1、1第一章 绪 论一、名词解释1、生物化学 2、生物大分子二、填空题1、生物化学的研究内容主要包括 、 和 。2、生物化学发展的三个阶段是 、 和 。3、新陈代谢包括 、 和 三个阶段。4、“Biochemistry ”一词首先由德国的 于 1877 年提出。5、在前人工作的基础上，英国科学家 Krebs 曾提出两大著名学说 和 。6、水的主要作用有以下四个方面 、 、 和 。三、单项选择题1. 现代生物化学从 20 世纪 50 年代开始，以下列哪一学说的提出为标志：ADNA 的右手双螺旋结构模型 B.三羧酸循环 C.断裂基因 D.基因表达调控2. 我国生物化学的奠基人是：A.李比希 B.吴宪
2、C.谢利 D.拉瓦锡3. 1965 年我国首先合成的具有生物活性的蛋白质是：A.牛胰岛素 B.RNA 聚合酶 C.DNA 聚合酶 D.DNA 连接酶4. 生物化学的一项重要任务是：A.研究生物进化 B.研究激素生成 C.研究小分子化合物 D.研究新陈代谢规律及其与生命活动的关系5. 1981 年我国完成了哪种核酸的人工合成：A.清蛋白 mRNA B.珠蛋白 RNA C.血红蛋白 DNA D.酵母丙氨酸 tRNA参 考 答 案一、名词解释1、生物化学又称生命的化学，是研究生物机体(微生物、植物、动物)的化学组成和生命现象中化学变化规律的一门科学。2、分子量比较大的有机物，主要包括蛋白质、核酸、多
3、糖和脂肪。二、填空题1、生物体的物质组成、新陈代谢、生物分子的结构与功能 2、静态生物化学阶段、动态生物化学阶段、现代生物化学阶段3、消化吸收、中间代谢、排泄4、霍佩赛勒5、鸟氨酸循环、三羧酸循环26、参与物质代谢反应、是体内诸多物质的良好溶剂、维持体温相对恒定、物质分解产生的水是体内水的一个来源三、单项选择题1. A 2. B 3. A 4. D 5. D 第二章 核酸的化学一、名词解释1、核苷 2、核苷酸 3、核苷多磷酸 4、DNA 的一级结构 5、DNA 的二级结构 6、核酸的变性 7、增色效应 8、Tm 9、核酸的复性 10、减色效应 11、退火 12、淬火 13、核酸探针 14、DN
4、A 双螺旋结构的多态性二、填空题1、研究核酸的鼻祖是_，但严格地说，他分离得到的只是 。2、 等人通过著名的肺炎双球菌转化试验，证明了导致肺炎球菌遗传性状改变的转化因子是 ，而不是 。3、真核细胞的 DNA 主要存在于 中，并与 结合形成染色体。原核生物 DNA 主要存在于 。4、在原核细胞中，染色体是一个形状为 的双链 DNA；在染色体外存在的，能够自主复制的遗传单位是 。5、DNA 的中文全称是 ，RNA 的中文全称是 ；DNA 中的戊糖是 ，RNA中的戊糖是 。6、细胞质中的 RNA 主要包括三种类型，即 、 及 ，其中文全称分别是 、 及 。7、组成核酸的基本结构单位是 ，其由 、 和
5、 3 种分子组成。8、核苷分子中，嘧啶碱基与戊糖形成 键；而嘌呤碱基与戊糖形成 键。9、构成 RNA 和 DNA 的核苷酸不完全相同， RNA 含有 ，DNA 中相应的核苷酸是 。 10、DNA 分子相邻的两个核苷酸分子通过 键相连，此键是由一个核苷酸分子的 与相邻的核苷酸分子的 相连形成。11、GATCAA 这段序列的写法属于 缩写，其互补序列为 。12、1953 年， 和 提出了 DNA 右手双螺旋结构模型。13、稳定 DNA 结构的因素主要有 、 和 。14、一般说，核酸及其降解物核苷酸对紫外光产生光吸收的最大吸光波长为 。15、根据真核细胞组蛋白的 比值不同，可将组蛋白分为五种,其中
