1、实验室年度总结从暑假到现在，我接触了 3 个比较大的实验：从叶片中提取刺五加体内 RNA，再逆转录成 CDNA；HPLC 法测定刺五加根、茎中苷 B 和苷 E 含量；用 PCR 法为刺五加 CDNA寻找可匹配的引物。从这三个实验中，我学习了很多实验方法，了解了很多实验常识，丰富了我的实验经验。实验思维很重要，简单的知道实验步骤是远远不够的；你要知道你做实验采用的各个步骤的原理，你采用的试验方法还可以应用到哪些领域，就以分子实验为例不分动物、植物还是微生物实验步骤基本相似也就是提取 DNA 或 RNA，做 PCR，跑电泳，做凝胶分析。要尽可能的拓宽自己的思维。你做本实验的目的是什么，它的结果有什
2、么意义，实验是一个循序渐进的过程，了解你现在做的东西在下一步实验中有怎样的应用，多看论文丰富你的知识框架。现在我通过近一年的实验经历来阐述一下本实验室所进行的科研课题的研究进展情况。一、四中刺五加内生真菌（P116-1a ，P116-1b，P312-4 ，P109-4）两两组合人工侵染野生刺五加，注射部位为刺五加茎的韧皮部，因为木质部为死细胞真菌不能从中寄生，韧皮部细胞具有运输植物营养的功能，真菌不仅可以从中寄生获取营养物质也可以顺着营养物质的流动分散到植物体各个组织器官中。介绍一下内生菌，是一类在其部分或全部生活史中存活于健康植物组织内部而不使宿主植物出现明显症状的微生物，在长期的进化过程中
3、，二者形成了互利共生的关系，一方面宿主植物为内生菌为内生菌提供营养物质供其生长，另一方面内生真菌产生的代谢产物可以促进植物的生长发育。其中本实验所涉及的内生真菌产生的某种或某些代谢产物就影响了刺五加的次级代谢产物的含量。而我们要检测的的刺五加苷刺五加苷就是刺五加的次级代谢产物。在我的前两届师哥们，他们通过对株刺五加所特有的内生真菌的回接确定从梅河口刺五加中分离的内生真菌能促进刺五加苷.的而我们就是将这四株菌两两组合回接刺五加天来确定组合菌是否能进一步促进刺五加苷，含量的增加。天后，我们通过 HPLC 法刺五加苷，含量。结果显示组合菌含量的增加量（倍）与单株菌影响（倍）相差不多。导致这种现象的原
4、因.两株菌在刺五加体内形成竞争关系导致刺五加主要产生初级代谢产物而产生的次级代谢产物少.回接时间短刺五加体内苷，含量还没有达到最大含量.对照株冶被侵染导致对照株内苷，含量也增加，数据显示此次检测的整体数据要比前几年的刺五加苷，含量都高很多。.组合菌与单株菌影响相差不多。二、从叶片中提取刺五加 RNA。得知 RNA 酶无处不在而且很不容易失活所以提取前的准备工作是要极为小心的同时工作量也大。RNA 本身也很容易降解，可用时间为 2-3 二月就前几日提取的采摘自 8 月份的刺五加刺五加叶片到 12 月份为时四个月其中大部分RNA 已经降解。当然在期间有三天停电时间对 RNA 降解的影响很大。将提取
5、的 RNA 逆转录成 CDNA 是为下一步寻找与之相匹配的引物来获取一段有效基因序列做模板，如果能成功将这段基因克隆出来再翻译成蛋白质，看其调控怎样的性状，这是我的理解感觉有点模糊不知道克隆的具体意义（现在知道是寻找限速酶）三、在我进实验室的初期，我们做了刺五加外植体培养，经过 3-4 个月的培养我们成功的培养成体细胞胚胎，但到后期。不知道是受到光照、温度、适度、激素或其他因素的影响愈伤组织全部枯萎，早春期外植体培养染菌率很低，越往后染菌率逐步提高，到九、十月份几乎全部染菌。可能的原因是刺五加内酚类化合物含量变化或体外菌类生长活跃在接种过程中灭菌不彻底。以我的眼光看本实验室的目的是要找到内生菌
6、影响刺五加苷 B、E 含量增长的机制，再将此机制应用到外植体培养中，从培养的外植体中提取含量可观的刺五加苷 B、E。进入实验室后，你的时间真的相较身边的同学紧很多，别人下课后可以去上网、打球、逛街.而你要来实验室做实验或者准备实验的工作。谁都爱玩，在玩中寻找乐趣，而我们在实验中寻找乐趣。培养你的实验技术和实验思维，培养技术简单，培养实验思维是一个长期的过程要多看论文，多思考实验。对生物技术来说，参加这个实验小组对我对你们是一种机遇，他让我们在大学期间就有做科研的机会，为我以后的发展有很重要的推动作用，至少咱们的起点比别人高，与我周围的大部分人相比我已走在他们前面。同时，我很珍惜和邢老师相处的每段时间，他真的能驾驭你很多，让你大开眼界。老师是一个从贫困走向中上层社会的人。老师去过日本东京大学留学每当他把他的亲身经验和感受同我们分享或教育我们时，我们真的能收获很多。当然只听不思不想不做是永远无法指引我们前进的。我已意识到大学期间有两三个特别铁的哥们即可而且多接触比你强的人，这将让你进步的很快只有你学到的知识经验才是你自己的，因为在以后面对工作考研，靠的是你的知识而不仅仅是人际关系。况且，大学之后能走到一起的大学同学寥寥无几。现在我们还有无限的精力，积蓄力量有点野心，抓住机遇，迎接挑战，创造属于我们的精彩。
