1、主动靶向制剂,药剂教研室 张娜,主动靶向制剂的概念与分类,主动靶向制剂：是用修饰的药物载体作为“导弹”，将药物定向地运送到靶区浓集发挥药效的制剂。 主动靶向制剂包括：经过修饰的药物微粒载体及前体药物两大类制剂。 修饰的药物微粒载体包括：修饰脂质体、长循环脂质体、免疫脂质体、修饰微乳、修饰微球、修饰纳米球、免疫纳米球等； 前体药物包括：抗癌药及其它前体药物、脑定位和结肠定位释放的前体药物等。,一、前体药物,前体药物是活性药物经化学修饰衍生而成的、在体外药理活性差、在体内经化学反应或酶反应使活性的母体药物再生而发挥治疗作用的物质。 双重前体药物是指：有的前体药物或者由于不够稳定，或者由于在体内转运
2、受到阻碍，为了提高稳定性和转运能力，可再生制备其衍生物，称为双重前体药物。,前体药物在特定的靶部位再生 为母体药物的基本条件,使前体药物转化的反应物或酶均应仅在靶部位才存在或表现出活性； 前体药物能同药物的受体充分接近； 酶须有足够的量或活性以保证能产生足够量的活性药物； 产生的活性药物应能在靶部位滞留，而少进入循环系统产生毒副作用。,前体药物的分类,抗癌药前体药物 脑部靶向前体药物 结肠靶向前体药物 其他前体药物,1.抗癌药前体药物,为什么抗癌药制成前体药物具有靶向性？ 因为癌细胞比正常细胞含较高浓度磷酸酯酶和酰胺酶，所以某些抗癌药制成磷酸酯或酰胺类前体药物可在癌细胞定位聚集； 若干肿瘤能产
3、生大量的纤维蛋白溶酶原活化剂，可活化血清纤维蛋白溶酶原成为活性纤维蛋白溶酶，故将抗癌药与合成肽连结，成为纤维蛋白溶酶的底物，即可在肿瘤部位使抗癌药再生聚集。,肿瘤产生活化剂,一些抗癌药的前体药物,阿糖胞苷-5，阿糖胞苷酰化物(棕榈酸酯、硬脂酸酯、苯甲酸酯）是阿糖胞苷的前体药物，经腹腔内给药，靶向于白血病。 氟尿嘧啶呋氟尿嘧啶、双氟尿嘧啶均为氟尿嘧啶经静脉注射给药，靶向于白血病。 阿霉素-14-辛酸酯是阿霉素的前体药物，经腹腔内给药，靶向于肺、肝、脾。 氮芥-肽(甘氨酸、苯丙氨酸)、氮芥-胆固醇均为氮芥的前体药物，经腹腔内、口服给药分别靶向于肝癌、乳腺癌、白血病。,2.脑部靶向前体药物,将药物制
4、成脑部靶向前体药物的原因？ 因为只有强脂溶性药物可跨过血脑屏障，而强脂溶性前体药物对其它组织的分配系数也很高，从而引起明显的毒副作用。故必须采取一定措施，使药物仅在脑部发挥作用。,脑部靶向前体药物的例子,口服多巴胺的前体药物L-多巴就是这样。进人脑部纹状体的L多巴经再生可起治疗作用，但进入外围组织的再生后却可引起许多不良反应。要降低毒副作用，可应用抑制剂(芳香氨基脱羧酶，如卡比多巴)，抑制剂使外围组织中的L多巴再生受到抑制，不良反应降低，而卡比多巴不能进入脑部，故不会妨碍L-多巴胺在脑部的再生。,二氢吡啶衍生物作为脑靶向药物载体，在脑部定位释药的基本原理,利用二氢吡啶衍生物作载体，药物与二氢吡
5、啶衍生物化学结合后，能顺利跨过血脑屏障进入脑内，在脑内氧化成为相应的、难于跨过血脑屏障的季胺盐，因而滞留在脑内，经脑脊髓液的酶或化学反应水解，缓慢释放药物而延长药效；而在外周组织形成的季胺盐经胆、肾机制而较快排除体外，全身毒副作用明显降低。 碘解磷定、苯乙胺、多巴胺及性激素等药物都可利用类似的机理制备前体药物。,脑靶向药质体,血脑屏障(BBB)的存在，使很多药物不能进入脑部，限制了脑部疾病的药物治疗。 一种具有BBB透过性特殊功能的药质体(pharmacosomes，PS)作为脑靶向给药系统的设想。 首先通过化学合成的方法在药物分子中引入烷烃链，然后再用物理化学方法将这种交联了烷烃链的药物分子
