1、一、(一)检索课题：一种侵染秋海棠的 PVY 病毒的鉴定（二）数据库：中国学位论文（1）（三）检索途径： 关键词（四）检索提问式：马铃薯 Y 病毒 and 检测 and 鉴定（五）检索结果：1、作者：郑世玲题目：贵州 3 种马铃薯病毒的 DAS-ELISA 检测及分子鉴定期刊名：中国学术期刊网络出版总库机构：贵州 3 种马铃薯病毒的 DAS-ELISA 检测及分子鉴定语言：中文摘要：马铃薯是一种重要的全球性的经济作物，马铃薯病毒病是影响马铃薯生产的重要因子，马铃薯病毒是引起马铃薯退化的根本原因。马铃薯 X 病毒(Potato virus X，PVX)、马铃薯 Y 病毒(Potato virus
2、 Y，PVY)、马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus，PLRV)是严重危害我国马铃薯产量的三种主要病毒。本研究从贵州省六县一市的马铃薯种植区，对不同马铃薯品种的 3 种马铃薯病毒的发生症状进行了调查，并对采集的 202 份相关样品进行了双抗体夹心酶联免疫吸附测定(Double Antibody Sandwich Enzyme Linked Immunosorbent Assay，DAS-ELISA)的检测技术的研究，从而建立了一套完整的酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA)检测 PVX、PVY 和 PLRV 程
3、序。根据PVX、PVY 和 PLRV 的外壳蛋白基因序列，分别设计合成了三对特异性引物。分别从 DAS-ELISA 检测的感染马铃薯 X 病毒、马铃薯 Y 病毒和马铃薯卷叶病毒为阳性的马铃薯叶片为试材，对马铃薯 Y 病毒采取反转录聚合酶链式反应(Reverse Transcription-Polymerase chain reaction，RT-PCR)和免疫捕获反转录聚合酶链式反应(Immunocapture RT-PCR，IC-RT-PCR)方法对 PVY 进行了分子鉴定，测序得到两条 PVY 外壳蛋白(coat protein，CP)基因序列，长度为 804 bp。通过和其它己知 PVY
4、 分离物 CP 基因序列的同源性比较和氨基酸序列差异性分析，并建立了 PVY CP 核苷酸序列的系统发育树及其类型的分析，序列已经登录了 NCBI(GenBank 登录号分别为 EF063710 与 EF063712)。用 IC-RT-PCR 方法对 PVX、PLRV进行了分子鉴定，测序得到两条 PVX CP 与 PLRV CP 基因序列，长度分别为 714 bp 和627bp，通过和其它已知分离物 CP 基因序列的同源性比较和氨基酸序列差异性分析，并建立了 PVX CP、PLRV CP 核苷酸序列的系统发育树及其类型的分析，序列己经登录了National Center for Biotech
5、nology Information(NCBI)，获得 GenBank 登录号分别为EF063709 与 EF063711。本文报道了三种简捷、快速、灵敏、可靠的马铃薯病毒的检测技术：ELISA、RT-PCR 和 IC-RT-PCR 检测技术。ELISA 可在不需提纯病毒 RNA 的情况下实现对病毒的检测，较 RT-PCR 检测技术快速、简捷，更适合于大量样品的检测。IC-RT-PCR 检测技术与 RT-PCR 检测技术相比省去了病毒 RNA 的提取这一烦琐步骤，操作更简单，灵敏度与 RT-PCR 基本相同，而 RT-PCR 与 IC-RT-PCR 检测技术较 ELISA 检测技术特异性更强。
6、2、作者：李志勇题目：辣椒轻斑驳病毒和黄瓜花叶病毒分子鉴定与检测技术期刊名：中国学术期刊网络出版总库机构：河北农业大学， 植物病理学， 2005， 硕士语言：中文摘要：甜(辣)椒广泛栽培于世界各地,是重要的蔬菜之一。通常由病毒病造成甜椒减产达25%50%,严重时造成毁种绝收。近年来,北京、保定和宁夏部分地区甜椒病毒病发生非常严重,已严重影响当地甜椒的生产,为此对上述 3 地部分地区甜椒毒源进行鉴定,主要结果如下: 一、通过血清学检测 6 种病毒(烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、辣椒轻斑驳病毒、苜蓿花叶病毒和非洲木薯花叶病毒),检测结果表明宁夏银川、惠农和平罗甜椒毒源主要为黄瓜花叶病毒,保定郊区甜椒
7、毒源主要为辣椒轻斑驳病毒,北京郊区甜椒毒源主要为辣椒轻斑驳病毒和黄瓜花叶病毒。 二、对辣椒轻斑驳病毒寄主范围测定,发现辣椒轻斑驳病毒局部侵染蔓陀罗、苋色黎、昆诺阿黎、普通烟、心叶烟、枯斑三生烟,系统侵染辣椒、矮牵牛、千日红,不侵染黄瓜、番茄、蕃杏、甜瓜、苦瓜、生菜、白菜、甘蓝、蚕豆。对 16 个甜椒品种抗病鉴定,发现供试品种均感病。 三、以 PEG6000 沉淀病毒和差速离心提纯辣椒轻斑驳病毒,提纯病毒负染后电镜观察到大量杆状病毒粒体。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得,辣椒轻斑驳病毒蛋白亚基分子量为 20KDa。精提纯病毒五次免疫兔子,DAS-ELISA 测得所制备辣椒轻斑驳病毒多克隆抗体效价为
