1、试卷第 1 页，总 10 页微生物的实验室培养一、单选题1关于 MS 培养基与微生物培养基的配方相比不同之处，说法错误的是（ ）A MS 培养基中常常添加植物激素，微生物培养基中不需要BMS 培养基中的碳源和能源是蔗糖，微生物培养基中的碳源和能源主要是葡萄糖CMS 培养基中需提供植物生长必需的大量元素和微量元素DMS 培养基中不需加维生素，微生物培养基中要加维生素作生长因子【答案】D【解析】M S 培 养 基 中 常 常 添 加 植 物 激 素 ， 微 生 物 培 养 基 中 不 需 要 ， A 正 确 ；MS 培 养 基 中 的 碳 源 和 能 源 是 蔗 糖 ， B 正 确 ； MS 培
2、养 基 中 需 提 供 植 物 生 长 必 需的 大 量 元 素 和 微 量 元 素 ， C 正 确 ； MS 培 养 基 中 需 加 维 生 素 ， 有 的 微 生 物 培 养 基中 也 要 加 维 生 素 等 微 生 物 必 需 的 营 养 物 质 ， D 错 误【考点定位】组 织 培 养 基 的 成 分 及 作 用 ； 微 生 物 的 分 离 和 培 养【名师点睛】S 培 养 基 含 大 量 元 素 、 微 量 元 素 、 有 机 物 ， 有 机 物 包 括 甘 氨 酸 、 维生 素 B1、 维 生 素 B2、 烟 酸 、 肌 醇 、 蔗 糖 、 琼 脂 等 ， 特 别 包 括 植 物
3、生 长 素 、 细 胞分 裂 素 等 植 物 生 长 调 节 物 质 ， 微 生 物 培 养 基 不 合 植 物 激 素 MS 培 养 基 含 氨 基酸 如 甘 氨 酸 ， 有 碳 源 如 蔗 糖 ， 含 维 生 素 B1 和 维 生 素 B6， 微 生 物 培 养 基 中 并不 是 所 有 氨 基 酸 都 加 ， 有 些 微 生 物 在 生 长 发 育 过 程 中 可 自 行 合 成 ， 可 以 不 加 ； 有些 微 生 物 合 成 能 力 有 限 ， 氨 基 酸 可 多 加 。2制培养基时下列各项可不必考虑的是（ ）A大量元素要充足 B微量元素不可少 C不能被杂菌污染 D要有一定光照【答案
4、】D【解析】本题考查培养基的配制。解答本题要真正理解培养基的配制。A、B、C 三项都是制微生物培养基时要考虑的。除此之外还应考虑培养基的 pH 是否适合微生物生长等，配制培养基与光照无关。3下列有关微生物实验的叙述，不正确的是A. 获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染B. 平板划线法可用于微生物的计数C. 分离不同的微生物要采用不同的稀释度D. 观察菌落的特征可以用来进行菌种的鉴定试卷第 2 页，总 10 页【答案】B【解析】获得纯净培养物的关键是无菌操作，防止外来杂菌入侵；A 正确；平板划线法只能用于菌种的分离，不能用于计数，B 错误；分离微生物时涂布接种需要对培养液进行梯度稀释，分离不同的微
5、生物要采用不同的稀释度，C 正确；不同的微生物具有不同的菌落特征，观察菌落的特征可以用来进行菌种的鉴定，D 正确。【考点定位】微生物的分离和培养【名师点睛】（1 ）微生物的分离：利用该分离对象对某一营养物质的“嗜好”，专门在培养基中加入该营养物质，使该微生物大量增殖这些物质主要是一些特殊的碳源、氮源，如纤维素可用来富集纤维素分解微生物，尿素可用来富集尿素分解微生物。利用该分离对象对某种抑制物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物质，经培养后，由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制，而分离对象却可趁机大量增殖，使之在数量上占优势如筛选酵母菌和霉菌，在培养基中加入青霉素，因青霉素可抑制细菌和放线菌
6、的细胞壁的合成，从而抑制两类微生物的生长，而酵母菌和霉菌正常生长增殖；（2 ）接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法；（3 ）计数方法：显微镜直接计数和稀释涂布平板法。4大肠杆菌某个品系能够合成干扰素，一制药厂引进该品系菌株后对其培养研究。在特定的培养基中，接入少量菌种后，每 3 个小时测定一次菌体密度和培养基的 pH，并作记录。但由于一时疏忽弄乱了记录的顺序。请根据下表的记录数据，判断以下说法中错误的是 试卷第 3 页，总 10 页A.该品系大肠杆菌的培育成功是采用了基因工程的方法 B.可以通过培养基的 pH 由大到小调整记录顺序C.样本 pH 为 6.43，菌体密度为 2.2104 是培养到
7、 21 小时测量的结果 D.样本 pH 为 6.37，菌体密度为 2.0104 时，处于细菌生长的对数期【 答案】 D【解析】 干扰素是效应 T 细胞所产生的淋巴因子，大肠杆菌原本不能产生干扰素，必需导入干扰素基因制成工程菌，才能生产干扰素。在培养大肠杆菌过程中，由于不断进行呼吸作用产生 CO2，所以随着时间的推移，CO 2越来越多，培养液 pH 越来越低。故根据 pH 由大到小可确定取样的先后顺序为（按菌体密度排序）：0.0370.050.171.61.810 24.910 32.110 42.210 42.010 41.4103。由此可知，D 项所述样本为细菌生长的稳定期。5防止杂菌入侵，