6、制备成纳米囊(nanocapsules)。,利用烷烃链的引入使分子亲脂性大大提高，以及PS具有的柔性膜结构，可弹性变形“挤入”BBB，从而在静脉给药后达到脑靶向给药的目的。 与普通的纳米粒、脂质体和固体类脂纳米粒(solidlipidnanoparticles，SLN)不同，PS中药物既为活性成分又充当药物载体，因而具有独特优点：避免了一般纳米粒载体材料或其降解产物的毒性；可解决一般纳米粒，SLN和LP载药量低的难题。,PS变形“挤入”BBB示意图,3.结肠靶向前体药物,具有结肠靶向性的前体药物是目前研究的另一趋势。口服结肠定位给药系统可避免口服药物在消化道上段的破坏和释放，而到人体结肠释药发
7、挥局部或全身治疗作用。结肠释药对治疗结肠局部病变(如溃疡性结肠炎、结肠癌)有特殊意义；而将在胃肠道上段易降解的肽类和蛋白质类药物，制成结肠靶向前体药物也有重要意义。,设计结肠靶向制剂的基础,有由特殊菌落产生的酶，可使苷类、酯类、肽类和偶氮键在结肠酶解； 结肠液pH值最高(7.6-7.8或更高)，而胃液pH值最低(空腹时1.5-2，饱腹时2-6)，其余居中(十二指肠6-6.5，小肠7.2-7.4)； 口服药物经过消化道的时间，从胃排空约3h，再经十二指肠、小肠到达结肠，约为12h以上。,4其他前体药物,如阿昔洛韦与月桂酸酰氯和棕榈酰氯分别生成亲脂性前体药物，阿昔洛韦月桂酸酯和阿昔洛韦棕榈酸酯，再
8、分别制成脂质体。体外抗疱疹病毒实验表明，前体药物进入细胞的量增加，从而使抗病毒的能力增强。 又如环孢苷接上二条长疏水链成为环孢苷二棕榈酸前体药物，再制成脂质体，可避免环孢苷被迅速脱氨破坏，而由脂质体缓慢释放水解得到环孢苷，延长了作用时间。,二、修饰的药物微粒载体,药物微粒载体经修饰后可将疏水表面亲水化，就可以减少或避免单核巨噬细胞系统的吞噬作用，有利于靶向于肝、脾以外的缺少单核-巨噬细胞系统的组织，文献中又称为反向靶向。利用抗体修饰，可制成定向于细胞表面抗原的免疫靶向制剂。 修饰的药物微粒载体包括：修饰脂质体、修饰微乳、修饰微球和修饰纳米球等。,Modified microparticles
9、drug delievey systems,The special recognizing and binding of drug carriers with different lectins to different cells,主动靶向制剂与细胞膜受体的结合,WGA与细胞表面EGF受体的结合,（一）修饰脂质体,长循环脂质体：脂质体用PEG修饰，其表面被柔顺而亲水的PEG部分覆盖，增强了脂质体的亲水性，减少了血浆蛋白与脂质体膜的相互作用，降低了被巨噬细胞吞噬的可能，延长了作用时间；如在PEG的末端在结合抗体或配体，则既可保持质脂体的长循环作用，则又可保持抗体或配体对靶点的识别。,（一）修饰
10、脂质体,免疫脂质体：在脂质体表面接上某种抗体，从分子水平识别，提高质脂体的专一靶向性。如在阿昔洛韦脂质体上连接抗细胞表面病毒糖蛋白抗体，得到阿昔洛韦免疫脂质体，可以识别并靶向于眼部疱疹病毒结膜炎的病变部位，病毒感染后2小时给药能特异地与被感染细胞结合，并抑制病毒生长。,（一）修饰脂质体,糖基修饰脂质体：不同的糖基结合到脂质体表面，则根据糖基性质的不同，可使微粒系统在体内产生不同的分布。 通常带有半乳糖残基的微粒，肝靶向较好，主要分布于肝实质细胞； 带有甘露糖残基的微粒主要被K细胞摄取； 而带有氨基甘露糖的衍生物则主要集中分布于肺部。,（二）修饰微乳,如：分别以磷脂和poloxamer338作乳
