1、1蛋白质体外消化率（范文1 篇）以下是网友分享的关于蛋白质体外消化率的资料 1 篇，希望对您有所帮助，就爱阅读感谢您的支持。蛋白质体外消化率范文一动物蛋白质的胃蛋白酶消化率（体外消化）一、适用范围：本方法适用于动物性原料品质的判定。二、原理：用脱脂的样本在一个热的胃蛋白酶溶液中，稳定地不断搅拌约 16 小时，予以消化。测定它的蛋白质含量。这种方法不能用于植物蛋白质饲料原料或混合饲料，因为，它们所含复杂的碳水化合物是不能被胃蛋白酶消化的。将溶解了的蛋白质全部作为可消化的，并用其对粗蛋白质的百分2率来表示。三、设备：1、恒温水浴振荡器：452。2、测定粗蛋白质的全套设备。3、过滤装置。4、索氏脂肪
2、浸提器。四、试剂：除测定粗蛋白质用的试剂外，尚需以下试剂：1、0.2%胃蛋白酶溶液的配制：先稀释 6.1ml 盐酸到1L。在使用前，现配 0.2%胃蛋白酶溶液。2、所有胃蛋白酶应具有 1：3000 的活性。3、加热稀盐酸至 4245，然后加入胃蛋白酶 2g,轻轻地搅动，使其溶解（此时不要加热！） 。即得在 0.75mol/L盐酸中的 0.2%胃蛋白酶溶液。五、测定步骤：1、准确称取 1g 脱脂试样，放入 300ml 碘量瓶内，加入经过预热（4245）的 0.2%胃蛋白酶溶液 150ml，盖好塞子，在 45下边搅拌边消化 16 小时，消化后用滤纸过滤，然后用温水洗净滤纸上的不消化物。将不消化物连
3、同滤纸转入消化管中，按照测定粗蛋白质含量的方法，测定不消化物中的粗蛋白质含量。2、另取 1 份脱脂分析试样，按照测定粗蛋白质含量的方3法，测定其粗蛋白质含量。然后，根据消化的和不消化的粗蛋白质含量计算出试样的胃蛋白酶消化率。六、测定结果计算与分析：1、计算：动物蛋白质胃蛋白酶消化率（%）A-B 100A式中：A试样中粗蛋白质的含量（%） 。B试样中的不消化物粗蛋白质的含量（%） 。2、分析：合格的鱼粉，其粗蛋白质的胃蛋白酶消化率应不小于 85%；羽毛粉应在 75%以上。植物油脂检验 不皂化物测定法 GB 5535-85本标准适用于商品植物油不皂化物的测定。油脂中不皂化物即油脂皂化时，与碱不起作
4、用的，不溶于水的物质，包括留醇，脂溶性维生素的色素等。一、仪器和用具：锥形瓶：250 ml冷凝管恒温水浴锅电炉分液漏斗：250 ml量筒：50 ml4索氏抽提器电热恒温烘箱烧杯、试剂瓶等天平：感量 0.001 g二、试剂：1.0N 氢氧化钾乙醇溶液0.5N 氢氧化钾水溶液乙醇、乙醚中性乙醚乙醇混合液(2：1)三、操作方法：称取混匀试样 5g（W）注入锥形瓶中，加 1.0N KOH 乙醇溶液 50 ml，连接冷凝管，在水浴锅上煮沸约 30 min，煮到溶液清澈透明为止。用 50 ml 蒸馏水将皂化液转移入分液漏斗中，加入 50 ml 乙醚，趋温热时猛烈摇动 1 min 后，静止分层。将下层皂化液
5、放入第二只分液漏斗中，每次用 50 ml 乙醚提取两次。合并乙醚提取液，加水 20 ml 轻轻旋摇，待分层后，放出水层，每次再加水 20 ml 猛烈振摇洗涤两次。先后用 0.5N KOH 水溶液和水各 20 ml，充分振摇洗涤一次，如此再洗涤两次。最后用水洗至加酚酞指示剂时不显红色为止。用索氏抽提器回收乙醚，将抽提瓶中的残留物在 105温5度下烘 1h，冷却称重，再烘 30 min，直至恒重为止。将儿重后的残留物溶于 30 ml 中性乙醚乙醇中，用 0.02N 氢氧化钾滴定至粉红色。四、结果计算：油脂中不皂化物含量按下列公式计算：不皂化物（%）=100(W10.28VN)W式中：W1残留物重量