6、H2A、H2B、H3 和 H4 各3分子聚合形成组蛋白 聚体，其形状为 。16、如果每个体细胞的 DNA 量为 6.4109 个碱基对，那么细胞内 DNA 的总长度是 米。三、单项选择题1 在天然存在的核苷中，糖苷键都呈 构型。A. - B. - C. - D. - 2Watson-Crick 式的 DNA 双螺旋结构属于一型。A. A B. B C. C D. Z3 tRNA3-端的序列为 。A. ACC B.CAC C.ACA D.CCA4下列叙述中 是对的。A. RNA 的浮力密度大于 DNA 的 B. 蛋白质的浮力密度大于 DNA 的C. 蛋白质的浮力密度大于 RNA 的 D. DNA
7、 的浮力密度大于 RNA 的5决定 tRNA 携带氨基酸特异性的关键部位是：AXCCA3-端 BTC 环 CDHU 环 D反密码子环6含有稀有碱基比例较多的核酸是： A胞核 DNA B线粒体 DNA CtRNA D mRNA7真核细胞 mRNA 帽子结构最多见的是：Am 7APPPNmPNmP B m7GPPPNmPNmP Cm 7UPPPNmPNmP Dm 7CPPPNmPNmP 8 DNA 变性后理化性质有下述改变：A对 260nm 紫外吸收减少 B溶液粘度下降 C磷酸二酯键断裂 D核苷酸断裂9双链 DNA 的 Tm 较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致：AA+G BC+T CA+T DG
8、+C 10真核生物 mRNA 的帽子结构中，m 7G 与多核苷酸链通过三个磷酸基连接，连接方式是：A2-5 B3-5 C5-5 D3-3 11下列对于环核苷酸的叙述，哪一项是错误的？AcAMP 与 cGMP 的生物学作用相同 B 重要的环核苷酸有 cAMP 与 cGMPCcAMP 是一种第二信使 DcAMP 分子内有环化的磷酸二酯键12真核生物 DNA 缠绕在组蛋白上构成核小体，核小体含有的蛋白质是：AH1、H2、 H3、H4 各两分子 BH1A、H1B、 H2B、H2A 各两分子CH2A、H2B、H3A、H3B 各两分子 DH2A、H2B、H3 、H4 各两分子四、多项选择题1. 下列关于环
9、核苷酸的叙述，正确的有： A环核苷酸在动物、植物、微生物中普遍存在 BcAMP 和 cGMP 被称为第二信使4CcAMP 在细胞内含量很少，但生理功能极其重要 DADP 经腺苷酸环化酶催化生成 cAMPE. cAMP 属于缩小激素作用的信号，cGMP 属于放大激素作用的信号2. 关于 tRNA 的三级结构，下列叙述正确的有： A呈倒 L 形构象 B不同种类 tRNA 的三级结构有很大差异CtRNA 在结合氨基酸和阅读 mRNA 时，可发生一定程度的构象变化 D各种 tRNA 的三级结构基本相同 E. 具有三级结构的 tRNA 可携带特异氨基酸进入核糖体 3. 下列关于染色体的叙述，正确的有：
10、A真核细胞中，组蛋白的碱性中和 DNA 的酸性而成为稳定的核小体B组蛋白富含谷氨酸和精氨酸 C每个核小体含有 4 个组蛋白分子 D染色体泛指病毒、细菌、真核细胞或细胞器中遗传信息库中的核酸分子E. H1 组蛋白与连接核小体之间的 DNA 分子结合 4. DNA 分子具有以下性质： ADNA 为白色纤维状固体 B微溶于水，但不溶于一般有机溶剂 C在水中仍可保持双螺旋结构 D具有一定的粘性 E. 盐浓度会影响 DNA-蛋白质的溶解度 5Tm 值受下列因素的影响：ADNA 的均一程度 BDNA 的碱基组成 C溶液的离子强度 DDNA 分子中 G+C 含量E. 溶液的 pH 值 五、判断并改错1 （