11、化剂，豆油为油相制备布洛芬辛酯微乳，直径分别为126.0nm和126.9nm，静脉注射相同的剂量，以磷脂作乳化剂者在循环系统中很快消失，并主要分布于肝、脾、肺。而后者由于poloxamer338的亲水性使微乳表面性质改变，不被巨噬细胞识别，在循环系统中存在的时间较长，药物在炎症部位的浓度较前者高7倍。,（二）修饰微乳,又如用PEG修饰的磷酯酰乙醇胺作乳化剂制备的甘油三酯微乳，不仅使消除半衰期延长，而且明显提高了微乳的稳定性。 除此之外，还有修饰的微球、修饰纳米球（粒）等。,修饰的纳米乳,如布洛芬锌微乳以磷脂和poloxamer 388分别作乳化剂，豆油为油相，二者粒径无差，静注相同剂量时，前者
12、在循环系统中很快消失，并主要分布在肝、脾、肺。而后者由于poloxamer 388的亲水性使微乳表面性质改变，在循环系统中维持时间长，药物在炎症部位的浓度较前者高7倍。,(三)药物大分子复合物,药物大分子复合物系指药物与聚合物、抗体、配体以共价键形成的分子复合物，主要用于研究肿瘤靶向的研究。 EPR效应(enhanced permeability and retention effect)：肿瘤血管对大分子物质的渗透性增加，以致大分子物质滞留并蓄积于肿瘤组织的量增加。,Macromolecular conjugates,凝集素药物复合物,Caco-2 binding of F-BSA-WGA
13、conjugates,药物单抗复合物,Kohler和Milstein 于1975年发明了被称之为“魔弹”的单抗技术，并在1984年获得了诺贝尔奖。 单抗是B淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交形成的杂交瘤细胞产生，其重链和轻链所形成的结构域可以识别和结合特异性抗原。 1987年单抗技术被成功应用到诊断试剂当中，但由于HAMA（人抗鼠抗体）反应，没能有效应用在人类疾病的治疗上。,单抗技术的发展,上世纪90年代，随着基因工程技术的迅速发展，治疗性单抗从早期100%的鼠源性单抗（Mab），到嵌合抗体，人源化抗体（Humanized Mab），到近年的全人源性抗体，逐步消除了抗体的免疫源性问题，在保持对抗原高亲和
14、力的同时，改善了抗体的药动力学。 1997年FDA批准第一个治疗淋巴癌的抗CD20的嵌合抗体（Rituxan）上市，并进入56个国家，由IDEC/ Genentech/Roche三大药厂联合生产，至今仍然供不应求。 2001年5月，时代周刊封面文章指出，治疗性单抗是人类与癌症战斗中的一次重大胜利。,Avastin和Erbitux这两个生物医药界关注良久的明星药物终于在最近半个月内先后被FDA批准上市。这无疑是那些晚期结肠癌患者的福音，同时它也昭示着一个单抗药物的春天的来临。Erbitux主要通过抑制癌细胞表面的表皮生长因子受体而起作用，Avastin主要通过抑制刺激新血管形成的血管内皮生长因子
15、而起作用。,至2004年，FDA已批准了20多种治疗性单抗药物，约一半用于治疗癌症（2004年FDA批准了10个治疗用抗体，1个诊断用抗体），在治疗慢性疾病如关节炎方面也取得了显著的临床效果。其中有不少已成为年销售额数亿美元的“重磅炸弹药物”。,全球抗体药物的市场增长十分迅猛，有约200多种单抗在临床实验，占整个临床生物技术药品总数的三分之一多，其中四分之一在临床期或等候批准。预计单抗的全球销售额将从2004年的50多亿美金增至 2010年的150亿美金，平均年增长30%。预计整个抗体市场（包括多抗）2007年即将达到150多亿美金。,单抗药物的主要治疗机制是：,1.直接诱导癌细胞凋亡或抑制癌