6、，gW试样重量，gV滴定所消耗的氢氧化钾溶液体积，mlN氢氧化钾溶液的当量浓度0.28每毫克当量的油酸重量，g双试验结果允许差不超过 0.2%，求其平均数，即为测定结果。测定结果取小数点后第一位。过氧化值的测定一、适用范围：本方法适用于油脂及动物性原料的测定。二、原理：油脂氧化过程中，产生的过氧化物，与碘化钾作用，生成游离碘；以硫代硫酸钠溶液滴定，计算含量。三、试剂：1、饱和碘化钾溶液：称取 14g 碘化钾，加 10ml 水溶解，6必要时微热加速溶解，冷却后贮于棕色瓶中。现用现配 。2、三氯甲烷冰乙酸混合液：量取 40ml 三氯甲烷，加60ml 冰乙酸，混匀。 3、0.02mol/L 硫代硫酸
7、钠标准溶液：称取 5g 硫代硫酸钠（Na2S2O3 5H2O） （或 3g 无水硫代硫酸钠） ，溶于 1000ml 水中，缓缓煮沸 10 分钟，冷却。放置两周后过滤备用。4、1% 淀粉指示剂：称取可溶性淀粉 0.5g，加入少许水调成糊状倒入 50ml 沸水中调匀，煮沸，现用现配。四、测定步骤：精确称取 23g 混匀的样品 ，置于 250ml 碘量瓶中，加30ml 三氯甲烷冰乙酸混合液，使样品完全溶解；加入1.00ml 饱和碘化钾溶液。紧密塞好瓶塞，并轻轻振摇0.5min，然后在暗处放置 5min，取出加 75ml 水，摇匀。立即用硫代硫酸钠标准溶液滴定，至淡黄色时，加 1ml 淀粉指示剂，继续
8、滴定至蓝色消失为终点。同时作空白试验。五、测定结果的计算与分析：1、计算：X=（V-V0）N0.1269/m式中：X样品的过氧化值，%。V样品消耗硫代硫酸钠溶液的体积，ml。V0空白消耗硫代硫酸钠溶液的体积，ml。N硫代硫酸钠标准溶液的麾尔浓度，mol/L 。70.12691N 硫代硫酸钠 1ml 相当于碘的克数。2、分析：油脂新鲜，其过氧化值不应大于 0.15%。附：0.02mol/L 硫代硫酸钠标准溶液的标定1、标定：精确称取 0.15g 于 120烘 3 小时至恒重的基准重铬酸钾，置于碘量瓶中，溶于 25ml 水，加 2g 碘化钾及 20ml 硫酸溶液（20%） ，摇匀，于暗处放置 10
9、min。加 150m 水，用配制好的硫代硫酸钠溶液滴定。近终点时加 3ml 淀粉指示液 (5g/L)，继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色。同时作空白试验。2、计算: C=m(V1V0)0.04903式中：C硫代硫酸钠标准溶液之物质的量浓度，mol/L。m重铬酸钾之质量，g。V1硫代硫酸钠溶液之用量，ml 。V0空白试验硫代硫酸钠标准溶液之用量，ml。004903与 1.00ml 硫代硫酸钠标准溶液【C=1.0mol/L】相当的以克表示的重铬酸钾的质量。挥发性盐基氮的测定(VBN)（半微量定氮法）8一、原理：挥发性盐基氮是指动物性食品由于酶和细菌的作用，在腐败过程中，使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱
10、性含氮物质。此类物质具有挥发性，在碱性溶液中蒸出后，用标准酸溶液滴定计算含量。二、试剂：氧化镁混悬液（10 g/L）：称取 1.0 g 氧化镁，加 100 ml水，振摇成混悬液。 硼酸吸收液（20 g/L）盐酸c（HCl）=0.010 mol/L或硫酸c（1/2 H2SO4）=0.010mol/L的标准滴定溶液。甲基红乙醇指示剂（2g/L）次甲基蓝指示剂（1g/L）临时将上述两种指示液等量混合为混合指示剂。三、仪器：半微量定氮器微量滴定管：最小分度 0.01 ml四、分析步骤：试样处理：将试样除去脂肪、骨及腱后，绞碎搅匀，称取约 10.0 g，置于锥形瓶中，加 100 ml 水，不时振摇，浸渍