11、）病毒分子中，只含有一种核酸。2 （ ）真核细胞的线粒体和叶绿体中也含有 DNA。3 （ ）snRNA 为迁移性 RNA。4 （ ）氢键是稳定 DNA 二级结构的最主要因素。5 （ ）不同来源的同一类 RNA 其碱基组成相同。6 （ ）5.8S rRNA 是真核生物核糖体所特有的。7 （ ）原核细胞（如大肠杆菌）的 mRNA 半寿期较短（几秒或几分钟） ，而真核细胞的则较长。8 （ ）生物体内，天然存在的 DNA 分子多为负超螺旋，但体外可得到正超螺旋。9 （ ）核酸不溶于一般有机溶剂，常常用乙醇沉淀的方法来获取核酸。10 （ ）用 1mol/L 的 KOH 溶液水解核酸，DNA 及 RNA
12、的水解情况相同。11 （ ）DNA 热变性后浮力密度增加，黏度下降。12 （ ）当 pH 高于 4 时，DNA 分子带正电。513 （ ）核酸分子的紫外吸收值比其所含核苷酸单体的紫外吸收值的总和要低。14 （ ）DNA 适宜于保存在极稀的电解质溶液中。15 （ ）对于提纯的 DNA 样品，测得 OD260/OD280 pI 时，蛋白质带 电荷，在直流电场中，向 极移动。11、当氨基酸处于等电点状态时，其溶解度 ，利用这一特性可以从各种氨基酸的混合物溶10液中分离制备某种氨基酸。12、在弱酸性条件下，氨基酸与茚三酮反应生成 物质，该反应可用于氨基酸的定性和定量分析。13、Sanger 试剂是指
13、。14、肽链中的氨基酸由于参加肽键的形成已经不是原来完整的分子，因此称为 。15、除了末端修饰和环状多肽链外，一条多肽链的主链通常在一端含有一个游离的末端氨基，称为 ，在另一端含有一个游离的末端羧基，称为 。16、蛋白质分子具有复杂的、特定的结构，大体上分为 和 ，后者又分为 、 、 、 与 。17、蛋白质分子构象主要靠 、 、 与 等非共价键维持，在某些蛋白质中 、 也参与维持构象。18、蛋白质的 3.613 螺旋结构中，3.6 的含义是 ，13 的含义是 。19、血红蛋白是含有 辅基的蛋白质，其中的 离子可以结合 1 分氧。20、关于蛋白质变性的概念与学说是我国生物化学家 于 世纪 年代首
14、先提出的，至今仍为人们所承认。21、1965 年，我国科学家在世界上首次人工合成出具有生物活性的蛋白质 。 22、血红蛋白的氧饱和曲线是 型，肌红蛋白的氧饱和曲线为 型。23、蛋白质电泳速度一般用 来表示，其大小与蛋白质分子的 、形状和所带 有关。24、蛋白质溶液具有胶体的性质，其分散于水中的颗粒直径约为 nm，使蛋白质溶液稳定的两因素是蛋白质分子表面的 和 。25、常用的测定蛋白质含量的方法有 、 、 、 与 。26、肌红蛋白分子是由一条含 个氨基酸残基的多肽链和一个 辅基构成，多肽链含有 8段右手 ，血红素分子位于疏水的凹穴内。27、加入低浓度的中性盐可使蛋白质溶解度_，这种现象称为_，而
15、加入高浓度的中性盐，当达到一定的盐饱和度时，可使蛋白质的溶解度_并_沉淀析出_,这种现象称为_,蛋白质的这种性质常用于_。28、鉴定蛋白质多肽链氨基末端常用的方法有_和_。29、将分子量分别为 a（90 000） 、b（45 000） 、c （110 000）的三种蛋白质混合溶液进行凝胶过滤层析，它们被洗脱下来的先后顺序是_。30、今有甲、乙、丙三种蛋白质，它们的等电点分别为 8.0、4.5 和 10.0,当在 pH8.0 缓冲液中，它们在电场中电泳的情况为：甲_，乙_，丙_。三、单项选择题1. 下列哪种氨基酸为必需氨基酸？11A.天冬氨酸 B.谷氨酸 C.蛋氨酸 D.丙氨酸2. 侧链含有巯基