16、细胞生长和代谢，或通过补体效应或ADCC（抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用）间接杀死癌细胞。 2.癌症、心血管等疾病的导向治疗：以单抗荷载同位素、毒素蛋白、抗生素等药物制成生物导弹。 3.应用抗体T细胞、抗IL-2R的单抗防治器官移植排斥反应等。 4.以单抗制成避孕、传染病的预防药物。,兔单克隆抗体,1995年，Dr. Katherine Knight在Loyola University of Chicago成功地在在转基因兔中获得骨髓瘤样肿瘤(plasmacytoma)。 其后几年里，Dr. Robert Pytela 和 Mr. Weimin Zhu在UCSF将此技术进行了改进，使之能高产量
17、的生产兔单克隆抗体。Epitomics公司独家拥有兔单克隆抗体技术的专利，并且开发了兔单克隆抗体用于科研、诊断和治疗的许可平台。,兔单克隆抗体,兔单克隆抗体的出现带来了许多好处。 首先，兔抗血清通常含有高亲合力抗体，可以比鼠抗血清识别更多种类的表位。 其次，兔单克隆抗体能够以识别许多在小鼠中不产生免疫的抗原。 第三，由于兔脾脏较大，可以进行更多的融合实验，使得高通量筛选融合细胞成为可能。,单抗制品主要有两类,单抗偶合类药物和单抗诊断试剂与试剂盒。 用于治疗淋巴肿瘤的单抗和首个预防肾移植后急性排斥反应的单抗赛尼哌已由罗氏药业公司推上市场；由Novartis公司研制的抗肾移植急性排斥反应（CD25
18、）单抗basiliximab在瑞士获得许可；H-LR公司的单抗今年获欧盟许可用于治疗复发的或难治性滤胞B细胞非霍奇紧淋巴瘤，是世界上用于这一适应症的第一个单抗产品。,一种能成功控制肝素酶（一种能导致肿瘤细胞转移与扩散的酶）生成的单抗已为以色列人研制成功，它将有助于诊治恶性肿瘤及另外一些与这种酶有关的疾病。Novartis公司治疗哮喘的新的单克隆抗体Xoliar可望在短期内推向市场。,血栓导向溶栓剂,血栓导向溶栓剂的基本原理是利用抗原（DD）和抗体（抗DD单抗）之间的亲和力，将抗血栓特异性成分的单抗与溶栓药物相连接，形成抗体-溶栓剂复合体。 其中的单抗如同导弹一样，可携带溶栓剂特异地与血栓结合，
19、使得血栓部位的溶栓剂高度聚集，从而增强对血栓的溶解作用。 同时也避免了由于纤维蛋白原降解所致的出血，克服了第1代和第2代溶栓药缺乏纤维蛋白特异性和体内半衰期短等弊端。 当前这种导向溶栓剂正作为纤维蛋白溶酶原激活剂的第3代产品而引起人们的重视,血栓导向溶栓剂用于临床治疗血栓,1990年，Collen等人把抗纤维蛋白DD单抗与重组单链尿激酶（rscu-PA）相连接，用此复合物作用于狒狒静脉血栓模型，结果其溶栓效果是rscu-PA的8倍。他们认为这种导向疗法有利于血栓的临床治疗。 1991年，Holvoet等人报道将rscu-PA-33k与MA-15C5的衍生物相连接，这个复合物的溶栓效果是rscu
20、-PA-33k的13倍。 1992年，Dewerchin等人的研究结果表明，单链尿激酶(scu-PA)与MA-15C5复合物其溶解兔颈静脉血栓的效果是scu-PA的11倍。,癌靶向治疗,应用单克隆抗体、基因、脂质体、光动力学、同位素、反义寡核苷酸等特异性地作用于癌细胞细胞 膜表皮长因子受体、 信号传导通路中的特定酶位点、 生长因子受体， 以及癌细胞增殖、分裂、侵袭和转移相关基因的特定靶点， 特异性地作用于肺癌细胞，不作用或很少作用于正常细胞，在杀死癌细胞的同时不杀死或极少杀伤正常细胞，同时又能极大地降低宿主毒性反应的治疗药物或治疗方法。,抗体靶向癌症治疗,抗体治疗癌症的优势是靶向性好、毒付作用
