1、课题2 月季的花药培养,主要知识： （一）、被子植物的花粉发育和产生花粉植株的两条途径 （二）、月季花药离体培养的操作过程 （三）、影响花药培养的因素,花的结构,花丝,花药：囊状结构，内有很多花粉,花粉是由花粉母细胞（即小孢子母细胞）经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。花粉的发育要经历：小孢子四分体时期、单核期、双核期等阶段。,（一）被子植物的花粉发育,雄蕊,基础知识,被子植物花粉发育经历：小孢子四分体时期、单核期、双核期。,注意：,二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） 三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，
2、形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。 两个精子和一个营养核的基因型相同。,（二）产生花粉植株（单倍体植株）的两种途径,形成原因：主要取决于培养基中的激素的种类及其浓度的配比,（三）影响花药培养的因素1.材料的选择不同种类植物的诱导成功率不同。同一种植物，亲本植株的生理状况对诱导成功率有直接影响。合适的花粉发育时期：花期早期时的花药最佳。最合适的选择时期：单核居中期或单核靠边期。 a不选择单核期以前花药的原因：质地幼嫩，极易破碎。 b不选择单核期以后花药的原因：花瓣已有些松动，给材料的消毒带来困难。,2.培养基的组成 花药培养所采用的培养基可能因植物不同而有所变化。培养基
3、各成分中，植物生长调节剂的水平和配比，常对诱导细胞的分裂和分化起决定作用。如：小麦为N6培养基，马铃薯、月季为MS培养基，油菜为B5培养基。 3.其他因素：材料的低温预处理及接种密度对诱导的成功率都有一定影响。,特别提醒 花药培养不仅对培养基配方的要求更为严格，而且花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基，以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。,（一）材料选取,通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。最常用的方法：醋酸洋红法。某些植物的花粉细胞核不易着色，采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。,月季的初花期。选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因
4、素。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。,二、材料的消毒：,月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？,在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗,三、接种和培养,剥取花药,接种花药,培养,分化培养基培养,鉴定和筛选,不要损伤花药？,要彻底除去花丝？,常常会出现染色体倍性的变化？,每个培养瓶接种 （710 ） 个花药？,花药长出愈伤组织还要转移到哪？,温度控制在25左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。,主要原因是营养核和生殖核融合造成的,植物组织培养技术与花药培养技术的异同点,1、基因型为AaBb的水稻（条染色体）的花药
5、通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下培养成试管苗。 （）愈伤组织是花粉细胞分裂形成的不规则的细胞团，愈伤组织必须从培养基中获得（ ）（ ）和小分子有机物等营养物质。 （）要促进花粉细胞的分裂分化，培养基中应有（ ）（ ）两种激素。 愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，由芽发育成叶茎。这一过程必须给予光照，其原因是（ ）利用光能制造有机物促进试管苗生长发育。 （）试管苗的细胞核中有（ ）条脱氧核苷酸链。试管苗的基因型有：,水,无机盐,生长素,细胞分裂素,叶,24,AB Ab aB ab,2（9分）草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代，导致产量降低。品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草 莓微型繁殖的基本过程如下：外植体 愈伤组织 芽、根 植株 请回答： （1）微型繁殖培育无病毒草莓苗时，一般选取_ 作为外植体，其依据是_ _ 。 （2）在过程中，常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和_，在配制好的培养基中，常常需要添加_，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后25d，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是_ 。 （3）在过程中，愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是_ 。,茎尖、根尖,茎尖、根尖不含病毒,有机物,植物激素,外植体消毒不彻底,培养基中生长素类物质和细胞分裂素类物质用量的比值偏低,
