1、 第 1 页 共 12 页 课题 3 酵母细胞的固定化一、单项选择题1下列说法中，哪项不是在应用酶的过程中常遇见的一些实际问题( )A酶与反应物混合，产品难以提纯B酶在生物化学反应中往往难以回收C酶遇强酸、强碱、高温等条件易失活D酶作为催化剂，绝大多数酶是蛋白质解析：蛋白质是绝大多数酶的化学本质，这一属性不会因为酶的固定化而改变。答案：D2下列不属于固定化酶在利用时的特点的是( )A有利于酶与产物分离B可以被反复利用C能自由出入依附的载体D一种固定化酶一般情况下不能催化一系列酶促反应解析：固定化酶是将酶固定在一种载体上，因此它不能自由出入依附的载体。答案：C3关于固定化酶技术的说法正确的是(
2、)A固定化酶技术就是固定反应物，使酶依附着载体围绕反应物旋转的技术B固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应第 2 页 共 12 页 C固定化酶中的酶无法重复利用D固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术解析：固定化酶是利用物理或化学方法将酶固定在一定空间内的技术。其 优点是酶被固定在一定装置内，可重复利用；不足是无法同时解决一系列酶促反应。答案：D4固定化细胞常用包埋法固定化，原因是( )A包埋法固定化操作最简便B包埋法对酶活性的影响最小C包埋法固定化具有普遍性D细胞体积大，难以被吸附或结合解析：细胞个大，个大的细胞难以被吸附或结合。答案：D5大分子反应物应采用的固定化技术和理由是( )A固定化
3、酶技术；可应用化学结合法或物理吸附法对酶固定，利于大分子和酶的接触B固定化酶技术；可应用包埋法对酶固定，利于大分子和酶的接触C固定化细胞技术；一般应用化学结合法或物理吸附法对细胞固定，利于大分子和细胞的接触第 3 页 共 12 页 D固定化细胞技术；一般应用包埋法对细胞固定，利于大分子和细胞的接触解析：大分子反应物应采用的固定化技术是固定化酶技术，理由是：一般用化学结合法或物理吸附法对酶固定，和包埋法相比，化学结合法或物理吸附法有利于反应物与酶的接触。如采用固定化细胞技术， 则一般用包埋法对细胞固定，由于大分子颗粒比较大，反应物难以进入包埋细胞的网格或颗粒，不利于反应的进行。答案：A6对固定化
4、细胞的叙述，正确的是( )A催化效率高，低耗能、低污染B对环境的条件非常敏感，容易失活C既能与反应物充分接触，又能与产物分离D成本低，操作简单，但反应效果可能很低解析：参照固定化细胞的优点。答案：C7下列有关固定化酶和固定化细胞的说法中不正确的是( )第 4 页 共 12 页 A与普通酶相同，固定化酶活性的发挥需要适宜的温度和 pHB固定化细胞发挥作用除了需要适宜的温度、pH 外，还需要有机营养的供应C固定化酶和固定化细胞的共同点是所固定的酶都在细胞外起作用D固定化酶和固定化细胞都能反复使用，但酶的活性可能下降解析：固定化酶的活性受温度、pH 等因素的影响，固定化 细胞发挥作用受温度、pH 和
5、有机营养等因素的影响；固定化 细胞所固定的酶是在细胞内起作用的；固定化酶和固定化细胞都能反复使用，原则上酶的活性不变，但在现实操作中，受环境等因素的影响，酶的活性可能下降。答案：C8下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是( )A从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小B作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药C尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用D将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去 CaCl2 和杂菌第 5 页 共 12 页 解析：酶的固定方式有包埋法、化学结合法和物理吸附法，物理吸附的过程是利用吸附剂本身的表面张力，从而对附近的分子产生吸附
6、，吸附剂 不会与被吸附物质发生化学反应而使其发生性质改变，所以吸附法对酶活性影响很小；消化酶在人体消化道内发挥作用，蛋白酶制剂一般在最外面加上糖衣后通过口服方式给药；尿糖试纸是一种酶试纸，是将葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶和某种无色化合物固定在纸条上，制成测试尿糖含量的酶试纸，这种酶试纸与尿液相遇时，很快会因为尿液中葡萄糖含量的多少而呈现一定的颜色，再次使用时颜色会有掩盖作用，所以不能反复利用；制备固定化酵母细胞时，将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗的目的是洗去 CaCl2和杂菌，防止凝胶珠硬度过大和杂菌的污染。答案：C9酶制剂、固定化酶、固定化细胞已经广泛地应用于各个领域，下列有关叙述错误的是( )A9
