1、植物氮、磷、钾全量分析植物中氮、磷、钾测定包括待测液制备和氮、磷、钾定量 2 大步骤。1 植物全氮、磷、钾含量测定待测液制备（ H2SO4+H2O2 消煮法）1.1 适用范围： 本方法不包括硝态氮的植物全氮测定，适合于含硝态氮低的植物样品的测定。1.2 方法提要植物中的氮、磷大多数以有机态存在，钾以离子态存在。样品经浓 H2SO4 和氧化剂H2O2 消煮，有机物被氧化分解，有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐，钾也全部释出。消煮液经定容后，可用于氮、磷、钾等元素的定量。采用 H2O2 为加速消煮的氧化剂，不仅操作手续简单快速，对氮、磷、钾的定量没有于扰，而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度。
2、但要注意遵照操作规程的要求操作，防止有机氮被氧化成 N2 气或氮的氧化物而损失。1.3 试剂1.3.1 硫酸(化学钝，比重 1.84)； +1.3.2 30H 2O2 (分析纯)。1.4 主要仪器设备1.4.1 消煮炉1.5 操作步骤称取植物样品(0.5mm)03 g 05g（称准至 00002g）装入 100mL 开氏瓶或消煮管的底部，加浓 H2SO4 5mL，摇匀，放置过夜。第二天在电炉或消煮炉上先小火加热，待 H2SO4 发白烟后再升高温度，当溶液呈均匀的棕黑色时取下。稍冷后加 10 滴 H2O2，再加热至微沸，消煮约 710min，稍冷后重复加H2O2，再消煮。如此重复数次，每次添加的
3、 H2O2 应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热约 10min，除去剩余的 H2O2。取下冷却。用水将消煮液无损地转移入 100mL 容量瓶中，冷却至室温后定容(V1) 。用无磷钾的干滤纸过滤，或放置澄清后吸取清液测定氮、磷、钾。每批消煮的同时，进行空白试验，以校正试剂和方法的误差。1.注意事项1.6.1 所用的 H2O2 应不含氮和磷。H 2O2 在保存中可能自动分解，加热和光照能促使其分解，故应保存于阴凉处。在 H2O2 中加入少量 H2SO4 酸化，可防止 H2O2 分解。1.6.2 称样量决定于 NPK 含量，健状茎叶称 05g，种子 03g，老熟茎叫可称 1g，若新鲜茎叶样，
4、可按干样的 5 倍称样。称样量大时，可适当增加浓 H2SO4 用量。1.6.3 加 H2O2 时应直接滴入瓶底液中，如滴在瓶颈内壁上，将不起氧化作用，若遗留下来还会影响磷的显色。2 植物全氮测定半微量蒸馏法2.1 适用范围：适合于各种植物样品消煮液中氮的定量。2.2 方法原理：植物样品经开氏消煮、定容后，吸取部分消煮液碱化，使铵盐转变成氨，经蒸馏，用 H3BO3 吸收，硼酸中吸收的氨可直接用标准酸滴定，以甲基红溴甲酚绿混合指示剂指示终点。2.3 试剂2.3.1 NaOH 溶液：400gL。2.3.2 H3BO3指示剂溶液：20g L 。2.3.3 酸标准溶液(c(HCI 或 12 H 2SO4
5、)：0.01molL 。标定见 HG/T 2843.2.4 仪器设备2.4.1 蒸馏装置或半自动蒸馏仪。2.5 蒸馏: 检查蒸馏装置是否漏气和管道是否洁净后，打开蒸馏仪开关，空蒸 30 分钟。准确吸取定容后的消煮液 5.0010.00mL(V2，含 NH4-N 约 1mg)，注入半微量蒸馏器的消化管内。另取 150mL 三角瓶，内加 5mL 2H 3BO3，指示剂溶液，放在冷凝管下端，管口置于 H3BO3 液面以上 34cm 处，然后向蒸馏器内慢慢加入约 3mL 400gLNaOH 溶液，通入蒸气蒸馏(注意开放冷凝水，勿使馏出液的温度超过 40C)。待馏出液体积约达 5060mL时，停止蒸馏，
6、用少量已调节至 P4.5 的水冲洗冷凝管末端。用酸标准溶液滴定馏出液至由蓝绿色突变为紫红色(终点的颜色应和空白测定的滴定终点相同) 。与此同时进行空白测定的蒸馏、滴定，以校正试剂和滴定误差。2.6 结果计算全(N)，=c (HCl)X (V V0)X0.014XDXl00m；式中：c (HCl)酸标准溶液的浓度，molL；V滴定试样所用的酸标准液体积， mL；V 0滴定空白所用的酸标准液， mL：0.014N 的摩尔质量， kgmol ；m称样量，g：D分取倍数(即消煮液定容体积 V1吸取测定的体积 V2)。3 植物全磷的测定（钒钼黄吸光光度法）3.1 适用范围：适合于含磷量较高的植物样品的测