16、的氨基酸是：A.甲硫氨酸 B.半胱氨酸 C.亮氨酸 D.组氨酸3. 属于酸性氨基酸的是:A.亮氨酸 B.蛋氨酸 C.谷氨酸 D.组氨酸4. 不参与生物体内蛋白质合成的氨基酸是:A.苏氨酸 B.半胱氨酸 C.赖氨酸 D.鸟氨酸5. 下列那种氨基酸属于非蛋白质氨基酸A.天冬氨酸 B.甲硫氨酸 C.羟脯氨酸 D.谷氨酰胺6. 在生理条件下，下列哪种氨基酸带负电荷？A.精氨酸 B.组氨酸 C.赖氨酸 D.天冬氨酸7. 蛋白质分子和酶分子的巯基来自：A.二硫键 B.谷胱甘肽 C.半胱氨酸 D.蛋氨酸8. 下列哪组氨基酸是人体必需氨基酸：A.缬氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、赖氨酸 B.蛋氨酸、苏氨酸、甘氨酸、组氨
17、酸C.亮氨酸、苏氨酸、赖氨鞭、甘氨酸 D.谷氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、色氨酸9. 蛋白质吸收紫外线能力的大小，主要取决于：A.碱性氨基酸的含量 B.肽链中的肽键 C.芳香族氨基酸的含量 D.含硫氨基酸的含量10. 蛋白质多肽链的局部主链形成的 -螺旋主要是靠哪种化学键来维持的？A.疏水键 B.配位键 C.氢键 D.二硫键11. 下列哪种蛋白质结构是具有生物活性的结构？A.一级结构 B.二级结构 C.超二级结构 D.三级结构12. 某混合溶液中的各种蛋白质的等电点分别是 4.8、5.4、6.6、7.5，在下列哪种缓冲液中电泳才可以使上述所有蛋白质泳向正极？A.8.0 B.7.0 C.6.0 D.4
18、.0 13. 蛋白质的空间构象主要取决于：A.氨基酸残基的序列 B.-螺旋的数量 C.肽链中的肽键 D.肽链中的二硫键位置14. 下列关于蛋白质四级结构的描述正确的是：A.蛋白质都有四级结构 B.蛋白质四级结构的稳定性由共价键维系C.蛋白质只有具备四级结构才具有生物学活性 D. 具有四级结构的蛋白质各亚基间靠非共价键聚合15. 胰岛素分子 A 链和 B 链的交联是靠：A.盐键 B.二硫键 C.氢键 D.疏水键16. 含有 88 个氨基酸残基的 -螺旋的螺旋长度是：12A.13.2nm B.11.7nm C.15.2nm D.11.2nm17. 对具有四级结构的蛋白质进行分析：A.只有一个游离的
19、 -羧基和一个游离的 -氨基。B.只有游离的 -羧基，没有游离的 -氨基。C.只有游离的 -氨基，没有游离的 -羧基。D.有两个或两个以上的游离的 -羧基和 -氨基。18. 蛋白质多肽链具有的方向性是：A.从 3-端到 5-端 B.从 5-端到 3-端 C.从 C 端到 N 端 D.从 N 端到 C 端19. 在凝胶过滤(分离范围是 5 000400 000) 时，下列哪种蛋白质最先被洗脱下来：A.细胞色素 C(13 370) B.肌红蛋白(16 900) C.清蛋白(68 500) D.过氧化氢酶(247 500)20. 煤气中毒的原因是：A. 肌红蛋白与 CO2 结合导致机体缺氧 B.肌红
20、蛋白与 CO 结合导致机体缺氧 C. 血红蛋白与 CO 结合导致机体缺氧 D. 血红蛋白与 CO2 结合导致机体缺氧四、多项选择题1. 脯氨酸属于：A.碱性氨基酸 B.非极性疏水氨基酸 C.极性中性氨基酸 D.亚氨基酸 E.以上都不是2. 有关谷胱甘肽的描述正确的是：A.体内重要的还原剂 B.由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的三肽C.功能基团是巯基 D.各氨基酸之间均由 -氨基和 -羧基缩合而成E.是动、植物细胞中一种重要的三肽3. 有关肽键的描述正确的是：A.肽键属于一级结构内容 B.肽键具有部分双键性质 C.肽键中 C-N 键所连的四个原子处于同一平面D.肽键中 C-N 键长度比 N-Ca