8、获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是A. 实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B. 接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌C. 在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染D. 平板划线接种时，应先将皿盖打开并放置于桌面上，以便于划线操作【答案】D【解析】实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒，A 项正确；接种环、接种针等金属用具，可直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌，B 项正确；在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染，C 项正确；平板划线接种时，应在酒精灯火焰旁接种，D 项错误。6用蔗糖、奶粉和
9、经蛋白酶水解后的玉米胚芽液，通过乳酸菌发酵可生产新型酸奶。下列相关叙述中错误的是A 为乳酸菌提供碳源的只有蔗糖，而玉米胚芽液只是提供生长因子B 稳定期是种内斗争最激烈的时期试卷第 4 页，总 10 页C 应选择对数期的乳酸菌接种，有利于减少调整期的时间D 若采用连续培养措施，则应注意搅动并防止通气【答案】A【解析】题干中的蔗糖、奶粉和经蛋白酶水解后的玉米胚芽液，都能为乳酸菌提供碳源，故 A 项错误。在稳定期细菌数目最多，种内斗争最激烈；对数期的细菌代谢旺盛，生理特性最稳定，用作菌种可缩短调整期；乳酸菌是厌氧型生物，在培养中无需通气。7夏天，煮沸过的肉汤很快就会腐烂变质，主要原因是A. 蛋白质被
10、破坏 B. 细菌大量繁殖C. 肉汤中水分过多 D. 空气使肉氧化分解【答案】B【解析】夏天，煮沸过的肉汤的温度等环境条件适宜，肉汤中有丰富的营养，导致微生物大量繁殖，有机物被分解而腐烂变质，故选 B。【考点定位】微生物的分离和培养【名师点睛】微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等；有机物腐烂的实质是指细菌等微生物大量繁殖导致有机物被分解的过程。8下面关于腐乳制作过程说法正确的是A.制作腐乳时只有毛霉发挥作用 B. 豆腐表面长出青色物质则标志制作完成C. 制作腐乳时要进行控水 D.制作腐乳时加盐是为了促进毛霉的生长【答案】C【解析】腐乳的制作是多种微生物共同作用的结果；豆腐的表明长出青色
11、物质仅是制作腐乳的第一步，还需要加盐腌制、配制卤汤等；加盐一是可以析出水分，二是可以抑制微生物的生长。9 9下列常用的无菌操作中，错误的是A. 无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌B. 用酒精擦拭双手的方法是对操作者进行消毒C. 实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行D. 玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭【答案】D【解析】试题分析：无菌技术是用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，而不是杀死培养基中的一切细菌。对操作者应用较温和的方法进行消毒。实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行，防止瓶口的微生物污染培养基。对无菌操作用到的玻璃器试卷第 5 页，总 10 页皿要用干热灭菌的方法彻底消灭其中的
12、微生物，用酒精擦拭不能达到目的；选 D考点：本题考查知识点为无菌操作，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。10以下有关生物技术实践的叙述中，不正确的是( )A在大肠杆菌的分离和培养实验中，划线后盖好培养皿，须将培养皿倒置培养B某同学用带盖的瓶子制备葡萄酒的过程中，每隔 12 小时左右将瓶盖拧松一次，其目的是向瓶中通气，以保证微生物的发酵C用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后，倒平板D可以用稀释涂布平板法来测定某土壤溶液活菌数目【答案】B【解析】本题考查的是微生物培养的有关内容。某同学用带盖的瓶子制备葡萄酒的过程中，每隔 12 小时左右
13、将瓶盖拧松一次，其目的是放出酵母菌呼吸作用所产生的CO2，以防止爆瓶。B 错。故本题选 B。11突变型面包霉常需要在基本培养基上添加适当的氨基酸才能生长。现用两个氨基酸依赖型红色面包霉突变株 a 和 b，分别接种到下面的 6 种培养基上，2 种突变株在1、 3、5 号培养基上都不能生长，a、b 可以分别在 2、4 和 2、6 号培养基上生长。培养基成分如下表。关于突变株 a 和 b 分别对 AJ 中氨基酸需求的说法正确的是培养基 1 2 3 4 5 6添加氨基酸 BCDE BEFG CFHI DEFI GHIJ EHGJA两种突变株对氨基酸的需求是相同的B两种突变株都需要有 G 氨基酸才能生长