7、定(如籽粒样品) 。3.2 方法原理： 植物样品经浓 H2SO4 消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生成黄色的三元杂多酸，其吸光度与磷浓度成正比，可在波长400490nm 处用吸光光度法测定。磷浓度较高时选用较长的波长，较低时选用较短波长。此法的优点是操作简便，可在室温下显色，黄色稳定。在 HNO3、HCIO 4，和 H2SO4 等介质中都适用，对酸度和显色剂浓度的要求也不十分严格，干扰物少。在可见光范围内灵敏度较低，适测范围广(约为 120mgL P)，故广泛应用于含磷较高而且变幅较大的植物和 肥料样品中磷的测定。3.3 试剂3.3.1 钒钼酸铵溶液：25.0g
8、 钼酸铵(NH 4)6Mo7O2.4H2O，分析纯)溶于 400mL 水中，必要时可适当加热，但温度不得超过 60。另将 1.25g 偏钒酸铵(NH 4VO3，分析纯)溶于 300mL沸水中，冷却后加入 250mL 浓 HNO3（ （分析纯） 。将钼酸铵溶液缓缓注入钒酸铵溶液中，不断搅匀，最后加水稀释至 1L，贮于棕色瓶中。3.3.2 NaOH 溶液(c=6 molL)：24g NaOH 溶于水，稀释至 100mL。3.3.3 二硝基酚指示剂(p=2 g/L)：0.2 g 2,6-二硝基酚或 2.4-二硝基酚溶于 100 mL 水中。3.3.4 磷标准溶液(P=50mgL)：0.2195g (
9、干燥的 KH2PO4(分析纯)溶于水，加入 5mL 浓HNO3，于 1 L 容量瓶中定容。3.4 主要仪器设备3.4.1 分光光度计。3.5 分析步骤准确吸取定容、过滤或澄清后的消煮液 520mL(V2：，含 P 0.050,75mg)放入 50 mL 容量瓶中，加 2 滴二硝基酚指示剂，滴加 6molL NaOH 中和至刚呈黄色，加入 10.00 mL 钒钼酸铵试剂，用水定容 (V3)。15min 后，用 1cm 光径的比色槽在波长 440nm 处进行测定，以空白溶液(空白试验消煮液按上述步骤显色 )，调节仪器零点。校准曲线或直线回归方程：准确吸取 50mgL P 标准液 0，1，2.5，7
10、.5， 10，15mL 分别放入 50mL 容量瓶中，按上述步骤显色，即得 0，1.0，2.5，5.0，7.5，10，15mgL P 的标准系列溶液，与待测液一起进行测定，读取吸光度。然后绘制校准曲线或求直线回归方程。.结果计算全 () ，= P X V X （V 3V 2）)X10 -4m ；式中： P从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质量浓度，mgL：V消煮液定容体积， mL；V 2吸取测定的消煮液体积， mL； ，V 3显色液体积， mL：m称样量，：10 -4将 mgL 浓度单位换算为百分含量的换算因数。3.7 注意事项3.7.1 显色液中 P15mg L 时，测定波长用 420n
11、m；520mgL，用 490nm。待测液中 Fe+ 浓度高应选用 450nm，以清除 Fe+ 干扰。校准曲线也应用同样波长测定绘制。3.7.2 一般室温下，温度对显色影响不大，但室温太低(如15) 时，需显色 30min。稳定时间可达 24 h。3.7.3 如试液为 HCI、HClO 4 介质，显色剂应用 HCl 配制；试液为 H2SO4 介质，显色剂也用H2SO4 配制。显色液酸的适宜浓度范围为 0.21.6molL，最好是 0.51.0 molL。酸度高显色慢且不完全，甚至不显色：低于 0.2moIL 易产生沉淀物，干扰测定。钼酸盐在显色液中的终浓度适宜范围为 1.6X10-310 -2m
12、olL，钒酸盐为 8X10-5 一 2.2X10-3molL。3.7.4 此法干扰离子少。主要干扰离子是铁，当显色液中 Fe3+浓度超过 0.1时，它的黄色有干扰，可用扣除空白消除。 植物全磷的测定（钼锑抗吸光光度法）4.1 适用范围：适合于含磷量较低的植物样品的测定(如茎秆样品等) 。4.2 方法提要：植物样品经浓 H2SO4 消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。在一定酸度下，待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸，后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络台物，可用吸光光度法测定。4.3 试剂4.3.1 6 molL NaOH 溶液4.3.2 0.2 二硝基酚指示剂4.3.3 2