21、小、患者依从性好。其实抗体研究1888年Behring即已开始，因此Behring获第一届诺贝尔奖。 1906年德国药学家Ehrlich提出抗体导向治疗概念，被称为“魔弹”，后来弹头改用生物毒素如白喉毒素等，故又称“生物导弹”或称“免疫毒素”，但由于当时抗体研究技术不成熟，研发与生产都很困难，故生物导弹研究长期没有重大突破。,抗体靶向癌症治疗的发展,自1975年Milstein和Kohler研究成功杂交瘤，诞生第二代抗体（单克隆抗体MAb）。 1984年Morrison成功研究了第三代抗体（基因工程抗体GEAb）。 抗体技术得到飞跃发展，至今全球已报导的抗体有10多万种，其中GEAb有1000
22、多种，人源化抗体200多种。 目前国际上已有500多种抗体用于诊断与治疗，FDA至今已批准17个抗体上市，其中8个是用于肿瘤的靶向治疗。,抗体靶向癌症治疗技术,抗体作为肿瘤的靶向治疗药物，主要得益两项技术： 1. 人鼠嵌合抗体、人源化抗体和人抗体技术的成熟，基本上可以克服鼠源性抗体用于人而产生抗抗体的问题；同时由于采用人的Fc片段，在人体内的半衰期从鼠源性抗体小于20小时到人源化抗体和人抗体的半衰期可达21天；另外在人的Fc片段的改造可进一步提高对肿瘤的杀伤性。,抗体靶向癌症治疗技术,2. 抗体库的建立和筛选以及多价重组抗体制备技术的发展使人们能够直接获得特异性强和亲和力高的单克隆抗体，如SL
23、AM法（Selected Lymphocyte Antibody Method）制备的抗体的亲和力比杂交瘤技术制备的提高1000倍。,抗体靶向癌症治疗市场前景,抗体技术的发展，使其取得巨大经济效益。其中治疗淋巴瘤的抗体Rituxan已治疗了30多万例病人，该药用于一线治疗总有效率为60%-75%，联合化疗则高达80%以上，其中CR可高达40-63%。,表皮生长因子受体作为治疗靶点,1962年，美国学者Cohen首先发现了EGF， 1980年Cohen发现了EGFR，并克隆出EGFR CDNA。 Cohen因在EGF和EGFR方面的工作，于1986年获得诺贝尔医学奖。 在过去的40多年中，已经证
24、明EGFR和EGF信号通路在各种上皮源恶性肿瘤的生长、增殖中起关键作用。,表皮生长因子受体作为治疗靶点,已证明EGFR的激活对于肿瘤有关的血管生成，以及上调血管生长因子的表达是非常重要的。 EGFR不仅对细胞增殖中起关键作用，在肿瘤进展、血管生成、转移扩散、凋亡受抑等方面亦起关键作用。,表皮生长因子受体作为治疗靶点,针对VEGF的抗体Avastin使晚期结肠癌患者的生存期平均延长5个月，仅此一项就使Genentech公司的股值增加200亿美元。 此外Genentech的Rituxan与Herceptin在2002年的销售额分别达11及3.852亿美元，可见它具有光辉前景。 EGFR酪氨酸激酶抑
25、制剂Iressa就是人工合成的一种EGFR靶向药物。,以肺癌血管生成为靶点的肺癌靶向治疗,有关Iressa治疗非小细胞肺癌 （NSCLC）剂量评价的期临床试验，以每天口服Iressa250mg或50mg进行单药治疗，在美国、日本、欧洲共治疗了400例NSCLC。 Iressa的成功使以肺癌血管生成为靶点的肺癌靶向治疗迅速发展。,以肺癌血管生成为靶点的肺癌靶向治疗,与肺癌有关的血管生成抑制剂临床试验较多，有的药物已经进入期试验。有关药物主要有： VEGF的人重组单克隆抗体（rhuMAbVEGF）， VEGFR的抗体； VEGFR的核酶； VEGFR受体酪氨酸激酶抑制剂，如Su5416, Su66