14、C4 号培养基中加入 H 氨基酸突变株 b 能生长D两种突变株都能在由 4、 5 号两种培养基组成的混合培养基中生长【答案】D【解析】试题分析：根据题意知，a 突变株不能在 1、3、5 号培养基上生可以在 2、4 培养基上生长，说明 a 生长需要 E、F 两种氨基酸，b 突变株不能在 1、3、5 号培养基上生可以在 2、6 培养基上生长，说明 b 生长需要 E、G 两种氨基酸，所以种种突变株都能在由4、5 号的混合培养基中生长，故选 D。考点：本题考查微生物培养等相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。12谷氨酸发酵生产中，必须不断地调整 pH，原因是（ ）试卷
15、第 6 页，总 10 页谷氨酸发酵的最适 pH 为 7.08.0 在发酵过程中，溶液的 pH 会发生变化当 pH 呈酸性时，谷氨酸的产量会下降不调整 pH，培养液中生成的谷氨酸会转变成其他物质A. B. C. D.【答案】 A【解析】 谷氨酸发酵的最适 pH 为 7.08.0。接种前培养液的 pH 虽调节到这一范围，但在发酵过程中溶液的 pH 会因谷氨酸代谢的进行而发生改变，当 pH 高于或低于此范围值时，谷氨酸的产量均会下降。13细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌A. 接种针、手、培养基 B. 接种箱、手、接种针C. 培养基、
16、手、接种针 D. 接种针 、手、瓶口【答案】C【解析】通常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，用酒精对操作者的手进行消毒，对接种针、瓶口采用火焰灼烧的方法进行灼烧灭菌，接种箱可用紫外线照射的方法进行灭菌。综上所述，C 项正确，A、B、D 三项均错误。14某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，下列叙述不正确的是（ ）A. 采样与培养: 称取 1g 土样置于刚配置的液体培养基中，30 振荡培养B. 接种：为避免培养液中菌体浓度过高，需经过系列稀释后接种C. 选择：所用的固体培养基，作为唯一碳源的是淀粉D. 筛选：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，出现透明圈的说明此种菌能分解淀粉【答案
17、】A【解析】称量 1g 土样，应该置于经高压蒸汽灭菌的液体培养基中，才能在 30振荡培养，A 错误；为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行系列稀释（或“梯度稀释” ）处理，B 正确；分泌淀粉酶的芽孢杆菌能分泌淀粉酶，从而能利用淀粉，因此要分离该菌，应该将该菌液涂布接种于以淀粉为唯一碳源的固体培养基上，C 正确；将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是出现透明圈，则说明此种菌能够分泌淀粉酶使淀粉发生水解，从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用试卷第 7 页，总 10 页平板划线法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化，D 正确。二、非选择题15 生物 选修模块 1：
18、生物技术实践 （15 分）白僵菌具有高效的杀虫效果，现已应用于多种害虫的防治。白僵菌能溶解昆虫的表皮，并在虫体内生长繁殖，消耗虫体养分，产生各种毒素，导致害虫死亡。请回答下面的问题：（1）从多种微生物中分离白僵菌菌种的培养基属于 培养基，其成分包括 、 、水和无机盐，此外，培养基还应满足白僵菌生长对 、 以及氧气的要求。（2）纯化白僵菌时，常用的接种方法是稀释涂布平板法和 。稀释涂布平板法还可用于白僵菌的计数，为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数，但统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。对于需要长期保存的菌种，可以采用 的方法。（3）方离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行灭菌处
19、理，其中接种环应采用 灭菌的方法。【答案】 （1）选择，碳源 ，氮源（前后可换） ，PH 特殊营养物质（2 ）平板划线法 30-300 低 甘油管藏（3 ）灼烧【解析】略16塑料袋造成的“白色污染”早已成为地球公害，塑料袋的自然分解需要 201000 年不等。科学工作者从土壤中找到了一类假单胞杆菌，能将聚乙烯塑料的自然降解过程缩短至 3 个月，而且分解产物只有水和二氧化碳。从土壤中分离出聚乙烯降解菌的大致过程如下图）（1 ）图中“” 表示对土壤悬浮液进行一系列的，目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在 I 号培养基表面形成单个 。（2 ）从功能方面看，I 号培养基属于 培养基，其作