8、 32768。 四、用 Trizol 提取病叶总 RNA,反转录为 cDNA。通过 3 对特异性引物,分别扩增出病毒外壳蛋白基因、病毒移动蛋白基因和与病毒复制相关蛋白基因。PCR 产物经纯化测序分析表明北京、保定两地辣椒轻斑驳病毒分离物核甘酸序列同源性 99.7%,它们与日本 AB000709 最为接近。 五、血清学和黄瓜花叶病毒外壳蛋白核甘酸序列分析表明,宁夏和北京分离物都为亚组成员,北京分离物与 IB 亚组的美国分离物(AF127977)同源性最高,宁夏分离物与 IB 亚组的美国分离物(AJ271416)同源性最高。六、血清学结果表明,甜椒种子带毒率很高,但未发现辣椒轻斑驳病毒和黄瓜花叶病
9、毒传毒。 本试验从生物学、血清学、病毒粒子形态、分子生物学 4 个方面,鉴定了在保定和北京发生日益严重的甜椒病毒为辣椒轻斑驳病毒。制备了高效价的抗血清,为今后用血清学检测辣椒轻斑驳病毒奠定基础。辣椒轻斑驳病毒和黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因序列的测定,为今后抗病毒转基因工程奠定基础。3、作者：杜国英题目：烟草主要病毒的分子鉴定与检测技术期刊名：中国学术期刊网络出版总库机构：中国农业科学院， 植物病理学， 2003， 硕士语言：中文摘要：依据烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus，TMV)外壳蛋白(CP)基因序列(480nt)片段设计合成了一对引物，以病毒粗提 RNA 为模板，通过反转
10、录聚合链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR)扩增得到长度为 442bp 的目的片段。将目的片段连接 pGET-easy 质粒，转入大肠杆菌(E.coli)并进行测序。序列测定结果与中国云南 TMV 分离物 AJ239099 的同段 CP 基因序列比较，发现核苷酸同源性可达 99.8，证明成功地得到了 TMV 该段 CP 基因。依据 TMVCP 基因对其不同分离物间分子差异进行分析。结果表明，TMV CP 核苷酸序存在很大差异，同源性在 73.1-100之间。根据 TMV CP 基因序列同源性建立了 TMV 系统进
11、化树并对 TMV 不同分离物进行了类型分析。 根据黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus，CMV)外壳蛋白基因序列(657nt)及其后一段非编码区设计合成了一对特异引物，以带毒烟草总 RNA 为模板，通过 RT-PCR 扩增得到了长度为 776bp 的目的片段。将目的片段连接 pGET-easy 质粒，转入大肠杆菌后进行测序。序列测定结果与美国AF523342 的核苷酸同源性为 98.6，证明成功地得到了 CMV CP 基因。依据 CMV CP 基因核苷酸序列同源性建立 CMV 系统进化树，结果表明 CMV 可明显分为两大亚组，对其亚组不同分离物进一步进行分子差异分析，发现其
12、间差异较大，同源性在 90.398.6之间。 根据马铃薯 Y 病毒(Potato virus Y, PVY)CP 基因序列(804nt)设计合成了其特异引物，以带毒烟草总 RNA 为模板，RT-PCR 法扩增得到了长度为 808bp 的目的片段。将目的片段连接pGET-easy 质粒，转入大肠杆菌并进行测序。序列测定结果与其他 PVYCP 基因序列比较，北京、青州和沈阳 PVY 分离物与类型其他分离物的核苷酸序列同源性分别为 93.4-96.6、92.0-94.0、91.9-94.0。依据 PVY 不同分离物的 CP 基因核苷酸序列同源性建立了 PVY 系统进化树。 利用病毒的特异性引物，对
13、TMV、CMV、PVY 进行了一步 RTPCR 检测，并以获得的各自的重组质粒为模板，PCR 法合成了地高辛标记的核酸探针，建立了三者的核酸斑点杂交检测技术(Nucleic acid spot hybridization，NASH)。一步 RTPCR 检测技术较常规 RT-PCR 方法更加快捷，NASH 检测技术经改进，在不影响检测效果的情况下，达到了简便快速且成本降低的目的，使每个样品的检测成本降至约 0.4 元，此方法更适合大量样品的检测。 依据这三种病毒检测技术的研究结果，设计组装了烟草主要三种病毒的NASH 检测试剂盒，使病毒检测更为方便和快捷。4、作者：刘文洪题目：百合病毒的分子鉴定
14、与重要病毒的检测研究期刊名：中国学术期刊网络出版总库机构：浙江大学， 微生物学， 2003， 硕士语言：中文摘要：百合是重要的经济作物，在我国不仅有悠久的栽培历史，近年来的栽培规模不断扩大，从国外大量引进适合作为鲜切花和高档蔬菜的品种也越来越多，在此同时，百合遭受病毒侵染和衰退的现象也越来越严重。本研究对侵染我国百合的植物病毒进行了系统研究，结果表明黄瓜花叶病毒(CMV)、百合无症病毒(LSV)、百合斑驳病毒(LMoV)是侵染百合的主要病毒病原，李坏死环斑病毒(PNRSV)在百合上也有发生。同时，通过 RNA 斑点杂交研究了 LSV、PNRSV 在我国百合上的发生情况。 通过田间调查发现我国百