26、88, Thlidomide; 基质金属蛋白酶抑制剂，如Marimastat(BB251)、BMS-275291；Angiostatin、Endostatin; 整合素3抗体如Vitaxin或拮抗剂如EMD121974等。,Endostatin基因治疗,Endostatin是一种可以通过抑制新生血管内皮细胞生长而有效抑制肿瘤生长的蛋白因子有良好临床应用前景由于endosatin生产成本很高，目前还不能大规模生产endosatin，其在体内代谢速度快，本身生物活性又不够稳定，反复注射重组endosatin蛋白存在不便之处。因此基因治疗是解决办法之一。 甘露糖被覆SLN 作为基因传递系统，携带en
27、dostatin基因治疗肺癌，实现抗癌基因的靶向传递与表达。,导向药物,利用抗肿瘤单克隆抗体特异识别肿瘤细胞的特点，将它作为导向载体与各种杀伤分子，如毒素、抗癌药物、放射性核素等，进行化学交联，可以构建成一种对肿瘤细胞具有高度特异的强杀伤活性的杂交分子，称为导向药物。 导向药物有免疫毒素、免疫交联物和放射性免疫交联物 。,免疫交联物,抗肿瘤单克隆抗体与抗癌药物的交联物，又称免疫交联物(immunoconjugate)。 用以制备这类导向药物的抗癌药物主要有阿霉素（adriamycin）、氨甲蝶呤（MTX）等。 它们主要通过阻断DNA合成来杀死靶细胞。抗癌药物杀细胞作用比毒素低得多，增加抗体分子
28、携带的药物分子数，可以增强其杀伤活性，但常会导致抗体活性的下降与丧失。 这类导向药物的优点是分子较小，同时如有非特异杀伤不会有严重后果。但由于杀伤力不高，临床应用前景不被看好。,免疫毒素,抗肿瘤单抗与毒素的交联物又称免疫毒素(immuno- toxin, IT)。用于制备IT的毒素主要有： 植物毒蛋白，这类毒素主要有篦麻毒素（ricin）、相思子毒素（abrin）以及苦瓜毒素（mormordin）、商陆抗病毒蛋白（PAP）、天花粉蛋白等。它们都可以通过灭活核糖体，阻断蛋白质合成，杀伤靶细胞。细胞毒素，主要有白喉外毒素（DT），绿脓杆菌外毒素（PE）等。它们主要通过抑制延长因子-2阻断蛋白质合成
29、，杀死靶细胞。 上述这些毒素都具有极强的毒性，1个分子的篦麻毒素进入细胞细胞就足以杀死该细胞。因此，免疫毒素是目前研究最多的导向药物。,放射性免疫交联物,用于与抗肿瘤单克隆抗体交联的放射性核素主要有125、131、111In等。 这种放射性免疫交联物可用于肿瘤的诊断与治疗。与肿瘤细胞结合的放射性免疫交联物放出的射线，可以用照像机摄像，获得清晰的肿瘤显像。此技术称为放射免疫显像（radioimmunoimaging）,放射性免疫交联物,放射性免疫交联物也可用于肿瘤治疗。 标记了大量高能核素的抗肿瘤单克隆抗体与肿瘤细胞结合后，可以通过辐射损伤杀死靶细胞及其周围的肿瘤细胞。此技术又称为放射免疫治疗（
30、 radiommunotherapy）。 放射性免疫交联物在临床肿瘤的诊断与治疗上有广阔的应用前景，是目前肿瘤导向诊断与治疗的一个十分活跃，并富有成果的领域。,肿瘤疫苗,肿瘤疫苗与传统疫苗在概念上不同，它主要不是用于肿瘤的预防，而是通过瘤苗的接种来刺激机体对肿瘤的免疫应答来治疗肿瘤。 由于人肿瘤相关抗原的免疫原性很弱，不足以有效地刺激机体的免疫应答，因此单纯用自身或同种肿瘤细胞作瘤苗治疗肿瘤的效果不好。 用肿瘤细胞卡介苗等佐剂联合应用，能提高免疫应答效果，在一些晚期肿瘤患者取得了一定的治疗效果。说明用肿瘤疫苗激发机体的抗肿瘤免疫应答是完全可能的。,肿瘤疫苗主要有二类,第一类对肿瘤抗原表位性质的