7、0 高温会使 TaqDNA 聚合酶失去催化活性B制备固定化酶的方法主要有包埋法、交联法和吸附法等C固定化酶固定时可能会造成酶的损伤而影响活性D固定化细胞可以催化一系列酶促反应第 6 页 共 12 页 解析：Taq DNA 聚合酶是一种用于 PCR 技术的耐高温的酶，90 的高温不会让该酶失活。答案：A10研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的，如将大肠杆菌得到的三磷酸酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药，与微生物降解相比，其作用不需要适宜的( )A温度 B酸碱度C水分 D营养解析：酶和细胞的正常活动都需要一定的条件，如温度、酸碱度、水分等，但是酶本身是一种大分
8、子物质，不需要营养，而细胞的生活离不开营养物质。答案：D二、双项选择题11目前，没有一种固定化技术能普遍适用于所有的酶，理由是( )A有的酶能降低反应的活化能，有的酶能升高反应的活化能第 7 页 共 12 页 B有的酶有专一性，有的酶没有专一性C不同的酶分子结构不同D不同的酶对理化因素的耐受程度不同解析：凡酶都有降低化学反应活化能的作用，也都有专一性。不同的酶分子结构不同，说明不同的酶理化性质有所不同，对理化因素的耐受程度不同，所以对不同的酶固定时应选择不同的方法和途径。答案：CD12下列有关固定化酶和固定化细胞的说法，正确的是( )A某种固定化酶的优势在于能催化一系列生化反应B固定化细胞技术
9、一次只能固定一种酶C固定化酶和固定化细胞的共同点是所固定的酶都可以反复使用D固定化酶和固定化细胞都能反复使用，但酶的活性不变解析：某种固定化酶只能催化一种生化反应，其优势是酶可以反复地使用；固定化细胞技术一次能固定多种酶；固定化酶和固定化细胞都能反复使用，而且酶的活性不变。答案：CD三、非选择题13固定化酶是 20 世纪 60 年代迅速发展起来的一种技术。东第 8 页 共 12 页 北农业大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果(注： 酶活力为固定化酶催化化学反
10、应的总效率，包括 酶活性和酶的数量)，分析回答下列问题。(1)从对温度变化适应性和应用范围的角度分析，由甲图所示结果可以得出的结论_答案：固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强且应用范围较广 第 9 页 共 12 页 (2)乙图曲线表明浓度为_的海藻酸钠包埋效果最好，当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低的原因是_。答案：3% 海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密，酶分子容易漏出，数量不足(3)固定化酶的活力随使用次数的增多而下降，由丙图可知，固定化酯酶一般可重复使用_次，之后酶活力明显下降。 答案：3 (4)固定小麦酯酶不仅采用海藻酸钠直接包埋，而且用戊二醛作交联剂，这是因为_第 10 页 共 12 页
11、 _。答案：酶分子很小，很容易从包埋材料中漏出14下面是制备固定化酵母细胞的实验步骤，请回答：酵母细胞的活化配制 CaCl2 溶液配制海藻酸钠溶液海藻酸钠溶液与酵母细胞混合固定化酵母细胞。(1)在_状态下，微生物处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复_状态。活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时_。(2)影响实验成败的关键步骤是_。(3)如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目_。第 11 页 共 12 页 (4)观察形成凝胶珠的颜色和形状，如果颜色过浅，说明_；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明_。(5)固定化酶技术一般不采用包埋法固定化，原因是_。解析
12、：微生物一般在缺水干燥环境中进入休眠状态，活化就是让处于休眠状态的微生物恢复正常生活状态。因为酵母细胞活化时体积会增大，所以活化前应选择足够大的容器。在此实验中，配制海藻酸钠溶液是影响实验成败的关键步骤。如果海藻酸钠浓度过低，形成凝胶珠包埋酵母细胞数目就会减少；观察形成凝胶珠的颜色和形状，如果颜色过浅， 说明固定化酵母细胞数目较少，如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明海藻酸钠浓度偏高，制作失败，需要重新配制；因第 12 页 共 12 页 为酶分子很小，容易从包埋材料中漏出，所以制备固定化酶一般不宜用包埋法。答案：(1) 缺水 正常的生活 体积增大 (2)配制海藻酸钠溶液 (3)少 (4)固定化酵母细胞数目较少 海藻酸钠浓度偏高，制作失败 (5)酶分子很小，容易从包埋材料中漏出
