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自噬检测方法.ppt

上传人:weiwoduzun 文档编号:5650125 上传时间:2019-03-11 格式:PPT 页数:9 大小:4.62MB
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资源描述

1、自噬检测方法,常用细胞器标记物,自噬体检测: 1.透射电镜 2.免疫荧光观察LC3斑点,(P62辅助说明); 3.WB检测LC3+P62,并增加自噬降解抑制剂处理组。实验顺序:3 1,自噬流评价: 1.双标LC3,红色斑点/黄色斑点; 2.LC3与lamp1的共定位; 3.DQ-BSA; 4.稳转GFP-LC3细胞中检测游离GFP,Fusion of autophagosomes with endosomes/lysosomes is mediated by the class C VPS complex, Rab GTPase and the SNARE complex.,Cai, H.,

2、Reinisch, K. & Ferro-Novick, S. Coats, tethers, Rabs, and SNAREs work together to mediate the intracellular destination of a transport vesicle. Dev. Cell 12,671682 (2007).Itakura, E., Kishi-Itakura, C. & Mizushima, N. The hairpin-type tail-anchored SNARE syntaxin 17 targets to autophagosomes for fusion with endosomes/lysosomes. Cell 151, 12561269 (2012). Takts, S. et al. Autophagosomal Syntaxin17-dependent lysosomal degradation maintains neuronal function in Drosophila. J. Cell Biol. 201, 531539 (2013),机制研究: CO-IP 比较各组处理后stx17结合的SNAP29和vamp8,

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