31、研究，导致了肿瘤分子疫苗的产生。具有肿瘤抗原决定基的肽疫苗和多糖疫苗已在研制，有的已在临床试用。此外，利用某种抗独特型抗体个有抗原内影像的特点，研制肿瘤独特型疫苗的工作也在进行中。,第二类，确定了抗肿瘤免疫应答的主要效应细胞是TC细胞，导致了基因转染的肿瘤细胞疫苗的出现。TC细胞识别肿瘤表面的肽抗原（peptide）与MHC类分子的复合物，必需要有第二信号才能活化。这个第二信号可以由TC细胞表面的CD28分子与粘附分子B7的结合来提供。 B7分子主要存在于活化的B细胞和抗原呈递细胞表面。 在通常性况下，肿瘤细胞合成的胞内抗原经胞内降解、处理后，形成的肿瘤肽抗原与MHC类分子结合后，共表达于瘤细
32、胞表面。其表面的肽抗原-MHC类分子复合物被TC细胞识别，同时其表面B7分子也与TC细胞的CD28分子结合，这样TC细胞就可被活化，从而杀伤带有该肽抗原的肿瘤细胞。,概念与分类,物理化学靶向制剂：采用某些物理和化学方法使靶向制剂在特定部位发挥药效。磁性靶向制剂物理化学靶向制剂包括 栓塞靶向制剂热敏靶向制剂pH敏感的靶向制剂,一、磁性靶向制剂,采用磁性材料与药物制成磁导向制剂，在足够强的体外磁场引导下，通过血管到达并定位于特定靶区的制剂称为磁性靶向制剂。 磁性微球可一步法或两步法制备，一步法是在成球前加入磁性物质，聚合物将磁性物质包裹成球；两步法先制成微球，再将微球磁化。 磁性微球的形态、粒径分
33、布、溶胀能力、吸附性能、体外磁响应、载药稳定性等均有一定要求。 应用磁性微球时还需要有外加磁场，它通常由两个可调节距离的极板组成，每个极板含多个小磁铁。 磁性微球除了用于实体瘤的治疗以外，亦可用于净化骨髓，除去骨髓中的癌细胞，以便将自身骨髓移植用于临床癌症患者的治疗。,(一)磁性微球,1、概述 注射用的磁性微球是由铁磁性物质的超微粒子和骨架(高分子聚合物)物质组成，作为抗肿瘤药物的载体。 通常用的铁磁性物质有磁铁矿羰基铁、正铁酸盐、铁镍合金、铁铝合金、 r-三氧化二铁、氧化钻、 三氧化二锰、 BaFe12O19及RCOMnP等。这些物质都具有较高的磁导率。,用人血清蛋白将柔红素盐酸盐与巯基嘌呤
34、包成带磁性的微球，制成了一种新型的药物载体制剂，称为磁性微球。 试用于治疗胃肠道肿瘤，服用这种制剂后，在体外适当部位用一适当强度磁铁吸引，将磁微球引导到体内特定的靶区，使达到需要的浓度。这种载体的特点：,(1)减少用药剂量 因为将药物随着载体被吸收在靶区周围，使靶很快达到构所需的浓度,在其它部位分布量的相应的减少，因此可降低用药剂量。 (2)口服后药物极大部分在局部作用 相对地减少了药物对人体正常组织的副作用，特别降低对肝、脾、肾等造血和排泄系统的损害。 (3)加速产生药效，提高疗效。,2、制备磁性微球的原料及成品必需符合以下技术要求： (1)载体的骨架物质同在体内能代谢，代谢产物应无毒性，并
35、在一定时间内排出体外。,(2)微球中所含的不能生物降解的铁磁性粒粒子直径一般应在10-20m之间，最大不超过100m 。 供注射用者的粒径应在1-3m以下，其间保持一定相斥力，不聚集成堆，不堵塞血管，在毛细血管内能均匀分布并扩散到靶区，产生疗效。,(3)具有最大的生物相溶性和最小的抗原性。 (4)所含铁磁性物质，在一定强度的体外磁场作用下，在大血管中不停留，而靶区毛细血管中停留。,(5)具有运转足够量药物能力，而且有一定的机械强度和生物降解速度。 释药速度适宜，保证在靶区释放出大量药物。,3、制备方法,(1) 加热固化法 取人血清蛋白250mg，牛血清蛋白0.02ml，盐酸阿霉素3mg和超微铁
