适参数。 （2 分）21、茎尖培养脱毒的原理？22、简述酶联免疫吸附测定法的原理？23、如何鉴定茎尖培养而成的脱毒苗确实是无毒的?24、花药培养的意义？25、结合花粉培养，简述看护培养法。26、花药培养产生的植株染色体倍性如何?其产生的原因是什么?1027、试比较花药培养与花粉培养的异同。28、植物胚胎培养分为哪些类型?各有何特点和要求?胚胎培养有何重要意义?29、为何幼胚比成熟胚培养要求的培养基成分复杂？30、何为胚的早熟萌发？31、在植物组织培养中，造成组培
36、材料污染的因素都有哪些？如何采取相应的措施防止或降低污染？32、一般情况下，促使组培苗生根所采取的措施是什么？33、何为褐变？如何克服？34、在组织培养中，玻璃化苗产生的原因和预防措施各是什么?35、简述分离单细胞的方法？并比较其优缺点36、简要说明影响单细胞培养的因素？37、何为细胞悬浮培养？怎样做到悬浮培养细胞的同步化38、植物细胞的培养特性39、一个成功的悬浮细胞培养体系须满足的条件 40、原生质体培养的意义？41、PEG 融合法原理42、原生质体活力测定的方法？2.原生质体的获取方法都有哪些?各有何优缺点?43、用酶法分离原生质体时需用哪些酶？各有何作用?44、如何进行原生质体的净化?
37、45、对原生质体培养都有哪些方法?46、影响原生质体培养的因素是什么?47、简述原生质体的融合过程.49、人工种子的制备程序50、植物培养反应器种类及其特点。 （10分）答：（1）植物培养反应器有机械搅拌式生物反应器、气升式生物反应器、固定化细胞生物反应器。 （3 分）（2）机械搅拌式生物反应器：利用机械搅拌达到混合；具有混合程度高、适应广、反应器各参数易于控制的优点；但剪切力大，易于损坏细胞。 （3 分）（3）气升式生物反应器：利用空气为动力，带动培养液流动达到混合，主要有鼓泡式和气升式；剪切力小、结构简单等优点。 （2 分）（4）固定化细胞生物反应器：把细胞利用载体进行固定好后再进行培养；
38、主要有填充床、流化床、膜反应器三种。 （2 分）51、在超低温保存中，采用哪些措施以尽量避免植物材料的伤害？52、何谓动物组织培养、细胞培养、器官培养？各有何特点？53、动物细胞培养的方式有几种？54、原代细胞培养方法有那些？55、单克隆抗体大量生产有哪几种方法？1156、培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌?57、体细胞杂种的鉴定方法有哪几种？举例说明。58、原生质体在合适的培养条件下再生植株的过程及特点。 （10 分） 。答：原生质体在合适的培养条件下，先形成新的细胞壁，然后再生细胞进行分裂形成细胞团和愈伤组织，最后通过愈伤组织或胚状体获得再生株。 （2 分）（1）细胞壁再生：原生质体培
39、养数小时后开始再生细胞壁，先由质膜合成微纤维，然后转移到质膜表面聚合产生多片层结构，之后在质膜与多片层之间产生小纤维丝，进而形成纤维团，最后形成完整的细胞壁，变成再生细胞。 （3 分）（2）细胞分裂和生长：原生质体培养数天后，胞质增加，细胞器增殖，RNA、蛋白质以及多糖合成增加，即可发生核的有丝分裂及胞质分裂。培养一周后再生细胞进行第二次分裂，之后很快进行第三、四次分裂。两周后形成细胞团，六周后形成愈伤组织。 （3 分）（3）植株再生：原生质体形成愈伤组织以后，将其转到分化培养基中诱导器官形成或胚胎发生，使其生长成完整植株。其关键是选择合适的培养基和激素。 （2 分）设计：1、任选一种植物为例
40、，论述其工厂化生产工艺流程。2、请你设计一个植物细胞工程实验室，都需要哪些仪器设备，说明你设计实验室的各分室及其所需仪器设备的作用。3、安徽舒城大蒜曾经是我国的主要出口品种，但现在产量和品质都下降，怀疑是由病毒所至。请你设计一个病毒的鉴定和脱毒的技术方案。4、某同学在做月季组织培养时，发现他所配置的固体培养基经过高压湿热灭菌后，培养基没有凝固，同时发现三周前接种的月季决大部分腋芽并没有长成丛生芽，部分长成的丛生芽节间很短，请你帮他解决这些问题。5、 你打算如何应用细胞工程技术去解决生产实际问题？运用所学知识设计一研究课题、包括课题名称、研究目的、技术方案、预期结果、进度计划、应用那些细胞培养技术）第 4 页 共 4 页
