1、HE 染色法是苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin )的首个字母缩写。苏木精是碱性染料,使细胞核染色质和胞质内的核糖体呈紫蓝色。伊红是酸性染料,使细胞质和细胞外基质中带较强碱基的蛋白质成份着红色。常规 he染色步骤:(1)二甲苯( ) 15min(2) 二甲苯( ) 15 min(3)二甲苯:无水乙醇=1:1 2min(4)100%乙醇() 5min(5)100%乙醇() 5 min(6)80%乙醇 5min(7)蒸馏水 5 min(8)苏木精液染色 5 min(9) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s(10) 1%盐酸乙醇 1-3 s(11) 稍水洗 10-30 s(12)蒸馏水过
2、洗 1-2 s(13) 0.5%伊红液染色 1-3 min(14) 蒸馏水稍洗 1-2 s(15) 80%乙醇稍洗 1-2 s(16) 95%乙醇( ) 2-3 s(17) 95%乙醇( ) 3-5 s(18) 无水乙醇 5-10 min(19) 石炭酸二甲苯 5-10 min(20) 二甲苯() 2 min(21) 二甲苯() 2 min(22) 二甲苯() 2 min(23) 中性树胶封固注:第(11)、(12 )步可省去,(13)步冲水时间需延长至 20-30min。第(21)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。冷冻切片 HE染色步骤:(1)冰冻切片固定 1030 s(2)稍水洗 12 s(3)苏木精液染色(60) 3060 s(4)流水洗去苏木精液 510 s(5)1%盐酸乙醇 13 s(6)稍水洗 12 s(7)促蓝液返蓝 510 s(8)流水冲洗 1530 s(9)0.5%曙红液染色 3060 s(10 )蒸馏水稍洗 12 s(11 ) 80%乙醇 12 s(12 ) 95%乙醇 12 s(13 )无水乙醇 12 s(14 )石炭酸二甲苯 23 s(15 )二甲苯() 23 s(16 )二甲苯() 23 s(17 )中性树胶封固。