13、 molL (12 H 2SO4)硫酸溶液： 5.6mL 浓 H2SO4，加水至 100mL。4.3.4 钼锑贮存液：浓 H2SO4(分析纯)126mL 缓慢地注入约 400mL 水中，搅拌，冷却。10.0g 鉬酸铵(分析纯)溶解于约 60的 300mL 水中，冷却。然后将 H2SO4 溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中，再加入 100mL 0.5酒石酸锑钾（KSbOC 4O612H 2O,分析纯）溶液，最后用水稀释至 1L，避光贮存。此贮存液含钼酸铵为 l，酸浓度为 c(12 H2SO4)=4.5molL 。4.3.5 钼锑抗显色剂：1.50g 抗坏血酸(C 6H8O6，左旋，旋光度 +21 一+22
14、，分析纯) 溶于100mL 钼锑贮存液中。此液须随配随用，有效期一天，冰箱中存放，可用 35 天。4.3.6 磷标准工作液(P)=5mgL：吸取 100rngL P 标准贮存液稀释 20 倍，即为 5mgL P标准工作溶液，此溶液不宜久存。.主要仪器设备： 同上。.分析步骤吸取定容过滤或澄清后的消煮液 2.005.00mL(V2，含 P 530ug)于 50 mL 容量瓶中，用水稀释至约 30mL，加 l-2 滴二硝基酚指示剂，滴加 6molL NaOH 溶液中和至刚呈黄色，再加入 1 滴 2molL(12 H2SO4)溶液，使溶液的黄色刚刚褪去，然后加入钼锑抗显色剂 5.00mL，摇匀，用水
15、定容 (V3)。在室温高于 15的条件下放置 30min 后，用 lcm 光径比色槽在波长 700nm 处测定吸光度，以空白溶液为参比调节仪器零点。校准曲线或直线回归方程：准确吸取 (P) =5 mg/L 标准工作溶液 0，1， 2，4，6，8 mL，分别放入 50 mL容量瓶中，加水至 30 mL，同上步骤显色并定容，即得 0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8mgL P 标准系列溶液，与待测液同时测定，读取吸光度。然后绘制校准曲线或直线回归方程。.结果计算：同上。.注意事项：根据分光光度计性能，可选用 650-890nm 波长处测定，880890nm 处灵敏度高。5 植物全钾的测定一火
16、焰光度法5.1 适用范围：适合于植物样品消煮液中钾含量的测定。5.2 方法提要： 植物样品经消煮或浸提，并经稀释后，待测液中的 K 可用火焰光度法测定。5.3 试剂5.3.1 K 标准溶液(K)=100mgL)：0.1907g KCI(分析纯，在 105110C 干燥 2 h)溶于水，于 1 L 容量瓶中定容，存于塑料瓶中。 5.4 主要仪器设备54.1 火焰光度计。6 分析步骤：吸取定容后的消煮液 5.0010.00mL(V 2：)放入 50mL 容量瓶中，用水定容(V 3)。直接在火焰光度计上测定，读取检流计读数。校准曲线或直线回归方程：准确吸取 100mgL K 标准溶液 0，1，2.5
17、，5，10 ，20mL ，分别放入 50mL 容量瓶中，加入定容后的空白消煮液 5 或 10mL(使标准溶液中的离子成分和待测液相近)，加水定容。即得0，2，5，10，20，40mg/L K 的标准系列溶液。以浓度最高的标准溶液定火焰光度计检流计的满度( 一般只定到 90)，然后从稀到浓依次进行测定，记录检流计读数。以检计读数为纵坐标，钾浓度为横坐标绘制校准曲线或求直线回归方程。7 结果计算全 (K)， = K X V X （V 3V 2）)Xl0 -4m式中： K从校准曲线或回归方程求得的测读液中 K 的浓度，mg L；V消煮液定容体积， mL；V2吸取体积， mLV3测读液定容体积， mL：m干样质量， g10-4将 mgL 浓度单位换算为百分含量的换算因数。8 注意事项8.1 酸度，一般0.25mol/L,水定容。8.2 标准液与待测液组成基本相同，加空白消煮液 5mL 控制。