11、 30 min 后过滤,滤液帜置冰箱备用。蒸馏滴定：将盛有 10 ml 吸收液及 5 滴6 滴混合指示液的锥形瓶置于冷凝管的下端，并使其下端插入吸收液的液9面下，准确吸取 5.0 ml 上述试样滤液于蒸馏器反应室内，加 5 ml 氧化镁混悬液(10 g/L) ，迅速盖塞，并加水以防漏气，通入蒸汽，进行蒸馏，蒸馏 5 min 即停止，吸收液用盐酸标准滴定溶液（0.010 mol/L）或硫酸标准滴定溶液滴定，终点至蓝紫色。同时做试剂空白试验。五、计算结果：试样中挥发性盐基氮的含量按式进行计算。 X=（V1V2 ）c14m5/100100式中：X试样中挥发性盐基氮的含量，单位为毫克每百克（mg/10
12、0g ） V1测定用样液消耗盐酸或硫酸标准溶液体积，单位为毫升（ml） V2试剂空白消耗盐酸或硫酸标准溶液体积，单位为毫升（ml） c盐酸或硫酸标准溶液的实际浓度，单位为摩尔每升（mol/L）14与 1.00ml 盐酸标准滴定溶液c（HCI）=1.000 mol/L或硫标准滴定溶液c （1/2 H2SO4）=1.000 mol/L相当的氮的质量，单位为毫克（mg）m试样质量，单位为克（g）计算结果保留三们有效数字。六、精密度：在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不10得超过算术平均值的 10%。三甲胺的测定一、原理：试样中总的含氮量减去载体及水溶氮的含氮量，再除以系数 10.03 即
13、为氯化胆碱的含量。二、仪器与试剂：同粗蛋白质的测定。三、测定步骤：1、精确称取 0.45g 左右样品测其含氮量，即为总氮 N 总。2、精确称取 1g 左右样品，放入带有定性滤纸的漏斗中，用蒸馏水冲洗 10 次左右，取出滤纸及残留物烘干，以凯氏定氮法测定含氮量，即为载体含氮量 N1。3、精确称取 3g 左右样品，用蒸馏水溶解，定容 100ml，放置 0.5 小时后，取上清液 5ml 进行蒸馏，测其含氮量，即为水溶氮。四、测定结果的计算与分析：1、计算：氮化胆碱含量%=10.03三甲胺的含量%=2、允许差：11两次平行测定结果绝对值不大于 1%，取其算术平均值为测定结果。 水溶氮的含量 14 N
14、总-N1-N2 59乌洛托品鉴别（六次甲基四胺）一、试剂和材料：氢氧化钾；硫酸溶液：6+100；钠氏试剂；氨制硝酸银溶液：称取 1.0g 硝酸银，置于 100ml 烧杯中，加 20ml 水溶解，在不断搅拌的同时滴定氨水溶液，至棕色沉淀几乎全部溶解后，过滤，滤液置于棕色试剂瓶中保存；红色石蕊试纸：变色范围 pH4.58.0（红蓝） ；二、鉴别方法：水剂样品，称取约 0.5g 实验室样品，加 10ml 水，为试验溶液。粉剂样品，称取约 2g 实验室样品，加 20ml 水溶解，过滤，弃去滤渣，为试验溶液。在试验溶液中，加 10ml 硫酸溶液，于电炉上加热、煮沸，用沾有氨制硝酸银溶液或钠氏试剂的试纸检
15、验产生的蒸汽，观察试纸颜色，若试纸颜色变黑，则加入 2g 氢氧化钾，继续加热产生的蒸汽能使润湿的红色石蕊试纸变蓝，证明有甲醛和氨产生，判定样品中含有六次甲基四胺。12油脂 TBA 值的测定方法一、原理：油脂受到光、热、空气中氧的作用，发生酸败反应，分解出醛、酸之类的化合物。丙二醛就是分解产物的一种，它能与 TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉红色化合物，在538nm 波长处有吸收高峰，利用此性质即能测出丙二醛含量，从而推导出油脂酸败的程度。二、试剂：TBA 水溶液：准确称取 TBA0.288g 溶于水中，并稀释至100ml（如 TBA 不易溶解，可加热至全溶澄清，然后稀释至 100ml） ，相当于
