1、抗真菌药物研究进展摘要：由于抗生素、激素和免疫抑制剂的大量应用，肿瘤患者的放疗、化疗，艾滋病患者的增加以及人口老年化等原因导致免疫系统功能低下者增多，机会真菌感染也随之增加。另一方面随着临床用抗真菌药物的广泛使用，又导致真菌病原菌的耐药菌株的不断出现，这两方面的因素使其开发新的安全和有效的抗真菌药物成为一个亟待解决的难题。关键词：抗真菌 药物 氨基酸 核酸虽然在发现和发展新的抗真菌药物研究项目上进行的非常活跃，但是，在世界范围内，真菌感染的机会如曲霉菌、念珠菌(白色念珠菌和其他念珠菌种)和新型隐球菌的发病率仍在不断增加。一方面在有效治疗机会真菌感染，特别是由癌症化疗、器官移植、外科手术以及感染
2、HIVAIDS或其他一些免疫功能疾病引起的免疫系统损伤的病人感染上描绘了有效的治疗效果。另一方面值得增加关注力度的是真菌病原菌对目前临床上所用已知种类的抗真菌药物的耐药性问题。这两方面的因素增加了在研发过程中建立能迅速鉴别有开发价值的抗真菌药物的紧迫性，进而研发出更安全和更有效的治疗药物，以及发现新的化学实体以用于目前机会真菌感染和耐药性真菌感染的治疗。下面着重讨论一些精选现有抗真菌药物的调查情况及已知作用机制的抗真菌药物研发的最新进展。1现有抗真菌化合物和技术（1）氨基酸类化合物环状: 氨基酸类化合物具双重作用机制，其一，在集中吸收后能够抑制蛋白质的合成；其二，干扰氨基酸代谢的自身调节。2一
3、氨基环己一3一烯羧酸为吡多醛磷酸盐抑制剂，而cispentacin是天然氨基酸，这2个化合物都具有抗白色念珠菌的活性。PLD一118是新的口服氨基酸，体外抗白色念珠菌的活性IC 50为O13mgmL，目前正在进行期临床试验，在由白色念珠菌引起的致命全身性感染模型或由平滑念珠菌或克鲁斯念珠菌引起的非致命肾脏感染小鼠模型中，口服PLD一118其体内疗效呈正值，PLD118也对由 耐氟康唑菌株 引起的感染有效。(2)核苷类抗真菌药物:核苷类抗真菌药物有灰黄霉素和氟胞嘧啶。1939年Oxford 等从微生物发酵代谢产物中分离得到灰黄霉素，并于1958 年开始应用于临床。灰黄霉素的作用机制可能与其结构和
4、鸟嘌呤相似有关，系经竞争性地干扰真菌细胞的DNA 合成而抑制其生长的。灰黄霉素对所有皮肤真菌，包括小孢子菌、毛发癣菌和表皮癣菌等均有活性，但念珠菌、隐球菌、曲霉、孢子丝菌和组织胞浆菌等对其不敏感，临床上主要用于头癣、叠瓦癣和手、足甲癣等体表真菌感染的治疗。1957年Duschinsky发现了抗肿瘤药物氟胞嘧啶，1968年发现其治疗人感染隐球菌有效，之后即用于临床抗真菌治疗。氟胞嘧啶能通过真菌细胞的渗透酶系统进入细胞内，转化为氟尿嘧啶后替代尿嘧啶进入真菌的DNA中，引起真菌RNA遗传密码错误，最终破坏其蛋白质的合成；氟胞嘧啶也能转化为单磷酸5-氟脱氧尿嘧啶而抑制真菌DNA合成。氟胞嘧啶的抗真菌谱
5、较窄，主要对隐球菌属和念珠菌属有活性，且单独使用易诱导耐药，故临床上多与作用于细胞膜的抗真菌药物联合使用。氟胞嘧啶与两性霉素B合用治疗隐球菌脑膜炎时可减少两性霉素B 的剂量，从而降低两性霉素B的不良反应；也可联合氟康唑用于隐球菌脑膜炎的维持治疗。氟胞嘧啶口服吸收率高、血药浓度高，临床上多使用其口服制剂，但由于单次剂量大、每日服药次数多，易出现骨髓抑制、胃肠道不适等不良反应，部分患者对该药的耐受性较差。(3)棘球白索类棘球白素类药物是真菌的次级代谢产物包含一个带有一条脂类侧链的环状六肽核，该脂类侧链通过非竞争性作用机制抑制-(1，3)-D-葡聚糖的合成。从而导致细胞壁葡聚糖的排空、渗透不稳定以及
6、真菌细胞的溶解而发挥其抗真菌作用。棘球白素作为一种可杀死真菌的药物表现出抗菌谱厂：活性强的特点，是治疗免疫抑制患者和免疫正常患者真菌感染的重要选择药物。其中，卡泊芬净(caspofungin)是该类抗真菌药物中第一个被批准用于临床的品种，对念珠菌性食道炎和侵人性曲霉病疗效显著，并表现出良好的耐受。Micafungin是一种新的经非胃肠道给药的棘球白素类抗真菌药物，已通过在感染HIV的食道念珠菌病患者中进行的公开，非对照研究以及对接受造血干细胞移植患者进行的抗真菌预防性临床对比研究对其疗效进行了证实。给予HIV阳性患者micafungi(50150 mgd，iv)能剂量依赖性地清除食道念珠菌病。
7、70名深部真菌病患者接受micafIlngin治疗(125150mg/d，iv，56 d)，获得的临床总应答率(根据病原菌种类)为55100。阿尼芬净(aniduIafungin)为第3个上市的棘球白素类抗真菌药物，其活性与氟康唑相当，被批准用于念珠菌和曲霉菌感染的治疗：随机给予123名侵入性念珠菌病患者阿尼芬净(iv，qd)，其中100mgd剂量组在治疗结束后的成功治愈率为89。Aminocdin是一种对曲霉菌和念珠菌属具有广谱体外活性的新的棘球白素类药物，对患有播散性念珠菌病的免疫受损小鼠模型进行的研究表明，该品在给药剂量=1.0mg/(kgd)时的疗效与两性霉素B相当，即试验动物的存话率