21、单键短 E.肽键旋转形成了 -折叠4. 下列哪些氨基酸分子中含硫元素?A.亮氨酸 B.蛋氨酸 C.半胱氨酸 D.苯丙氨酸 E.色氨酸5. 常用的测定蛋白质相对分子质量的方法有：A.分子筛层析法 B.SDS-PAGE C.双缩脲法 D.凯氏定氮法 E.Folin-酚法6分离纯化蛋白质的主要方法有：A. 分光光度法 B.分子筛层析法 C.双缩脲法 D.离心法 E.电泳7变性蛋白质同天然蛋白质的区别在于：A. 变性蛋白质生物活性丧失 B. 蛋白质变性后空间结构发生改变C. 蛋白质变性后一级结构发生改变 D. 蛋白质变性后黏度增加E. 蛋白质变性后更容易被蛋白酶水解五、判断并改错1.（ ）非必需氨基酸
22、是指对动物来说基本不需要的氨基酸。132.（ ）1953 年，英国的 Sanger 等人首次完成了牛胰岛素的全部化学结构的测定工作。3.（ ）多肽链主链骨架是由许许多多肽单位(肽平面)通过 -碳原子连接而成的。4.（ ）蛋白质前体激活的本质就是有活性的蛋白质构象的形成过程。5.（ ）蛋白质变性时，天然蛋白质分子的空间结构与一级结构均被破坏。6.（ ）在分子筛层析时，分子量较小的蛋白质首先被洗脱出来。7 （ ）因为苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸具有紫外吸收的能力，所以可用紫外吸收法测定样品中蛋白质的含量。8 （ ）肌红蛋白是具有典型三级结构的蛋白质分子，其分子中的 Fe2+可与 1 个氧分子结合。9
23、（ ）双缩脲反应可被用于蛋白质的定性鉴定和定量测定。10 （ ）肌红蛋白与氧的亲和力大，能在氧分压低的情况下迅速与氧结合成接近饱和的状态，其氧结合曲线呈双曲线，而肌红蛋白适于在肌肉中贮存氧。11.（ ）甘氨酸的解离常数分别是 pK1=2.34 和 pK2=9.60，它的等电点（pI）是 5.97。六、问答题1. 为什么说蛋白质是生命活动所依赖的重要物质基础？2谷胱甘肽分子在结构上有何特点？有何生理功能？3. 简述蛋白质前体的激活。4. 简述蛋白质变性与沉淀的关系。5. 蛋白质的变性作用有哪些实际应用？6. 概述蛋白质一级结构测定的一般程序。7. 比较血红蛋白和肌红蛋白的氧合能力。8解释血红蛋白
24、的“S 形”氧合曲线及其意义。 9. 试论蛋白质结构与其功能的关系。10. 试论蛋白质一级结构与空间结构的关系。11. 概述凝胶过滤法测蛋白质相对分子质量的原理。12. 概述 SDS-PAGE 法测蛋白质相对分子质量的原理。13简述蛋白质的抽提原理和方法。14. 根据蛋白质一级氨基酸序列可以预测蛋白质的空间结构。假设有下列氨基酸序列： Ile-Ala-His-Thr-Tyr-Gly-Pro-Glu-Ala-Ala-Met-Cys-Lys-Try-Glu-Ala-Gln-Pro-Asp-Gly-Met-Glu-Cys-Ala-Phe-His-Arg （1）预测在该序列的哪一部位可能会出卷曲或 -
25、转角。（2）何处可能形成链内二硫键？（3）假设该序列只是大的球蛋白的一部分，试分析在天冬氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸、谷氨酰胺和赖氨酸中，哪些可能分布在该蛋白的外表面，哪些分布在内部？参 考 答 案14一、名词解释1、在某 pH 的溶液中，若氨基酸（或蛋白质）解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为两性离子，氨基酸（或蛋白质）分子呈电中性，此时溶液的 pH 就称为该氨基酸（或蛋白质）的等电点。2、在某些蛋白质中还存在一些不常见的氨基酸，它们没有遗传密码，都是常见蛋白质氨基酸参入多肽链后经酶促修饰而形成的，称为稀有蛋白质氨基酸，也称为修饰氨基酸。3、在生物体内发现有很多以游离状态存在、相对分
