1、答辩人：宋磊 指导老师：韩秀萍 2010.5.22,黄秋葵中硒元素含量的测定,主讲内容,一、前言 二、实验部分 三、结果与讨论 四、总结,一、前 言,黄秋葵属一年生草本植物，果实中含有丰富的维生素、蛋白质、微量元素，营养保健，药食两用，有“绿色人参”之誉。叶片可以作为饲料着色剂和蛋白饲料；茎秆可以作为能量饲料。 硒(Se)是人体及动物体必需的微量元素之一，具有重要的生物学功能。 目前，对于硒元素的含量的检测方法有较丰富完善的研究，其中荧光分光光度法因其快速准确、重现性好、灵敏度高，已广泛应用于植物和矿物中痕量硒的分析测定。本文通过此方法测定黄秋葵叶粉中的硒含量。,二、实验部分,1 实验原理 2
2、 实验步骤,1. 实验原理,试样经混酸消化,硒化合物转化为无机硒Se4+,在酸性条件下Se4+与2, 3-二氨基萘（DAN）生成荧光物质4,5-苯并苤硒脑，再用环己烷萃取。在激发波长378nm,发射波长518nm条件下测定其荧光强度，生成物的荧光强度与Se4+浓度在一定范围内成正比，从而计算试样的硒含量。主反应式：,2. 实验流程,取样1g 混酸消化,加掩蔽剂 调节pH,加DAN 加热反应,环己烷 萃取,测定样品硒含量,绘制标准曲线,测荧光值,配制系列 硒标准溶液,三、 结果与讨论,1. 激发和发射光谱 2. 硒标准曲线的绘制 3. 黄秋葵叶粉中硒含量的测定 4. 精密度和回收率实验 5. 共
3、存离子的干扰和消除,1. 激发和发射光谱,选择发射波长为520nm，激发波长范围为300600nm范围内对环己烷萃取液进行扫描,得到激发光谱曲线，由图可知，激发波长应为378 nm。,选择激发波长为378nm，发射波长在300700nm范围内对环己烷萃取液进行扫描，得到发射光谱曲线,由图3可知,发射波长应为518nm。,518nm,520nm,378nm,2. 硒标准曲线,用0.02g/mL硒标准使用液配制系列标准溶液，经荧光反应，环己烷萃取后，萃取液在激发波长378 nm、发射波长518nm处进行测定,由测得的荧光值与Se浓度绘制标准曲线。通过硒标准曲线得出回归方程。回归方程：IF(荧光值)
4、=51.987C-0.380，相关系数R=0.9997。,测定11次空白溶液的荧光值, 标准偏差为0.0584，以其3倍标准偏差与回归方程斜率的比值计算检出限。,3. 黄秋葵叶粉中硒含量的测定,测定样品的荧光值，在标准曲线上查得相应的浓度c ，按下式计算得样品的硒含量X，以质量分数计，数值以毫克每千克（mg/kg）表示。,4. 精密度和回收率实验,4.1 精密度实验对同一样品进行4次平行实验,用相对标准偏差来描述精密度。,从上表中的数据可以看出，精密度（S）和变异系数(CV)值都很小，说明测定的可信度高。,4. 精密度和回收率实验,4.2 回收率试验为了验证本方法的准确度，用标准加入法测定回收
5、率，结果如下表所示。由表可见,该方法的平均回收率为92.9%。,5. 共存离子的干扰和消除,重金属离子及大量氧化物对硒测定有干扰，可用EDTA-盐酸羟胺混合溶液消除。对于黄秋葵主要干扰离子为Cu2+、Hg2+、Zn2+、Fe3+、Bi3+、Cd2+等离子。测定1.0g硒，加入3.0 ml EDTA-盐酸羟胺混合溶液，Zn2+、Fe3+、Bi3+、Cd2+在300倍时不干扰测定，Cu2+、Hg2+对硒的测定有一定干扰，Cu2+的允许量为200倍，Hg2+的允许量为150倍。为消除NO3-等氧化物的干扰, 增加荧光测量的稳定性, 使生成的荧光物的荧光强度在较长时间内不发生变化, 可采用盐酸羟胺作为消除干扰剂。,4. 结 论,4.1 测定条件的选择：选择激发波长为378nm，发射波长为518nm，用EDTA-盐酸羟胺溶液消除共存离子的干扰，得到了满意的结果。 4.2 标准曲线：实验所绘制标准曲线的相关系数为0.9997，非常接近1，呈现良好的线性关系。 4.3 样品测定：不同品种的黄秋葵叶粉中硒含量各不相同，但相差不大，平均硒含量在0.5g/g左右。 4.4 精密度和回收试验：本方法的变异系数为3.54%，回收率92.9%，检出限为3.4ng/mL。表明该方法可信度高、准确度好，能满足硒微量元素测定的要求。,谢 谢！,非常感谢韩老师的指导！,