16、 0.02M；三氯乙酸混合液：准确称取三氯乙酸（分析纯）7.5g 及0.1gEDTA，用水溶解，稀释至 100ml；氯仿（分析纯） ；丙二醛标准溶液：称取 0.315g 1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀释至 1000ml，此溶液每 ml 相当于丙二醛 100ug，置于冰箱内保存。准确吸取 10ml，稀释至 100ml，此溶液每 ml 相当于丙二醛 10ug，备用。三、操作步骤：标准曲线的绘制准确吸取每相当于丙二醛 10ug 的标准溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml 置于纳氏比色管中，13加水至总体积为 5ml，加入 5mlTBA 溶液，然后按样品测定步骤进行，
17、测得光密度绘制标准曲线。样品测定：准确称取融化均匀的油脂样品 5-10g，置于 100ml 有盖三角瓶内，加入 25ml 三氯乙酸混合液，振摇半小时（保持油脂融溶状态，如冷结即在 70水浴上略微加热使之融化后继续振摇）用双层滤纸过滤，除去油脂。滤液重复用双层滤纸过滤一次。准确移取上述滤液 5ml 置于 25ml 比色管内，加入5mlTBA 溶液，混匀，加塞，置于 90水浴内保温40min，取出，冷却 1h，移入小试管内，离心 5min，上清液倾入 25ml 纳氏比色管中，加入 5ml 氯仿，摇匀，静置，分层，吸出上清液于 532nm 波长比色，对照标准曲线得到微克数（同时做空白试验） 。四、计
18、算丙二醛含量（mg/kg）=C205m式中：C从标准曲线查得丙二醛的微克数（ug）m样品质量（g）光密度：TBA （ A532/kg）=A532 （V1V2 ）VmV1100014式中：V油脂用三氯乙酸定容体积，ml V1取滤液体积，mlV2加 TBA 体积，ml饲料中粗脂肪的测定一、适用范围：本方法适用于各种单一、混合、配合饲料和预混料。二、原理：索氏脂肪提取器中用乙醚提取风干试样中的脂肪，计算样品的失重。其中失重除脂肪外，还有有机酸、磷脂、脂溶性维生素、叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。三、仪器设备：1、实验室用样品粉碎机或研钵。2、分析筛：孔径 0.45mm（40 目） 。3、
19、分析天平：感量 0.0001g。4、电热恒温水浴锅：室温100。5、干燥箱：50200。6、索氏脂肪提取器（带球形冷凝器）：100 或 150ml。7、滤纸：中速、脱脂。8、干燥器：用变色硅胶为干燥剂。9、棉线绳。15四、试剂：无水乙醚（分析纯） 。五、试样的选取和制备：取具有代表性试样，用四分法缩减至 50g，粉碎至 40 目。六、测定步骤：1、将棉线绳剪成适当大小置于无水乙醚中浸泡 24 小时（注意密闭、防火）后取出，晒干备用。将滤纸置于 105干燥箱中干燥 2 小时，取出称其恒重。2、将待测试样粉碎过 40 目后，取适量于 135干燥箱内干燥 40 分钟，制成风干样品。3、用分析天平精确
20、称取 2.5g 风干试样，置于预先标号恒重的滤纸中包好，并用处理好的棉线绳系好。4、滤纸包放于抽提管内，在抽提瓶中加入 60100ml 无水乙醚，在 4045的水浴中加热，使乙醚回流。待 3 小时左右（油高的 5 小时）用滤纸检查抽提管流出的乙醚，挥发后不留下油迹为抽提终点。5、取出试样后，置于恒重的铝盒内，于 135干燥箱内，恒重 40 分钟，并将棉线剪去，置于干燥器中冷却 30 分钟后，称重。七、测定结果的计算和表达：1、风干样中粗脂肪含量：16EE%= M0-（M3-M2-M1 ）M0其中：M0 为风干试样重， g。M1 为滤纸恒重，g。M2 为铝盒恒重，g。M3 为烘后铝盒 +滤纸包重
