1、临床实用病理学技术,江医上饶分院病理教研室方 义 湖,第一讲 组织切片制作技术常规 （H-E染色法),一、病理标本的接收 二、组织固定 三、取材 四、组织脱水 五、包埋 六、组织石蜡切片 七、常规染色 八、封片,一、 病理标本的接收,是临床与病理科交接的首要环节，程序如下： 1、核对病理申请单是否与标本匹配名称、数目、大小、部位、组织来源、临床诊断等 2、检查标本大小与固定液比例是否合适4%的中性甲醛或10%的中性福尔马林小标本：6-10倍量大标本：切开固定 3、编上病理号，录入电脑存档,二、 组织的固定,1、固定的目的和意义目的：保持原有的形态和结构（生理、病理、免疫）意义：是制作优秀切片的
2、前提和基础 2、注意事项：1）及时取材 切开固定2）及时固定,3）液量充分 6-10倍 4）适度固定 24小时内5）适宜温度 36-38度6）适当搅拌,3、固定液的选择1）单纯固定液：10%中性福尔马林，最常用乙醇固定液：8095%，少用，主要用于核酸操作的固定4%的多聚甲醛 用于细胞培养,2）混合固定液：AF; Bouin; Carnoy; Zenker. 4、操作方法：小标本：610倍液体量 4小时大标本：切开固定 18小时,三、 取 材,1、概念：对标本客观描述+切成小片装入小盒 2、取材环境：略 3、操作过程：核对、观察与描述（2.0x1.5x0.3cm)、记录、存档或照相 4、注意事
3、项：略,四、 组织脱水,利于透明剂和石蜡的渗入 1、手工脱水1）器械：大标本缸；浸蜡缸；脱水篮；恒温烤箱2）流程：4%中性甲醛3 h 80%酒精1 h 90% 1 h 95%过夜 无水酒精a2 h 无水,酒精b2 h 二甲苯-无水酒精30分钟 二甲苯a30 二甲苯b1 h 石蜡a、b、c(60度）各1 h 。 2、半自动/全自动脱水机,五、 包 埋,1、意义可以达到一定的硬度和韧度，有利于切片 2、步骤熔化石蜡 注入模具 放入组织块 冷冻 待切蜡块 3、注意事项1） 镊子要加热2）包埋盒内无水及其他异物3）蜡温度58-60度4）注意包埋面及边缘,六、 石蜡切片,1、切片方法：1）平推式石蜡切片；2） 旋转式石蜡切片 2、操作步骤 （ 略） 3、注意事项 （ 略）,七、常规染色（HE）,苏木精（hematoxylin)和伊红（eosin)染色方法，简称HE染色法。 1、人工染色法：古老而实用，步骤30步（略）注意事项：1）烤片温度：恒温箱 75c2）脱蜡要彻底： 3次二甲苯3）苏木精、伊红染液配制准确，要经常过滤4）HCL/氨水要经常更换,5）脱水要充分6）用中性树胶封片7）在通风良好的环境中操作8）所有步骤严格按照标准进行2、自动染色机染色（略）,八、封 片,1、手工封片注意事项（略） 2、机器封片1）机器胶带封片机2）机器盖玻片封片机,谢谢大家,