15、合普遍受到病毒侵染，病毒病症状相当复杂。寄主反应实验表明，侵染百合的植物病毒的寄主范围往往都很窄，难以通过寄主反应对它们进行鉴定。用 ELISA 检测发现：CMV 在我国百合上普遍发生，在 64 个检测的样品中有 25 个受到 CMV 的侵染，侵染率为 39.1；电镜检测结果表明在 75个样品中有 58 个样品被线状病毒侵染，侵染率达 77.3；组织病理学观察结果显示：在40 个被线状病毒侵染的样品中有 27 个样品检测到风轮状内含体，表明受到马铃薯 Y 病毒属(Potyvirus)病毒成员的侵染，侵染率达 67.5。 利用 RT-PCR 方法，从百合上获得 2个 CMV 分离物(CMV-LS
16、、CMV-ZH)的 CP 基因序列。序列同源性分析结果表明：CMV-LS、CMV-ZH 的 CP 基因序列与亚组和亚组成员的 CP 基因序列同源性分别为 88.299.7和68.678.3；CMV-LS 和 CMV-ZH 的 CP 基因氨基酸序列与亚组成员和亚组成员 CP基因氨基酸序列的同源性分别为 94.199.1和 65.778.5，CMV-LS 和 CMV-ZH 均属于亚组成员；进一步对不同来源的 CMV 分离物的系统进化树分析结果表明：来自各地百合上的 CMV 分离物在进化树中单独成簇，形成明显的株系分化趋势，侵染百合的出现寄主适应性变异现象。 利用 RT-PCR 方法，从百合上获得
17、2 个 LMoV 分离物(LMoV-G、LMoV-X)的 3-末端 cDNA 片段。序列同源生分析结果表明：LMoV-G、LMoV-X 与已报道的百合斑驳病毒分离物核苷酸序列的同源性为 85.9-99.6，NIb 基因序列的同源性为84.7100.0，NIb 基因氨基酸序列的同源性为 82.9100.0，CP 基因序列同源性为 85.9100.0、CP 基因氨基酸序列同源性为 87.0100.0，3-UTR 区核苷酸序列同源 摘要性为 93.1%一 100.0%。用于侵染百合和郁金香的 Po 铆 lrus 在分类上尚处于混乱不清的现状，本研究结果表明:12 个侵染百合和郁金香的尸口铆 lrus
18、 可分为三个种:即百合斑驳病毒(LMoV)、郁金香碎色病毒(TBV)和伦布兰特郁金香碎色病毒(ReTBV)。 利用RT-PCR 方法，从百合上扩增到两个 LSV 分离物(LSV-G、LSV-X)的 3一末端 cDNA 片段。序列分析结果表明:LS 琴 G、LSV-X3-末端克隆片段长分别为 995bp、994bp，包括 Cp 基因部份序列(1 一 585bp)和完整的 3一端 16kDa 蛋白基因序列(494 一 916bp)，均编码 195个氨基酸和 141 氨基酸。将两分离物与己报道的 LSV 分离物进行序列同源性分析，在核普酸水平上，各分离物间 CP 基因序列的同源性为 87.5%一 9
19、9.3%，16kDa 基因序列的同源性为 98.3%一 99.5%;在氨基酸水平上，各分离物间 CP 基因氨基酸序列的同源性为%.2%9 9.5%，16kDa 基因氨基酸序列的同源性为 98.3%一 99.5%。以上结果首次发现了 LSV 在我国百合上的发生。利用 RNA 斑点杂交方法，在北京检验检疫局提供的 6 个样品中有 3 个样品检测到 LSV 的侵染，检出率为 50.0%，在我国浙江丽水采集的 25 个样品中有 14 个样品检测到 LSV 的发生，侵染率达 56.0%。以上结果表明:说明进口的百合球茎 LSV 的侵染率可能较高、LSV 在我国也可能己经普遍扩散。 利用 RpPCR 方法
20、，从百合上扩增到两个 PNRSV 分离物(P 一 299、P 一 503)的 3一末端。DNA 片段。序列分析结果表明:P 一 299、P 一 503片段长分别为 452bP、45 lbP，均编码 150 氨基酸。两分离物与己报道的 27 个不同来源的PNRSV 分离物进行序列同源性分析，P 一 299、P 一 503 与各分离物的 CP 基因序列在核普酸水平和氨基酸水平上的同源性分别为 84.5%一 99.1%和 76%一 87.3%。以上结果首次发现了 PNRSv 在百合上的发生。利用 RNA 斑点杂交方法进行检测，在北京检验检疫局提供的 4 个样品中有 3 个样品检测到 PNRSV 的侵
21、染，检出率为 75 .0%，在我国浙江丽水采集的 24 个样品中有 5 个样品检测到 PNRSV 的发生，侵染率达 20.8%，说明 PNRSV 不仅能够侵染百合，而且在一定程度上普遍发生5、作者：马书智题目：彩色马蹄莲病毒的分子检测和鉴定期刊名：中国学术期刊网络出版总库机构：甘肃农业大学， 植物病理学， 2006， 硕士语言：中文摘要：彩色马蹄莲(Calla lily,Zantedeschia.spp)是世界驰名的切花,广泛分布于世界各地。近几年来,随着我国彩色马蹄莲栽培规模不断扩大和从国外大量引种,导致彩色马蹄莲遭受病毒侵染和衰退的现象越来越严重。然而,目前在国内关于彩色马蹄莲病毒病的报道
