1、医院污水监测方法细菌总数及粪大肠菌群的测定1. 采样时间在消毒后 1 小时，排放前进行采样2. 采样方法1） 水样瓶采集前必须进行灭菌，并需保证在装运、保持过程中不受污染2） 在采集水样时，先将出水口消毒，然后将水龙头完全打开，放水 5-10min,以排除管道内的贮水后再采水样。3） 如果是经加氯处理的污水，应按每 500ml 加 1.5%硫代硫酸钠 2ml 中和余氯，终止余氯的杀菌作用。4） 所才的水量为采样瓶容量的 80%左右，以便在检验时可以充分摇动水样。5） 水样从采集到检验一般不超过 2h,如放冰箱保存，也应不超过 4h.3. 细菌总数的测定：细菌总数是指 1ml 水样在营养琼脂培养
2、基中，于 37 培养 48h 后，所生长的细菌菌落数。操作方法：1） 无菌操作吸取 10ml 充分混匀的水样注入盛有 90mln 灭菌蒸馏水的玻璃瓶中，混匀成 1:10 稀释液。2） 吸取 1:10 稀释液 1ml 注入盛有 9ml 灭菌水的试管中，混匀成 1:100 稀释液。3） 用涂抹法或倾注法接种平皿。4） 置 37培养 48h 后计数菌落数，报告 1ml 水样的细菌总数。4. 粪大肠菌群的检验方法采用发酵法。步骤：初发酵试验平板分离复发酵试验初发酵试验1） 将水样作 1:10 及 1:100 稀释2） 水样的接种 1:100 稀释水样( 相当于原水样 0.1ml)1ml原水样 1ml
3、以上分别注入 10ml 普通浓度（单料）乳糖蛋白胨液中（内有倒管）。原水样 10ml 注入 5ml3 倍浓缩（三料）乳糖蛋白胨液中（内有倒管）如水样较清洁，再取原水样 10ml 注入50ml3 倍浓缩乳糖蛋白胨液中，上述发酵管置 44，24h 培养。平板分离将产酸产气及只产酸不产气的发酵管，分别接种伊红美蓝培养基上，于 37培养 1824 小时，挑去深紫黑色、具有金属光泽的菌落（或紫黑色，不带或略带金属光泽的菌落；淡紫红色、中心色较深的菌落） ，进行涂片、染色、镜检。复发酵试验挑取镜检为革兰阴性无芽孢杆菌的典型菌落 13 革，接种于一支单料乳糖发酵管内，44培养 24h，产酸产气即证实有大肠菌
4、群存在。结果报告根据证实有大肠菌群存在的阳性管（瓶）数查表 1 或表 2，报告没升水样中的粪大肠菌群数。5、污水中沙门菌、志贺菌检验步骤：污水样品过滤、稀释、增菌处理：取 200ml 污水，用灭菌滤膜进行抽滤；用100ml 二倍浓度 SF（亚硒酸盐增菌液）把滤膜上截留的杂质洗脱倒灭菌三角烧瓶内，充分摇匀，置于 37培养 2448h；挑选可疑菌落接种于双糖37培养 1824 小时。鉴定：生化、血清学试验，检验结果报告一定体积样品中存在或不存在沙门三、报告填写编号： 格式：ZG-XJ-JL细菌总数检测报告样品名称：检测日期： 生产日期：稀释度 10 100 1000菌落计数（CFU） 350 330 280 260 32 38平均数（CFU）结果（CFU）检测人：审核人：编号： 格式：ZG-XJ-JL大肠杆菌检测报告样品名称：检测日期： 生产日期：稀释度 10 100 1000初发酵产气管数复发酵管数MPN 表结果检测人：审核人：
