1、食品安全检测技术实验报告姓名： 学号： 成绩： 2010-6-26实验一、亚硫酸品红比色法测定白酒中的甲醇姓名： 日期：一、 实验目的1、掌握甲醇测定的原理2、掌握甲醇测定的方法二、 实验原理甲醇经氧化成加醛后，与品红亚硫酸作用生成紫色化合物，与标准系列定量。过量的高锰酸钾和硫酸反应，生成的二氧化锰和草酸以及硫酸反应生成硫酸锰。三、 实验试剂及仪器（一）试剂1、高锰酸钾-磷酸溶液：称取 3 克高锰酸钾，加入 15 毫升磷酸与 70 毫升水混合，溶解后加水到 10 毫升。贮存在棕色瓶中。2、草酸-硫酸溶液：称取 5 克无水草酸溶解与硫酸中至 100 毫升。品红亚硫酸溶液：称取 0.1 克碱性品红
2、，分次加入 60 毫升 80 度的水研磨，吸取上清液于 100 毫升容量瓶中，冷却后加入 10 毫升亚硫酸氢钠溶液和 1毫升盐酸，过夜。3、甲醇标准溶液：称取 1.000 克甲醇，置于 100 毫升容量瓶中，加水稀释到刻度，再洗去 10 毫升甲醇溶液置于 100 毫升容量瓶中，加水稀释到刻度，作为甲醇标准使用液。4、无甲醇乙醇溶液：取 0.3 毫升，检验是否显色，如果显色则重新蒸馏。（二）仪器1、分光光度计（722S）四、 实验方法1、分别在 05 号比色管中加入 1 毫克/毫升的甲醇标准溶液 0.1 毫升、0.2毫升、0.4 毫升、0.6 毫升、0.8 毫升、1 毫升（相当于 0.1 毫克、
3、0.2 毫克、0.4 毫克、0.6 毫克、0.8 毫克、1 毫克） 。再分别于比色管中，加入0.5 毫升无甲醇乙醇。再在比色管中各加水至 5 毫升，再各加入 5 毫升品红-亚硫酸溶液，混匀，放置 10 分钟，再各加入 2 毫升草酸硫酸溶液，混匀，使之褪色，再加入 5 毫升品红亚硫酸溶液，20 度以上静置 30 分钟，用 2 厘米比色皿，用零管调零点，于 590 纳米波长处测吸光度，得到标准曲线方程。2、取 1 毫升白酒于于比色管中，再按照上述标准曲线制作时方法操作，测定样品的吸光度。3、试样结果计算公式： X=试样中甲醇的含量，单位为克每百毫升（克/100 毫升） ；m=测定试样中甲醇的质量，
4、单位毫克；v=试样体积，单位为毫升计算结果保留两位有效数字。五、 实验结果与分析1、不同浓度的甲醇吸光度测定结果如下表一所示表一甲醇吸光度表标准曲线：管号 0 号 1 号 2 号 3 号 4 号 5 号吸光度 0 0.037 0.061 0.142 0.213 0.24310vmX甲 醇 标 准 曲 线0.1, 00.2, 0.0370.4, 0.0610.6, 0.1420.8, 0.2131, 0.243y = 0.2808x - 0.0291R2 = 0.98-0.0500.050.10.150.20.250.30 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2毫 克 数 /mg吸光度(A)
5、 系 列 1线 性 (系 列 1)标准曲线方程：y=0、2808x-0.0291y-吸光度 x-甲醇毫克数2、白酒中甲醇浓度：所测吸光度 A=0.16根据 y=0.2808x-0.0291 得 x=0.67mg所以， =(1000.6734)/(11000)=0.067 克/100 毫升所以，所测试样中甲醇含量为 0.067 克/100 毫升3、讨论：（1） 、甲醇的来源a、如果用谷糠等为酿酒原料,在高温蒸发时,果胶质的甲基脂被分解,生成甲醇,蒸酒时被带入成品中。b、工业酒精中常混有有害成分甲醇 ,一些不法之徒用工业酒精兑制假酒（2） 、影响甲醇测定因素试剂因素a、亚硫酸钠品红溶液亚硫酸钠品红
