1、一、名词解释1、 生物药物：生 物 药 物 是 指 运 用 生 物 学 、 医 学 、 生 物 化 学 等 的 研 究 成 果 ， 综 合 利 用 物理 学 、 化 学 、 生 物 化 学 、 生 物 技 术 和 药 学 等 学 科 的 原 理 和 方 法 ， 利 用 生 物 体 、 生 物组 织 、 细 胞 、 体 液 等 制 造 的 一 类 用 于 预 防 、 治 疗 和 诊 断 的 制 品 。2、 诱变育种：是利用物理或化学诱变剂处理均匀分散的微生物细菌群体，促进其突变率大幅度提高，然后采用简便、高效的筛选方法，从中选出少数具有优良性状的突变菌株。3、盐析法：是利用各种生物分子在浓盐溶液
2、中溶解度的差异，通过向溶液中引入一定数量的中性盐，使目的物或杂蛋白以沉淀析出，达到纯化目的的方法。4、吸附法：指利用吸附作用，将样品中的生物活性物质或杂质吸附于适当的吸附剂上，利用吸附剂对活性物质和杂质间吸附能力的差异，使目的物和其它物质分离，达到浓缩和提纯目的的方法。5、 生物转化：是指外源化学物在机体内经多种酶催化的代谢转化。生物转化是机体对外源化学物处置的重要的环节，是机体维持稳态的主要机制。6、 双水相萃取：不同的高分子溶液相互混合可产生两相或多相系统，利用物质在互不相容的两水相间分配系数的差异来进行萃取的方法。7、 生物分离技术：从动植物或者微生物的有机体或者器官、生物工程产物及其生
3、物化学产品中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。也称生物工程下游技术。8、 絮凝：在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间产生架桥作用使胶粒形成大的絮凝团的过程。9、 相对离心力：由于各种离心机转子的半径或者离心管至旋转轴中心的距离不同，离心力而受变化，相对离心力就是实际离心场转化为重力加速度的倍数。10、亲和吸附剂：由载体及配基偶联构成，在亲和层析中起可逆结合的特异性物质称为配基，与配基结合的层析介质称为载体。11、细胞破碎：是 指 利 用 外 力 破 坏 细 胞 膜 和 细 胞 壁 ， 使 细 胞 内 容 物 包 括 目 的 产 物 成 分 释放 出 来 的 技 术 ， 是 分 离 纯 化
4、 细 胞 内 合 成 的 非 分 泌 型 生 化 物 质 （ 产 品 ） 的 基 础 。12、亲和层析：在 生 物 分 子 中 有 些 分 子 的 特 定 结 构 部 位 能 够 同 其 他 分 子 相 互 识 别 并 结 合 ，这 种 结 合 既 是 特 异 的 ， 又 是 可 逆 的 ， 改 变 条 件 可 以 使 这 种 结 合 解 除 。 生 物 分 子 间的 这 种 结 合 能 力 称 为 亲 和 力 。 亲 和 层 析 就 是 根 据 这 样 的 原 理 设 计 的 蛋 白 质 分 离纯 化 方 法 。13、超临界萃取：超临界萃取技术是利用临界压力和临界温度以上的一些溶剂流体所具有
5、特异性增加物质溶解能力来进行分离纯化的技术。14、透析：是通过小分子经过半透膜扩散到水（或缓冲液）的原理，将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。15、重结晶：将晶体用合适的溶剂溶解再次结晶，使纯度提高。16、菌丝结团：在液体培养条件下，繁殖的菌丝没有分散舒展而聚成团状称为菌丝团。17、发酵热：发酵过程中产生的净热量，是各种产生热量减去各种散失的热量后所得的净热量。18、错流过滤：如果滤液给过滤介质面一个平行的大流量冲刷，则过滤截留表面积累的滤饼就会减少到可以忽略的程度，而通过过滤介质的流速却比较小。这种过滤方法称作错流过滤。19、 大孔离子交换树脂：大 孔 树 脂 是 由 聚 合 单 体
6、 和 交 联 剂 、 致 孔 剂 、 分 散 剂等 添 加 剂 经 聚 合 反 应 制 备 而 成 。 聚 合 物 形 成 后 ， 致 孔 剂 被 除 去 ， 在 树 脂 中留 下 了 大 大 小 小 、 形 状 各 异 、 互 相 贯 通 的 孔 穴 。 因 此 大 孔 树 脂 在 干 燥 状 态下 其 内 部 具 有 较 高 的 孔 隙 率 ， 且 孔 径 较 大 ， 在 1001000nm 之 间 ， 故 称为 大 孔 吸 附 树 脂 。20、抗生素：是由微生物（包括细菌、真菌、放线菌属）或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类次级代谢产物，能干扰其他生活细胞发育功能
7、的化学物质。二、简答：1、 简述生物活性物质分离纯化的主要原理。答： 生物大分子分离纯化的主要原理是：1）根据分子形状和大小不同进行分离，如差速离心与超离心、膜分离、凝胶过滤等；2）根据分子电离性质（带电性）差异进行分离，如离子交换法、电泳法、等电聚焦法；3）根据分子极性大小及溶解度不同进行分离，如溶剂提取法、逆流分配法、分配层析法、盐析法、等电点沉淀及有机溶剂分级沉淀等；4）根据物质吸附性质的不同进行分离，如选择性吸附与吸附层析等；5）根据配体特异性进行分离，如亲和层析法等。2、 列举细胞破碎的方法答：机械法：高压匀浆器；高速珠磨机；高速组织搅拌机；研磨；超声波振荡器。非机械法：化学法；酶解