21、，g。2、原样中粗脂肪含量：EE%=（1-原样中水份含量）风干样中粗脂肪含量3、重复性：每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。粗脂肪含量在 10%以上（含 10%）允许相对偏差为3%；粗脂肪含量在 10%以下时，允许相对偏差为 5%。油脂酸败试验（间苯三酚试纸法）一、仪器和用具：恒温水浴锅电炉锥形瓶：50ml ，插有 5cm 长玻璃管的胶塞移液管、棕色瓶等二、试剂：间苯三酚试纸：取长 7cm、宽 4cm 的滤纸条，浸入 0.1% 17间苯三酚-乙醇溶液中，浸泡约 3min 后取出，阴干，装入棕色瓶中备用。直径约 2mm 的大理石颗粒或碳酸钙。盐酸3、操作方法：取间苯三酚试纸条安置
22、在锥形瓶胶塞的玻璃管内，再取试样 5ml 注入锥形瓶中，加盐酸 5ml，摇匀，立即加入大理石 56 粒，塞紧胶塞，在约 25的水浴中放置 20min。试纸变红为阳性，表示有醛类存在，试样已发生酸败；试纸呈黄色或橙色时为阴性。玉米脂肪酸值的测定一、原理：在室温下用无水乙醇提取玉米中的脂肪酸，用标准氢氧化钾溶液滴定，计算脂肪酸值。二、试剂和材料：除非另有规定，仅使用分析纯试剂。1、无水乙醇2、酚酞-乙醇溶液（10g/L）：1.0g 酚酞溶于 100ml 95%（V/V）乙醇。3、c（KOH）=0.01mol/L 氢氧化钾 -95%乙醇标准滴定溶液c （ KOH）=0.5mol/L 氢氧化钾标准储备
23、液的配制：18称取 28g 氢氧化钾，置于聚乙烯容器中，先加入少量无CO2 的蒸馏水（约 20ml）溶解，再将其稀释至 1000ml，密闭放置 24h。吸取上层清液至另一聚乙烯塑料瓶中。c （ KOH）=0.5mol/L 氢氧化钾标准储备液的标定精确称取在 105烘 2h 并在干燥器中冷却后的邻苯二甲酸氢钾 2.04g，溶于 50ml 不含 CO2 蒸馏水中，滴加酚酞-乙醇指示剂 35 滴，用配制的氢氧化钾标准储备液滴定至微红色，以 30s 不褪色为终点，记下所耗氢氧化钾标准储备液ml 数（ V1） ，同时做空白试验（不加邻苯二甲酸氢钾，同上操作） ，记下所耗氢氧化钾标准储备液 ml 数， （
24、V0） 。按下式计算氢氧化钾标准储备液浓度。C（KOH）=1000m(V1V0)204.22式中：c（KOH ）氢氧化钾标准储备液浓度，mol/L1000换算系数m称取邻苯二甲酸氢钾的质量，gV1滴定所耗氢氧化钾标准储备液体积，mlV0空白试验所耗氢氧化钾标准储备液体积，ml204.22邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量，g/mol注：氢氧化钾标准储备溶液按要求定时复标4、c（KOH）=0.01mol/L 氢氧化钾 -95%乙醇标准滴定溶液19准确移以 20.0ml 已经标定好的 0.5mol/L 氢氧化钾标准储备液，用 95%（V/V）乙醇稀释定容至 1000ml，盛放于聚乙烯塑料瓶中，临用前稀释。三
25、、仪器与设备：具塞磨口锥形瓶：250ml移液管：50.0ml 、 25.0ml微量滴定管：5ml，最小刻度为 0.02ml；10ml，最小刻度为 0.05ml天平：感量为 0.01g振荡器：往返式，振荡频率为 100 次/min四、分析步骤：1、试样处理：称取约 10g 试样，精确到 0.01g，于 250ml 具塞磨口锥形瓶中，并用移液管准确加入 50.0ml 无水乙醇，置往返式振荡器上振荡 10min，频率为 100 次/min。静置 12min，在玻璃漏斗中放入折叠滤纸过滤，并加盖滤纸。弃去最初几滴滤液，收集滤液 25ml 以上。2、测定：精确称取 25.0ml 滤液于 150ml 锥形