6、溶液宜与冷暗处保存不宜在室温下长期保存，失效的亚硫酸钠品红溶液由于亚硫酸的分解略显微红色， （可用此法初步判定是否失效） ，但是加入过量的亚硫酸钠会降低显色的灵敏度故亚硫酸钠品红溶液的使用时间不宜过长.b、甲醇显色反应的灵敏度与乙醇浓度相关，乙醇的浓度过高或过低均会导10vmX致显色的灵敏度下降，测定是要确保样品管与标准管的乙醇浓度一致c、无甲醇乙醇的影响 在 GB/T5009.482003 中无甲醇乙醇溶液的制备中其验证方法是按照操作规程应不显色，该方法存在有很大弊病，若以目视法作显色判断，当甲醇浓度很低时肉眼是无法判定是否有色的；若以分光光度计进行比较，空白管中的无甲醇乙醇又从何而来！经试
7、验验证无甲醇乙醇溶液的方法，只能在气相色谱法中验证。环境因素：在比色法测定白酒中甲醇含量的方法中，发色的温度和时间是决定最终检测结果关键，由于温度的过低或过高都会对结果带来相当大的影响实验二、 白酒中糠醛的测定姓名： 日期：一、 实验目的1、掌握糠醛测定的原理2、掌握糠醛测定的方法二、 实验原理白酒中的糠醛在紫外波长为 277 纳米处有最大的吸收值，可由对比测定出酒中的糠醛含量。三、 实验试剂及仪器（一） 试剂糠醛（二） 仪器紫外分光光度计四、 实验方法1、样品处理：将白酒稀释 5 倍2、吸取 0.1 毫克/毫升的糠醛溶液分别在 06 号比色管中加入 0.0 毫升、0.1毫升、0.3 毫升、0
8、.5 毫升、0.7 毫升、1 毫升、1.2 毫升于比色管中，加水至总体积 10 毫升，再各加入 25 毫升的 50%乙醇至 25 毫升，以 10 毫升水和 15 毫升 50%的乙醇溶液混合后调零，测定 7 个比色管中的溶液吸光度，得到标准曲线方程。3、取样液 10 毫升于 25 毫升比色管中，用 50%的乙醇溶液稀释到 25 毫升，摇匀，按照上述方法测定样液吸光度。4、计算公式公式中 C 为糠醛含量，单位克/100 毫升v 为样液体积，单位毫升；k 为稀释倍数五、 实验结果与分析1、不同浓度梯度的糠醛溶液吸光度如下表 2 所示表 2 糠醛吸光度标准曲线管号 0 号 1 号 2 号 3 号 4
9、号 5 号 6 号吸光度 -0.01 0.152 0.531 0.868 1.150 1.722 1.9641010vkcX白 酒 中 糠 醛 标 准 曲 线y = 1.6683x + 0.0054R2 = 0.998-0.500.511.522.50 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4糠 醛 毫 升 数吸光度 系 列 1线 性 (系 列 1)标准曲线方程：y=1.668x+.0054 y吸光度 x糠醛毫升数2、白酒中的糠醛浓度为：所测 A=0.028则，根据 y=1.668x+0.0054 x=0.01355所以，根据得，X=3.39所以，样品中甲醛含量为 3.39g六、 讨
10、论1、糠醛的来源糠醛又名吠喃甲醛，白酒中的糠醛主要来源于各种谷物及稻皮、谷糠等酿酒原料。它是白酒中酿酒辅料（填充料）中的多缩戊糖分解产生的。2、影响糠醛测定因素无糠醛乙醇及浓度的选择酒中主要成分是水和乙醇，糠醛易溶于乙醇中，所以选用分析纯尤水乙醇.稀释至 10- 60%用紫外分光光度计测定，结果在此范围内不受影响.因此，选用与白酒乙醇浓度接近的 50%（v/v）乙醇溶液及稀释样品使用。1010vkcX实验三、白酒中杂醇油的测定姓名： 日期：一、 实验目的1、 掌握杂醇油的测定的原理2、 掌握杂醇油的测定的方法二、 实验原理杂醇油成分复杂，其中以正己醇、正戊醇、异戊醇、正丁醇、异丁醇、丙醇为代表