8、法；物理法3、 简述亲和层析的原理答：亲和层析的设计和过程大致分为以下三步：1）配基固定化：选择合适的配基与不溶性的支撑载体偶链，或共价结合成具有特异亲和性的分离介质；2）吸附样品：亲和层析介质选择性吸附酶或其他生物活性物质，杂质与层析介质间没有亲和作用，故不能被吸附而被洗涤去除；3）样品解析：选择适宜的条件使被吸附的亲和介质上的酶或其他生物活性物质解析下柱4、 简述发酵过程的影响因素答：温度；压力； 搅拌转速；搅拌功率；表观粘度；PH；基质浓度；菌体浓度；菌丝形态。5、简述亲和层析的主要特点是什么答：利用它从提取液中经过一次简单的处理便可得到所需的高纯度活性物质。此外亲和层析还有对设备要求不
9、高、操作简便、适用范围广、特异性强、分离速度快、分离效果好、分离条件温和等优点：其主要缺点是亲和吸附剂通用性较差，故要分离一种物质差不多都得重新制备专用的吸附剂。另外由于洗脱条件较苛刻，须很好地控制洗脱条件，以避免生物活性物质的变性失活。6、 简述吸附法的定义特点答：吸附法(adsorption method)指利用吸附作用，将样品中的生物活性物质或杂质吸附于适当的吸附剂上，利用吸附剂对活性物质和杂质间吸附能力的差异，使目的物和其它物质分离，达到浓缩和提纯目的的方法。吸附法具有下列特点：(1)设备简单、操作简便、价廉、安全。(2)少用或不用有机溶剂，吸附与洗脱过程中pH 变化小，较少引起生物活
10、性物质的变性失活。(3)天然吸附剂(特别是无机吸附剂)的吸附性能和吸附条件较难控制，吸附选择性差，收率不高，难以连续操作7、 抗生素次级代谢产物的理性化筛选有哪些方法答：1、筛选营养缺陷型突变株2、筛选生物合成阻断变株的回复突变株3、筛选去磷酸盐调节突变株4、筛选去除碳源分解代谢调节突变株5、筛选氨基酸结构类似物抗性突变株6、筛选二价金属抗性突变株7、筛选前体或者前体结构类似物抗性突变株8、筛选自身代谢产物抗性突变株8、 次级代谢产物发酵过程可分为哪几个阶段，每个阶段有什么特点。答：3 阶段：菌体生长阶段:新菌体不断合成，菌浓度明显增加产物合成阶段：菌体生长恒定，产物的产量 到达最大菌体自溶阶
11、段：菌体开始衰老溶解，氨氮增加 PH 上升，产物合成衰退。9、 超临界萃取技术在生物工程中的应用有哪些，并举例说明。答：1、氨基酸、甾醇等小分子萃取；如2、蛋白质、酶等大分子萃取；3、超临界 CO2 萃取法去除残留溶剂；三、讨论题（一） 、螺旋霉素（SPM）为一弱碱性抗生素，分子结构中有两个二甲胺基，pK1=7.1、pK2=8.4，文献报导，螺旋霉素游离碱易溶于氯仿、醇类、酮类、酯类、己烷和苯等。螺旋霉素的盐类极性较大，能溶于水和低级醇。在 pH9.5 溶液中不稳定，特别在酸性条件下稳定性更差。1. 为什么萃取时适宜的 pH=9.0 左右 ? 不能过大的理由。碱性物质：随着 pH，K， 应满足
12、 pH8.4，SPM 游离分子含量增加在弱极性的有机溶剂中溶解度增大。不能过大的理由？ pH 超过 9.0 以后，K 增加不明显； SPM 稳定性下降； 极性比 SPM 更强的杂质（如 pK 杂 9） ，容易被萃取到有机相中，造成纯度降低。2. 萃取时温度为什么应升至 35左右？螺旋霉素在水中的溶解度随温度升高而减小，低温时溶解度较大。因此，萃取时应适当提高温度，有利于螺旋霉素进入有机相。 温度过高，容易破坏，因此适宜的萃取温度为 35左右。 3. 反萃取主要为了除去哪类杂质?极性比螺旋霉素弱的碱性杂质（pK 杂 pKSPM） ，如何除去？用适当 pH 的缓冲液洗涤萃取液，要求杂质较多进入缓冲
13、液，而 SPM 尽可能少被洗下来。 缓冲液 pH 应满足：pK 杂 pHpKSPM （使杂质解离度大，而 SPM 解离度小） 。（二）林可霉素性质：碱性抗生素，分子中有一个胺基 pK=7.6；pH7.6， Lin 游离分子浓度 当 pH10.0 时, C0 = 99.6% C+ = 0.4% 选 pH10 pH 再升高是否更好? Lin 几乎都呈游离分子, 溶解度不会再增大; 且耗碱量多 被同时萃取的碱性杂质, 分离效率 Lin 稳定性受影响d. 加 NaCl, 盐析作用: 水中溶解度进一步 K(1828) 两相互溶度易分层。e. 反萃 pH: 2.0 2.0: Lin 稳定性。2、二级逆流萃取 =3 K0=15.56 KE5.116.010.7pH.53%.37.1nE9祝愿今天吼了一中午的隔壁宿舍的喜鹊们能遇到一个嗓门更大的！或者就是那天情绪过于激动突发高血压踩到路边的西瓜皮然后撞到电线杆上摇摇晃晃冲进马路中央被汽车撞飞掉进没有井盖的下水道后活活淹死！一解我的愤怒！