26、瓶中，加 50ml 不含CO2 的蒸馏水，滴加 34 滴酚酞-乙醇指示剂后，用0.01mol/L 的氢氧化钾 -95%乙醇标准溶液滴定至呈微红色，30s 不消褪为止。记下耗用的氢氧化钾-95%乙醇溶液体积20（V1）注：样品提取后一定要及时滴定，滴定应在散射日光或日光灯下对着光源方向进行，滴定终点不易判定时，可用已加去CO2 蒸馏水后尚未滴定的提取液作参照，当被滴定液颜色与参照相比有色差时，即可视为已到滴定终点。3、空白试验：取 25.0ml 无水乙醇于 150ml 锥形瓶中，加 50ml 不含CO2 的蒸馏水，滴加 34 滴酚酞-乙醇指示剂，用0.01mol/L 的氢氧化钾 -95%乙醇溶液
27、滴定至呈微红色，30s不消褪为止。记下耗用的氢氧化钾-95%乙醇溶液体积（V0）五、结果计算：脂肪酸值（KOHmg/100g ）=11220(V1V0)cm100100w式中：V1滴定试样所耗氢氧化钾-95%乙醇溶液体积，mlV0滴定空白所耗氢氧化钾-95%乙醇溶液体积，mlc 氢氧化钾 -95%乙醇溶液的准确浓度，mol/L50提取试样用无水乙醇的体积，ml2125用于滴定的滤液的体积，ml100换算为 100g（干）试样的质量，gm试样的质量，gw试样水分百分数，即每 100g 试样中含水分的质量，g六、结果表示：每份试样取两个平等样进行测定，以其算术平均值为测定结果，计算结果保留小数点后
28、一位数。七、重复性：同一分析者对同一试样同时进行两次测定，结果差值不超过 2mgKOH/100g。氟的测定离子选择性电极法 原理：氟离子选择电极的氟化镧单晶膜对氟离子产生选择性的对数响应，氟电极和饱和甘汞电极在被测试液中，电位差可随溶液中氟离子的活度的变化而改变，电位变化规律符合能斯特方程式（E=E-2.303RTFlgcF） 。E 与 lgcF 呈线性关系。2.303RT/F 为该直线的斜率（25时为 59.16） 。在水溶液中，易与氟离子形成络合物的三价铁（Fe3+） 、22三价铝（Al3+ ）及硅酸根（SiO32- ）等离子干扰氟离子测定，其他常见离子对氟离子测定无影响。在测量溶液的酸度
29、为 pH56，用总离子强度缓冲液消除干扰离子及酸度的影响。 试剂和溶液试剂均为分析纯；实验室用水应符合 GB/T6682 中三级用水的规格；全部溶液贮于聚乙烯塑料瓶中。 c（CH3COONa3H2O ）=3mol/L 乙酸钠溶液称取 204g 乙酸钠（CH3COONa3H2O） ，溶于约 300ml水中，待溶液温度恢复到室温后，以 1mol/L乙酸（GB/T 676）调节至 pH7.0，移入 500ml 容量瓶，加水至刻度。 c（Na3C6H5O72H2O ）=0.75mol/L 柠檬酸钠溶液称取 110g 柠檬酸钠（Na3C6H5O72H2O） ，溶于约300ml 水中，加高氯酸（HClO4
30、）14ml，移入 500ml 容量瓶，加水至刻度。 总离子强度缓冲液乙酸钠溶液（1）与柠檬酸钠溶液（2）等量混合，临用时配制。 c（HCl）=1mol/L 盐酸溶液量取 10ml 盐酸（ GB/T622） ，加水稀释至 120ml。23 氟标准溶液氟标准贮备液：称取经 100干燥 4h 冷却的氟化钠（GB/T 1264）0.2210g ，溶于水，移入 100ml 容量瓶中，加水至刻度，混匀，贮备于塑料瓶中，置冰箱内保存，此液每毫升相当于 1.0mg 氟。氟标准溶液：临用时准确吸取氟贮备液 10.00ml 于 100ml容量瓶中，加水至刻度，混匀。此液每毫升相当于 100.0ug氟。氟标准稀溶液