22、很少,因此对其进行研究,以及建立一套快速、准确的彩色马蹄莲病毒检测技术,对搞清彩色马蹄莲病毒病害的组培脱毒、有效防治、种苗检疫以及增加出口创汇将具有很重要的现实意义。本研究运用生物学和分子生物学的方法对侵染甘肃省部分地区彩色马蹄莲的植物病毒进行了系统研究。研究的主要内容包括调查了解彩色马蹄莲病毒病的发生和侵染情况、通过电镜观察海芋嵌纹病毒(ZaMV)的粒子形态及内含体的有无和形态、植物总 RNA 的提取及 RT-PCR 检测体系的建立、外壳蛋白基因的克隆和同源性分析。结果表明 ZaMV 是在自然环境下侵染甘肃省彩色马蹄莲的主要病毒,它属于马铃薯 Y 病毒属。田间调查发现甘肃省彩色马蹄莲普遍受到
23、病毒侵染,在嘉峪关市温室种植区发病最为严重,发病率高达 80.9%,而在榆中县和临洮县发病率相对较低,分别为 28.1%和 27.5%,而且彩色马蹄莲病毒病症状相当复杂,主要有花叶、斑驳、畸形等。寄主反应试验表明:侵染彩色马蹄莲的植物病毒的寄主范围很窄,主要侵染天南星科植物,所以难以通过寄主反应对它们进行鉴定。电镜检测结果表明:在 38 个样品中有 20 个样品被线状病毒侵染,侵染率达 52.6%;组织病理学观察结果显示:在20 个被线状病毒侵染的样品中有 12 个样品检测到风轮状内含体,表明受到马铃薯 Y 病毒属(Potyvirus)病毒成员的侵染,侵染率达 60%。通过提取感病彩色马蹄莲叶
24、片组织中的总 RNA,并设计特异性引物进行 RT-PCR 扩增,然后进行基因克隆,获得 ZaMV 病毒衣壳蛋白(CP)的基因序列。结果显示 ZaMV 的克隆片断全长为 833bp,其中 CP 基因由 579bp 的组成,另外有 254bp组成的 3-末端非编码区。对 ZaMV 同马铃薯 Y 病毒属一些种和已知的 ZaMV 进行同源性比较和进化树分析表明,ZaMV 的 CP 序列和马铃薯的 Y 病毒属成员之间核苷酸有 56.0%62.4%的同源性,氨基酸有 51.8%62.1%之间的同源性。而且同源性分析的结果也显示 ZaMV 与李痘病毒(PPV)和芜菁花叶病毒(TuMV)属于同族,而与 ZaM
25、V 和芋花叶病毒(DsMV)这两种能同时侵染天南星科植物的病毒在并不表现出亲缘关系,几乎没有同源性,这些结果和已经报道的结果相一致。ZaMV 和国内外已经报道的 ZaMV 相比,有 93%以上的 更多还原二、（一）检索课题：一种侵染秋海棠的 PVY 病毒的鉴定（二）数据库：中国期刊全文数据库 1（三）检索途径：M=题名或关键词（四）检索提问式：（马铃薯 Y 病毒 orPVY 病毒）and 检测 and 鉴定（五）检索结果：1、【题 名】河南省马铃薯 Y 病毒的分子检测与鉴定【作 者】吴兴泉 陈士华 陈涛 薛珍 娄玉华、【机 构】河南省谷物资源转化与利用重点实验室,河南工业大学生物工程学院,河南
26、郑州 450001【语 言】中文【刊 名】河南农业科学.2007(10).-64-66【摘 要 】利用 RT-PCR 技术对郑州市和信阳市的马铃薯 Y 病毒（potato virus Y,PVY）进行了鉴定。依据 PVY p1 基因序列设计合成 1 对引物,以带毒的马铃薯叶片总 RNA 为模板,RT-PCR 扩增得到 0.58kb 的目的 DNA 片段,而健康对照无此片段。对 PCR 产物进行序列测定,Blast 分析表明,该 DNA 序列与 PVY N：O 株系 p1 基因序列相似性可达 99%,证明所得 DNA 片段确为 PVY p1 基因,从而建立了 PVY 的 RT-PCR 检测方法。
27、在此基础上,从节省检测时间、优化反应程序及反应体系等方面进行了改进。2、【题 名】烟草马铃薯 Y 病毒病（PVY）的研究现状与防治对策【作 者】高正良【语 言】中文【机 构】安徽省烟草研究所，安徽凤阳 233100【刊 名】安徽农学通报.2003,9(5).-75-77【摘 要】评述了烟草马铃薯 Y 病毒病(PVY)的国内外研究现状和发生情况。同时对我国及安徽省近年来该病的流行原因进行了分析，并提出了相应的防治对策。3、【题 名】河北省马铃薯 Y 病毒株系分子鉴定及其 RTPCR 检测【作 者】吴志明1 时星2 谢晓亮1 温春秀1 张庆良3【机 构】1河北省农林科学院经济作物研究所，河北石家庄
28、 050051 2河北省高碑店农业局，河北保定 074000 3河北科润农业技术有限公司，河北石家庄 050051【刊 名】河北农业大学学报.2005,28(3).-54-59【语 言】中文【文 摘】根据马铃薯 Y 病毒(Potato virus Y，PVY)的外壳蛋白基因序列，设计合成了一对寡核苷酸引物，从感染 PVY 的马铃薯田间病叶组织中提取出病毒的 RNA，进行 cDNA 合成及 PCR 扩增，得到一条长度约 800bp 的特异 PCR 扩增产物，与理论设计的基因片段大小一致，本试验建立了快速、灵敏、简便的 PVY 检测的方法。将 RTPCR 扩增产物克隆到质粒 pGEMT 上，并进行