8、70。(4)用基因组作为工具研发新药通过基因重组和条件表达(GRACETM)得到的功能基因组能够鉴别基础基因产品以及可以用在细胞基础分析系统中来鉴别有抗真菌活性的化合物。而且，还可用蛋白质组学和基因组学所提供的现有工具来帮助迅速对基础真菌生长途经和蛋白质靶位进行鉴别，然后再用现代药物研发程序依次开发出有价值的新药。2.新开发的抗真菌药物(1)氨基酸-氨基酸，2一氟基环己烯羧酸和cis-2-氨基环己烯羧酸(cispentacin)是近期定性的一娄新的抗真菌药物，通过抑制异亮氨酸tRNA的合成酶作用于蛋白质的生物合成。通过对这些先导化合物进行sAR研究发现了(1S，2R)-2-氨基一4-亚甲基-环
9、戊烷羧酸(PLD-118，icofungipen)。体外研究表明，jcofungipen对白色念珠菌具有较高的抗菌活性(IC 50=013ugmL)。始于2003-11的一项b临床研究成功地证明了口服icofungin用于唑类药物耐受性口咽和食道念珠菌病的补救性治疗的功效。对兔子模型静脉接种白色念珠菌芽生分生孢子(C.albicansblastoconidia)24h后给予icofungipen治疗10d，结果表明(25mg/kgd)剂量组(分为2次给药)的白色念珠菌组织清除率较高。(2)sordarinssordarins是新一类抗真菌药物，通过选择性抑制真菌蛋白质合成的延伸过程发挥其抗真菌
10、作用。该类药物与真菌的翻译延伸因子2和大核糖体亚基rpPO相互作用，而这种多重作用机制可能为该类化合物在真菌和哺乳动物之间的高度选择性作出了解释。sordarins在体外表现出抗真菌活性强、抗菌谱广的特性，而且某些化合物还具有较强的体内活性。通过对从真菌Zopfiellamarina中分离得到的天然sordarin类zodimarin进行化学修饰获得了R_13585320)，该化合物对白色念珠菌(包括耐氟康唑的菌株)、光滑念珠菌、高里念珠菌(C.guilliermondii)和新生隐球菌具有较强的抗菌活性。小鼠试验证明，本品的口服吸收性好，而且在50mgkg剂量时对小鼠食道中的白色念珠菌具有较
11、好的清除作用。此外，还发现了一种由Mirinia pestalozzioides产生的对白色念珠菌、光滑念珠菌和酿酒酵母(Saccharomycescerexisiae)具有广谱抗菌作用的新sordarins衍生物，命名为moriniafungin。体内药效试验发现，本品在对白色念珠菌敏感性增强的播散性念珠菌病小鼠模型试验中并没有使真菌菌落数减少。3抗真菌药物的研发趋势（1）组蛋白脱乙酰基酶抑制剂核DNA与不同水平的高次结构蛋白质配合物之间存在相关性。其一级包装是指核小体核心颗粒水平，即一种被DNA包裹着的核心组蛋白结构。根据核DNA被包裹的程度，希望染色质结构对内外刺激的应答高度敏感。目前对
12、组蛋白的多重翻译后修饰(包括乙酰化、磷酸化、甲基化泛素化和ADP-核糖基化等)已被记录在案，特别对其乙酰化的研究最为深入。已经证明，组蛋白的可逆性乙酰化作用相关酶的抑制剂即组蛋白脱乙酰基酶抑制剂(HDAc)可作为抗增殖药物。近来，有研究人员推荐HDAc为抗真菌药物，并且就其对真菌生长产生的直接或间接作用进行了报道。（2）基因组学研究基于基因组学的方法学研究在药物研发中的应用不断增多，其中应用最广的要数自动化合成和分析技术，以及针对已知作用靶点的高通量药物筛选技术。此外，基因组学还可用干确定药物的先前未知的药理学作用。因此，作为一种药物研究的工具，基因组学为研发作用靶位不同于上述药物的新类型抗真
13、菌药物以应对耐药真菌的流行奠定了基础。（3）生物膜真菌性生物膜由那些具有黏附性的真菌群体形成，对抗真菌药物表现出高度耐受性，常见于受污染的医疗器械。这种病原体会产生一种胞外聚合物质，当正在形成的生物膜暴露于液态流体时，该聚合物质的合成便明显增多。最近已有研究证实，在白色念珠菌中，身体接触能导致丝裂原活化的蛋白激酶(Mkclp)的活化，而该酶是信号转导途径的一部jh目前已证实了Mkclp在侵入性菌丝生长和正常生物膜形成过程中所起的作用。已知的抗真菌药物几乎不能渗透入该生物膜中，然而，药物的生物膜渗透性差并非是真菌的主要耐药机制。参考文献:1 顾觉奋.魏清筠真菌耐药机制及新药研究动态期刊论文-药学与临床研究 2010(3)2 卢亮.姚黎栋.林惠敏.俞建生.李继安丝状真菌Zalerion arboricola来源的抗真菌化合物pneumocandin B0的分离纯化期刊论文-中国医药工业杂志 2010(12)3 刘洪涛，张军东真菌耐药性研究进展J中国药学杂志，2003。38(5)：328331