31、：准确吸取氟标准溶液 10.00ml 于 100ml容量瓶中，加水至刻度，混匀，此液每毫升相当于 10.0ug氟。即配即用。 仪器、设备氟离子选择电极：测量范围 10-1mol/L510-7mol/L，pF-1 型或与之相当的电极。 甘汞电极：232 型或与之相当的电极。磁力搅拌器。酸度计：测量范围 0.0-1400mV，pHS-3 型或与之相当的酸度计或电位计。 分析天平：感量 0.0001g。纳氏比色管：50ml。容量瓶：50，100ml。超声波提取器。 试样制备24取具有代表性的样品 2kg，以四分法缩分至约 250g，粉碎，过 0.42mm 孔筛，混匀，装入样品瓶，密闭保存，备用。 分
32、析步骤 氟标准工作液的制备吸取氟标准稀溶液 0.50、1.00、2.00、5.00、10.00ml，再吸取氟标准溶液 2.00、5.00ml，分别置于 50ml 容量瓶中，于各容量瓶中分别加入盐酸溶液 5.00ml，总离子强度缓冲液 25ml，加水置刻度，混匀。上述标准工作液的浓度分别为 0.1、0.2、0.4、1.0、2.0、4. 0、10.0ug/ml。 试液制备a、饲料试液制备（除饲料级磷酸盐外）精确称取约含 2000ug 氟的试样（精确至 0.0002g） ，置于50ml 纳氏比色管中，加入盐酸溶液 5.0ml，密闭提取1h（不时轻轻摇动比色管） ，应尽量避免样品粘于管壁上，或置于超声
33、波提取器中密闭提取 20min。提取后加总离子强度缓冲液 25ml，加水置刻度，混匀，干过滤。滤液供测定用。b 、磷酸盐试液制备准确称取 0.51g 试样（精确至 0.0002g）置于 100ml 容量瓶中，用盐酸溶液溶解并定容至刻度，混匀。取 5.00ml溶解液至 50ml 容量瓶中，加入 25ml 总离子强度缓冲液，25加水至刻度，混匀。供测定用。 测定将氟电极和甘汞电极与测定仪器的负端和正端联接，将电极插入盛有水的 50ml 聚乙烯塑料烧杯中，并预热仪器，在磁力搅拌器上以恒速搅拌，读取平衡电位值，更换 23次水，待电位值平衡后，即可进行标准液和试样液的电位测定。由低到高浓度分别测定氟标准
34、工作液的平衡电位。同法测定试液的平衡电位。以平衡电位为纵坐标，氟标准工作液的氟离子浓度为横坐标，用回归方程计算或半对数坐标纸上绘制标准曲线。每次测定均应同时绘制标准曲线。从标准曲线上读取试液的氟离子浓度。 分析结果计算和表述 饲料中氟含量计算饲料（除饲料添加剂级磷酸盐外）按式计算出试样中氟的含量： X=501000m1000m50 式中：X试样中氟的含量，mg/kg；试样中氟的浓度，ug/ml；m试样质量，g；50测试液体积，ml。26磷酸盐按式计算出试样中氟的含量： X=501000m10001005m1000 结果表示每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果，结果表示到 0.1m
35、g/kg。 允许差同一分析者对同一饲料同时或快速连续地进行两次测定，所得结果之间的相对偏差： 在试样中氟含量小于或等于50mg/kg 时，不超过 10%；在试样中氟含量大于 50mg/kg 时，不超过 5%。饲料酸结合力的测定方法仪器设备：酸度计，恒温磁力搅拌器，温度计，微型植物试样粉碎机，恒温水浴锅，250ml 与 1000ml 容量瓶，酸式滴定管，250ml 烧杯，分样筛，铁架台，玻棒。试剂：1.00mol/L 的盐酸：取 80 ml 浓度为 3637%的浓盐酸，用 1000ml 容量瓶进行定容，再用硼砂进行滴定，滴加盐酸或 NaOH 校准浓度。标准缓冲剂：pH4.00（25）与 pH6.