29、了序列分析。结果表明，克隆的 cDNA 片段由 801 个核苷酸组成，编码 267 个氨基酸组成的理论分子量为 29kD 蛋白，与 PVY 外壳蛋白的大小一致，与基因库登记的代表性株系相比，它们之间的核苷酸序列同源性为 896988，氨基酸序列的同源性为 933985，说明 PVY CP 基因具有高度的保守性(记为 PVYHBEI)，与国内报道的 PVYCHU、PVYZHI 和 PVYZHOU 株系的氨基酸序列同源性分别为966、985和 978，与 PVYN 和 PVYO 株系的氨基酸序列同源性分别为 936和 978，从分子水平上确定 PVY-HBEI 归属于普通株系(PVYO 株系)。4
30、、【题 名】云南、福建、湖南烟区烟草花叶病主要病毒种类检测及黄瓜花叶病毒亚组鉴定【作 者】刘勇1,2 莫笑晗2 余清2 顾钢3 黄石旺4 夏玉珍2 周雪平1【机 构】1浙江大学生物技术研究所,杭州 310029 2云南省烟草科学研究所,玉溪653100 3福建省烟草农业科学研究所,福州 350003 4中国烟草中南实验站永州基地,永州 425000【刊 名】植物病理学报.2006,36(4).-310-313【语 言】中文【文 摘】采用抗原直接包被和双抗体夹心酶联免疫吸附测定法（ELISA）对采自云南、福建、湖南烟区烟草花叶病样品进行了病毒种类检测，利用三抗体夹心 ELISA 对黄瓜花叶病毒（
31、Cucumber mosaic virus，CMV）的亚组类型进行了鉴定。在云南采集的 520 个花叶病样品中，烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus，TMV ） 、CMV 和马铃薯 Y 病毒（Potato virus Y，PVY ）总检出率分别为 7174、5501和 635；在福建采集的 150 个花叶病样品中，TMV、CMV 和 PVY 的总检出率分别为 94、2466和 800；在湖南采集的 74 个花叶病样品中，TMV、CMV 和 PVY 的总检出率分别为 5811、5135和270。部分佯品为 2 种以上病毒复合侵染。云南、福建和湖南采集的 64 个 CMV 阳性样
32、品中，属亚组的样品为 57 个，占 891；属亚组的样品为 10 个，占 156；其中3 个样品为亚组和亚组的复合侵染。5、【题 名】侵染云南花魔芋的马铃薯 Y 病毒属病毒分离物的检测及分子鉴定【作 者】罗延青1,2 丁铭2 方琦2 董家红2 王玲2 李永军2 张仲凯2【机 构】1云南大学生命科学学院,昆明 650091 2云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所,昆明 650223【刊 名】植物病理学报.2009(1).-88-90【语 言】中文【文 摘】花魔芋在分类上属于天南星科（Araceae）魔芋属（Amorphophallus） ，它具有适应性强、产量高等特点，是我国魔芋的主要栽培品
33、种以及魔芋精粉加工的主要原料。云南作为魔芋的原产地之一，魔芋种植及加工业发展较快，加工的精粉大部分出口到日本，是云南省生物资源开发产业中的一个特色产业。三、（一）检索课题：一种侵染秋海棠的 PVY 病毒的鉴定（二）数据库：AGRIS（三）检索途径：Keyword（四）检索提问式：(potato Y virus orPVY) and detection and identification and universal primer（五）检索结果：1、AU：Qamar NTI：Screening of potato germplasm against potato virus X and pota
34、to virus Y in relation to environmental factors.（针对马铃薯 Y 病毒 X 病毒的马铃薯种质资源的筛选和与环境因素的关系。）LA：EnglishSO：Faisalabad (Pakistan). UAF. 2002. 79p.AD：University of Agriculture, Faisalabad (Pakistan). Dept. of Plant Pathology.AB：Out of the twenty-one cultivars/lines screened against potato virus X (PVX) none o
35、f the cultivar found to found to be immune to potato virus X (PVX). The cultivar i.e. 394038-10, 391201-103, 394029-129, 391202-13, 394017-45, Diamont, Kiran, 394005-5, 392508-a and TPS-9803 showed moderately susceptible response to PVX. The cultivars i.e. 394038-37, TPS-9620, 394017-126, FSD-Red, S