20、用是使目的菌能“脱颖而出”。如图采用的接种方法为 。使用号培养基的目的是使目的菌数目增多，培养基中必须包含水、无机盐、 、 等基本试卷第 8 页，总 10 页营养成分。（3 ）为避免杂菌污染培养物和环境，微生物培养的培养基在接种前和完成实验后都要进行 ；接种时要在 附近操作。【答案】 （1）梯度稀释 菌落（2）选择 稀释涂布平板法 碳源 氮源（3）灭菌 酒精灯火焰【解析】试题分析：（1）图中“”表示对土壤悬浮液进行一系列的梯度稀释，使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在 I 号培养基表面形成单个菌落。（2）I 号培养基使目的菌能“脱颖而出” ，说明该培养基属于选择培养基；图中菌落分布比较
21、均匀，可见其采用的接种方法为稀释涂布平板法。微生物的培养基中必须包含水、无机盐、碳源、氮源等基本营养成分，除外还应该有生长因子。（3）为避免杂菌污染培养物和环境，微生物培养的培养基在接种前和完成实验后都要进行灭菌；接种时要在酒精灯火焰附近操作。考点：微生物的分离和培养 17下图为通过花药培养获得月季花粉植株的一种途径。请回答下列相关问题。（1 ）选择花药时一般要通过 来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。一般来说，在 期，细胞核由中央移向细胞的一侧。为此，通常会选择 的花蕾，成功率最高。（2 ）胚状体也叫 ，一般是由某些脱分化的细胞转变而来，在形态上具有与 发育成的胚非常相似的结构，胚芽、胚轴
22、、胚根等结构完整，具有发育成完整个体的能力。（3 ）上述途径是通过胚状体阶段发育成植株，还可以将花粉在诱导培养基上先形成 ，再将其诱导分化成植株。（4 ）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入 染料，培养几种菌后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。（5 ）在培养过程中为了检验制备的培养基是否合格，采取的措施是 ，如果 ，说明培养基制备成功，否则需要重新制备。【答案】 （1）镜检 单核 完全未开放试卷第 9 页，总 10 页（2 ）
23、体细胞胚 合子 （3）愈伤组织（2 分） （4）酚红 （2 分） 刚果红（2 分）（5 ）设置未接种的空白培养基在相同的条件下培养（2 分） 空白培养基上没有长出菌落（2 分）【解析】试题分析：（1）选择花药时一般要通过显微镜检查来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞的一侧。为此，通常会选择完全未开放的花蕾，成功率最高。（2 ）胚状体也叫体细胞胚，一般是由某些脱分化的细胞转变而来，在形态上具有与合子发育成的胚非常相似的结构。 （3）上述途径是通过胚状体阶段发育成植株，还可以将花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。 （4）若在以尿素为唯一
24、氮源的培养基中加入酚红指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红染料，培养几种菌后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。（5 ）在培养过程中为了检验制备的培养基是否合格，采取的措施是设置未接种的空白培养基在相同的条件下培养，如果空白培养基上没有长出菌落，说明培养基制备成功，否则需要重新制备。考点：本题考查花药离体培养、微生物培养的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。18某班同学用新鲜苹果榨取果汁并制作果酒，其简要流程如下：（1 ）实验过程中，该小组同学发现榨取的果汁非常浑浊，解
25、决的方法是_。（2 ）分离酵母菌应使用_ (用途)培养基，固定化酵母细胞常采用_法，若想使这些酵母细胞能反复使用，实验过程中一定要注意_。（3 ）在酸性条件下，可用_来检测发酵产物中是否有酒精产生。若想进一步统计所得果酒中酵母菌的活菌数目，通常可采用_法。（4 ）发酵完成后，该班同学制作的果酒品质非常好，为方便后续年级使用，该班同学可将菌液采用_法在_环境中进行长久保存。试卷第 10 页，总 10 页【答案】 用果胶酶处理 选择 包埋 无菌条件（避免微生物的污染） 重铬酸钾 稀释涂布平板 甘油管藏 20【解析】 【试题分析】本题以“用新鲜苹果榨取果汁并制作果酒”为载体，考查果酒制作的原理、选择
26、培养基的选择作用、接种微生物常用的方法、菌种的保藏方法、果胶酶在果汁加工中的作用的知识，对相关知识的记忆和综合应用是解题的关键。考生可根据题意回顾相关知识，然后解答问题。（1）榨取的果汁非常浑浊是因为细胞壁的成分果胶的存在，根据酶的专一性，应用果胶酶处理。 （2） 分离酵母菌应使用选择培养基；由于酵母细胞比较大，不易吸附和结合，所以适合用包埋法固定化酵母细胞。若要使这些酵母细胞能反复使用，实验过程中一定要注意不能被杂菌污染。（3）橙色的重铬酸钾在酸性条件下可与酒精发生化学反应，变成灰绿色，所以可用重铬酸钾在酸性条件下来检测发酵产物中是否有酒精产生；液体中的酵母菌数目可用稀释涂布平板法来估测。（4）若要长期保持菌种，可以将菌液采用甘油管藏的方法，放在20的环境中进行长久保存。