11、。本法测定标准以异戊醇和异丁醇表示，异戊醇和异丁醇在硫酸作用下生成戊烯和丁烯，再与对二甲氨基苯甲醛作用生成橙黄色，与标准系列比较，求出样品中的杂醇油。三、 实验试剂及仪器（一） 、试剂1、0.5% 对二甲氨基苯甲醛硫酸溶液：称取 0.5 克对二甲氨基苯甲醛，加入硫酸溶液至 100 毫升。2、无杂醇油乙醇：按照操作方式检测是否显色，如显色进行处理，3、杂醇油标准溶液：取 0.08 克异戊醇和 0.02 克异丁醇，置于 100 毫升容量瓶中，加入无杂醇油乙醇 50 毫升，用水稀释到刻度。再从容量瓶中吸取 5 毫升每毫升到 50 毫升容量瓶中，定容到刻度，此溶液中每毫升含 0.1 毫克杂醇油，（二）
12、仪器分光光度计四、 实验方法1、 在 04 号比色管中分别加入每毫升含 0.1 毫克的杂醇油 0.0 毫升、0.1 毫升、0.2 毫升、0.3 毫升、0.4 毫升、0.5 毫升杂醇油标准溶液。再在各个比色管中加水到 1 毫升刻度，摇匀，放入冰浴中，沿壁加 2 毫升 0.5%对二甲氨基苯甲醛硫酸溶液，摇匀，放到沸水中加热 15 分钟后，立即取出冰浴中冷却，加 2 毫升水，冷却混匀，10 分钟后，以零号管调零，在 520 纳米下测定吸光度。2、 吸取 0.5 毫升白酒置于比色管中，加水到 1 毫升混匀后按照上述方法，加试剂，测定吸光度。3、 计算公式A ：样品中测定的杂醇油的含量，单位克 /100
13、 毫升；V ：样品的体积数，单位毫升。五、 实验结果与分析1、 不同浓度梯度的杂醇油溶液吸光度如下表 3 所示表 3 不同浓度杂醇油吸光度标准曲线：白 酒 中 杂 醇 油 标 准 曲 线0, 00.1, 0.0370.2, 0.0650.3, 0.0830.4, 0.110.5, 0.145y = 0.2749x + 0.0046R2 = 0.99100.020.040.060.080.10.120.140.160 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6毫 升 数吸光度 系 列 1线 性 (系 列 1)方程为：y=.0.2749x+0.0046x-糠醛毫克数 y-吸光度管号 0 号 1
14、 号 2 号 3 号 4 号 吸光度 0.037 0.065 0.083 0.110 0.145 10X2、白酒中的杂醇油含量：所测 A=0.070根据 y=.0.2749x+0.0046，得 x=0.2379所以，根据得，x=0.48所以，试样中杂醇油含量为 0.48六、 讨论1、 杂醇油的来源杂醇油系指甲醇、乙醇外的高级醇类。它包括正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、正戊醇、仲戊醇、己醇、庚醇等。其来源主要为蛋白质氨基酸与糖类经酵母细胞“氮代谢”中分解而成。2、 影响杂醇油测定因素（1）用对二甲胺基苯甲醛显色比色法测定酒中杂醇油含量时，不同种类对显色剂的显色程度很不一致。对相同量醇类，其显色灵
15、敏度为异丁醇异戊醇 正戊醇，而正丙醇，异丙醇，正丁醇等呈色灵敏度极差。同时酒中杂醇油成分极为复杂，其比例更为不一，因此用某一醇类作为标准来计算杂醇油含量时误差较大。为减小测定误差，标准杂醇油应尽量与酒中杂醉油成分相似。据醇类的显色灵敏度和酒中杂醉油成分分析，采用异丁醇与异戊醉作为标准杂醇油混合液，其结果较为接近。 ，（2）对二甲胺基苯甲醛与杂醇油所呈颜色是随时间延长而变浅，但变化缓慢，故采用显色后立即进行比色。当加人显色剂后应摇匀。若不经摇匀就置人沸水浴中显色，其结果偏低很大。对二甲胺基苯甲醛硫酸溶液需新鲜配制。存放 2 天后结果就会偏低。（3）乙醛含量在 0.1%以下基本上无影响。过高时可用盐酸间苯二胺除去。（4）酒样管制备时，若采用 lml 酒样，加 gml 水，这样测定结果会偏高，因这样稀释法总体积往往不足 10ml。.10VAX