36、86（25）两种。27饲料样品：采取一定数量的玉米、豆粕、小麦、菜粕、棉粕、次粉、小麦麸、鱼粉、磷酸氢钙、石粉、乳清粉、酸化剂、玉米蛋白粉、肉粉等饲料样品，粉碎并通过一定规格的分样筛。测定方法：粉碎的样品进行筛分（植物油脂检验 皂化值的测定 GB 5524一、定义：在规定条件下皂化 1g 油脂所需的氢氧化钾毫克数为皂化值。二、原理：在回流条件下将样品和氢氧化钾-乙醇溶液一起煮沸，随后用标定的盐酸溶液滴定过量的氢氧化钾。三、试剂：所有试剂必须是分析纯级，使用水为蒸馏水或与其相当纯度的水。1、氢氧化钾：大约 0.5mol/L 氢氧化钾溶解在95%（V/V）乙醇中。此溶液应为无色或淡黄色。通过下列步
37、骤可制得稳定的无色溶液。将 8g 氢氧化钾和 5g 铝片入在 1L 乙醇中回流 1h，立刻蒸馏。将需要量的氢氧化钾溶解于蒸馏物中，静置数天，然后倾出清亮的上层清液而除去碳酸钾沉淀。将此液贮存28在配有橡皮塞的棕色或黄色玻璃瓶中备用。2、盐酸标准滴定溶液：c（HCI ）=0.5mol/L3、酚酞 10g/L 溶于 95%（V/V）乙醇，或碱性蓝6B20g/L 溶于 95%（V/V）乙醇。4、助沸物：玻璃珠或瓷粒。四、仪器：1、锥形瓶：容量 250ml，耐碱玻璃制成，带有磨口。2、回流冷凝管：带有连接锥形瓶的磨玻璃接头。3、加热装置：如水浴锅、电热板或其他适合的仪器，不能用明火加热。4、滴定管：容
38、量 50ml，最小刻度为 0.1ml。5、移液管：容量 25ml。五、步骤：1、称取 2g，准确到 0.005g 的试验样品于锥形瓶中。注：以皂化值 170200 为依据，被测样量为 2g。对于其他范围皂化值，样量将以约一半氢氧化钾乙醇溶液被中和为依据而改变。2、用移液管将 25.0ml 氢氧化钾-乙醇溶液加到试样中，并加入一些助沸物，连接回流冷凝管与锥形瓶，并将锥形瓶放在加热装置上慢慢煮沸，不时摇动，油脂维持沸腾状态 60min。难于皂化的需煮沸 2h。加 0.51ml 酚酞指示剂于热溶液于，并用标准体积盐酸溶29液滴定到指示剂的粉色刚消失。如果皂化液是深色的，则用 0.51ml 的碱性蓝
39、6B 溶液。3、空白试验：按照以上步骤，不加试样，再用 25.0ml 的氢氧化钾-乙醇溶液进行空白试验。六、结果计算：皂化值（SV）=(V0V1)c56.1m式中：V0空白试验所消耗的盐酸标准滴定溶液的体积，mlV1试样所消耗的盐酸标准滴定溶液的体积，mlc 盐酸标准滴定溶液的实际浓度，mol/Lm试样的质量，g假如符合重复性要求，取两次测定的算术平均值作为结果， （结果保留一位小数）七、重复性：同一分析者使用相同仪器相继或同时进行同一试样的两次测定值之差应不超过其算术平均值的 0.5%（相对） 。组胺的测定方法1、原理：鱼体中组胺用正戊醇提取，遇偶氮试剂显橙色，与标准系列比较定量。302、试
40、剂：正戊醇三氯乙酸溶液（100g/L）碳酸钠溶液（50g/L）氢氧化钠溶液（250g/L）盐酸（1：11）组胺标准储备液：准确称取 0.2767g 于 1005干燥 2h 的磷酸组胺溶于水，移入 100ml 容量瓶中再加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于 1.0mg 组胺。磷酸组胺标准使用液：吸取 1.0ml 组胺标准溶液，置于50ml 容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于20.0g 组胺。偶氮试剂如下：甲液：称取 0.5g 对硝基苯胺，加 5ml 盐酸溶液溶解后，再加水稀释至 200ml，置冰箱中。乙液：亚硝酸钠溶液（5g/L） ，临用现配。吸取甲液 5ml、乙液 40ml 混全后立即使用。3、分析步骤：称取 5.00g10.00g 绞碎并混和均匀的试样，置于具塞锥形瓶中，加入 15ml20ml 三氯乙酸溶液，浸泡 2h3h，过滤。吸取 2.0ml 滤液，置于分液漏斗中，加氢氧化钠溶液