36、ante, 394001- 150, 394001-167, TPS-9801, Desiree, TPS-9804 and SH-5 show moderately resistant response to PVX. Similarly twenty-one cultivars/lines were screened against potato virus Y (PVY). Fifteen cultivars i. e. 394038-37, 394017-126, 394038-10, 391202-13, FSD-Red, Sante, Diamont, 394001-150, 39
37、4001-167, Kiran, 394005-5, Desiree, 392508-a, TPS-9803, and SH-5 found to be resistant to potato virus Y(PVY). Three cultiars i.e 391202-103, Desiree and TPS-9801 showed moderately susceptible response. Three cultivars i.e. TPS-9620, 394029-129 and TPS-9804 showed moderate ly resistance response. Th
38、ese viruses were confirmed by artificial inoculation on the 21 potato cultivars/lines and then on indicator plants in green house. The correlation of biweekly maximum and minimum air temperature, relative humidity, clouds, wind velocity, pan evaporation and wind direction with potato virus X disease
39、 severity was determined at variety level. None of the variety had significant correlation with clouds, wind velocity and wind direction. Eighteen varieties had significant but negative correlation with maximum, minimum temperature and positive correlation with relative humidity. Eighteen varieties
40、had significant but negative correlation with pan evaporation. Maximum disease severity was recorded at 25-28 degree C maximum temperature and 11-13 degree C minimum air temperature, 80-86% relative humidity and 2-2.9 mm pan evaporation.2.AU ： Treder, Krzysztof; Przewodowski, Wlodzimierz; Barnyk, Ag
41、nieszkaTI：Factors influencing detection of Potato Leafroll Virus and Potato Virus Y in potato tuber extracts（马铃薯块茎中马铃薯卷叶病毒和 PVY 病毒的影响因子检测）AD：(Department of Potato Protection and Seed Science, Plant Breeding and Acclimatization Institute, Bonin, 76-009 Bonin, Poland)LA：EnglishSO：Versita. 2009AB：Detec
42、tion of Potato leafroll virus (PLRV) and Potato virus Y (PVY) directly in potato tubers has been influenced by several factors. The most important were: the place of tuber sampling, preincubation of tuber sap before loading into wells of microplate and duration of tubers storage after collecting fro