36、矿粒子(10-20m)72mg，加不制成混悬液，将此混悬液加至60ml棉籽油中，在4用超声波(100W)匀化1min，然后将此匀化液逐渐滴加至100ml预热至110-165搅拌(160rpm)的棉籽油中，加热10min后，冷至25，并不断搅拌，加60ml无水乙醚，离心(2000g)15min后，倾出清液。 这样反复洗4次后在4暗处空气干燥24h，冻干于4贮存。,(2) 加交联剂固化法,将上法经超声波处理的匀化液在搅拌下(1600rpm)滴入100ml棉籽油中，搅拌10min后上法用乙醚洗除棉籽油，然后得新混悬在乙醚中(每40微球加乙醚100ml)，加0.2M的2，3-丁二酮或01M甲醛的乙醚溶
37、液为交联剂，混悬液迅速搅拌15或60min，立即加100ml乙醚洗除过量的交联剂，离心(2000g)10min，倾去上清液，这样共洗4次，冻 干，于4贮存。,国内报道5-Fu磁性微球载体的设计，口服后在体外应用磁场，使其吸着在食道的癌变区，释放出5-Fu被癌组织吸收，用于治疗食管癌。这样可以用较小的剂量在靶区产生的较高的浓度，而身体的其它正常组织中药物浓度就相应降低，因此药物的毒副作用降低，并加速加强产生药效此外，强磁场也具有抑癌作用。,5-Fu磁场微球的制法,将含1%司盘80的液体在预热至60，同时将5-Fu溶于碱性水溶液，加入明胶(B型，等电点PH4.7-5)，还原铁粉，加热至60制成明胶
38、液，保持在60，在搅拌下，将此明胶液缓缓加入液体石蜡中，继续搅拌5分钟乳化，抽滤将微球分离，用石油醚洗去微球表面的液体石蜡，干燥，以甲醛蒸气固化即得，收率88%。,(二)磁性纳米囊 如放线菌素D磁性纳米囊可提高药物在肾内的分布。 与普通纳米囊相比，含有超细磁流体的纳米囊并不增加毒性。,免疫磁性微球靶向原理示意图,二、栓塞靶向制剂,栓塞靶向制剂:动脉栓塞是通过插入动脉的导管将栓塞物输送到靶组织或靶器官的医疗技术。 栓塞的目的是阻断对靶区的血液供应和营养，使靶区的肿瘤细胞缺血坏死，起到栓塞和靶向化疗的双重作用。 如动脉栓塞米托蒽醌乙基纤维素微球、顺铂壳聚糖栓塞微球。,三、热敏靶向制剂,热敏靶向制剂
39、:使用对温度敏感的载体制成热敏感制剂，在热疗机的局部作用下，使其在靶区释药。 利用相转变温度不同可制成热敏脂质体。将不同比例类脂质的二棕榈酸磷脂(DP-PC)和二硬脂酸磷脂(DSK)混合，可制得不同相变温度的脂质体。在相转变温度时，脂质体的类脂质双分子层从胶态过渡到液晶态，增加脂质体膜的通透性，此时包封的药物释放速率亦增大，而偏离相转变温度时则释放减慢。 在热敏脂质体上交联抗体，可得热敏免疫脂质体。这种脂质体具有物理化学靶向与主动靶向的双重作用，如阿糖胞苷热敏免疫脂质体等。,作用原理,脂质体中磷脂,靶区升高温度,磷脂由胶态转变成液晶态,增加了磷脂膜通透性,增加了药物的释放,四、pH敏感的靶向制
40、剂,pH敏感的靶向制剂:用对pH敏感的载体制备pH敏感制剂，使其在特定的pH靶区释药。 pH敏感脂质体：利用肿瘤间质液的pH值比周围正常组织显著低的特点设计。(常用载体材料为DPPC) pH敏感的口服结肠定位给药系统：利用结肠pH值较高的特点设计。(常用载体材料为Eudragit L和Eudragit S，均不溶于水和消化液，但在pH较高的结肠液中溶解）。,肿瘤间质液pH值,作用原理,正常组织间质液pH值,进攻示意图,pH敏感 靶向制剂,靶部位,非靶部位,进攻,产生药效,释放药物,思考题,1 动靶向和被动靶向的区别 2 主动靶向制剂的分类 3 前体药物如何实现主动靶向 4 被动靶向制剂的分类 5. 常用的被动靶向手段及其原理,谢谢,