43、m field. The concentration of both viruses was highest in the heel part of tubers, whenever tested. Preincubation of tuber sap for several hours improved true/false signal ratio for dormant tubers and enabled reliable detection of both viruses. However after natural dormancy breaking it was necessar
44、y to change Cocktail-ELISA procedure to obtain reliable results, consistent with DAS-ELISA on leaves. The sap was not preincubated but loaded into wells directly after sample collecting and immuno-enzymatic reaction was developed overnight in refrigerator.3.AU: Bertazzon N.; Angelini E.TI: Advances
45、in the detection of Grapevine leafroll-associated virus 2 variants Vitis vinifera L.（葡萄卷叶病毒的 2 个变异体的治疗进展的检测）LA: EnglishSO: Journal of Plant Pathology (Italy), v. 86(4) p. 283-290. (Dec 2004).AD: Istituto Sperimentale per la Viticoltura, Conegliano Veneto, Treviso (Italy)AB: Several detection methods
46、 were compared, as a guide for the development of the most efficient diagnostic tools for the broad specificity or specific identification of Grapevine leafroll-associated virus 2 (GLRaV-2) variants. To this aim, comparative trials were carried out using a group of distinctive GLRaV-2 variants, the
47、GLRaV-2-RG strain and a new strain, called GLRaV-2-BD. ELISA detected all GLRaV-2 isolates when the tested samples contained a sufficiently high concentration of the antigen. RT-PCR was more sensitive than ELISA, but did not recognise all the GLRaV-2 sequence variants under investigation. New primer
48、 pairs were therefore designed, some of which allowed the simultaneous detection of all isolates, while others were specific to each variant. The universal primer pairs for GLRaV-2, together with RFLP analysis, allowed a rapid identification and characterisation of GLRaV-2 variants with divergent se
49、quencesSono stati confrontati metodi diagnostici diversi, come guida per lo sviluppo di strumenti di diagnosi per la specificit. allargata o per lidentificazione specifica delle varianti del Virus 2 associato allaccartocciamento fogliare della vite (GLRaV-2). A questo scopo, sono state condotte prove comparative utilizzando un gruppo di varianti caratteristiche del GLRaV-2, il ceppo GLRaV-2-RG e un nuovo ceppo, denomin