26、子质量小于 600O、在构象上较松散，并且具有传递信息、调节代谢和协调器官活动等多种特殊生物学功能的小肽，其中有些小肽中还含有蛋白质中不存在的 -肽键、-氨基酸和 D 型氨基酸，它们被统称为生物活性肽。4、蛋白质多肽链中氨基酸残基从 N-末端到 C-末端的排列顺序，即氨基酸序列。维持蛋白质一级结构的化学键主要是肽键，有些蛋白质还包含二硫键。5、蛋白质多肽链局部主链原子依靠氢键而形成的有规则的局部空间构象，包括 -螺旋、- 折叠、-转角、无规卷曲四种构象单元。6、多肽链主链围绕同一中心轴螺旋式上升，形成螺旋结构。特征如下：3.6 个氨基酸残基旋转一圈，上升的垂直距离 0.54nm；相邻的螺旋之间
27、形成链内氢键；R 基侧链位于 -螺旋的外侧。7、指单条肽链的蛋白质分子中全部氨基酸残基的相对空间位置，即整条肽链中所有原子在三维空间中排布而形成的包括主链和侧链构象在内的特征性三维结构，是蛋白质发挥功能所必需的。8、指含两条或多条肽链的蛋白质分子中，各亚基间通过非共价键彼此缔合在一起而形成的特定的三维结构。9、指在二级结构基础上，某些相邻的二级结构构象单元常常在三维折叠中相互靠近，彼此作用，在局部区域形成有规则的二级结构聚合体。10、指对于较大的球状蛋白分子，它的一条长的多肽链往往在超二级结构的基础上进一步卷曲折叠，形成若干个空间上相对独立、且具有一定功能的近似球状的紧密实体。11、组成肽键的
28、 C、O、N、H 四个原子与两个相邻的 C 原子倾向于共平面，形成所谓多肽链主链的酰胺平面，也称肽平面。因肽平面是多肽链主链的重复单位，故肽平面又被称为肽单位。12、多肽链主链上的 C原子位于相邻两个肽平面的连接处， C-N 和 C-C 均为单键，可自由旋转。其中一个肽平面可以围绕 C-C 单键旋转，其旋转角度称 （Psi ） ；另一个肽平面可以围绕 C-N单键旋转，其旋转角度称 （Phi） 。由于 和 这两个转角决定了相邻两个肽平面在空间上的相对位置，因此，习惯上将这两个转角称为二面角。 13、由于基因突变导致蛋白质一级结构的变异，进而导致蛋白质生物功能的下降或丧失，并引起疾病。例如镰刀形红
29、细胞贫血病就是由于血红蛋白一级结构变异而导致的一种分子病。14、在一些理化因素的作用下，维持天然蛋白质分子特定空间构象的化学键被破坏，使天然蛋白质分子从原来紧密有序的折叠构象（天然态）变成了松散无序的伸展构象（变性态） ，并导致蛋白质生物学功能的丧失和某些物理及化学性质的改变，该现象即为蛋白质变性。15H2N CCOOHHR15、蛋白质（尤其是小分子蛋白质）的变性作用如果不过于剧烈，当除去变性因素后，可重新恢复原来的天然构象，并恢复全部的生物活性，这种现象称为蛋白质复性。16、分子伴侣是一类在细胞内能够帮助新生肽链正确组装成为成熟蛋白质，而本身却不是最终功能蛋白质分子的组成成分的蛋白质。细胞中
30、有很多分子伴侣，当细胞处于应激状态时，其合成往往增加。17、指在寡聚蛋白分子中，一个亚基由于与其它分子结合而发生构象变化，并引起相邻其它亚基的构象和功能也发生改变。18、在直流电场中，带正电荷的离子向阴极移动，带负电荷的离子向阳极移动，这种现象称电泳。19、由两条或两条以上的多肽链通过非共价键组成的蛋白质叫寡聚蛋白。二、填空题1、碳、氢、氧、氮，氮，16%，氮，凯氏定氮法2、氨基酸，脯氨酸，L-氨基酸3、简单蛋白质，结合蛋白质，球状蛋白，纤维状蛋白4、组成蛋白质的氨基酸的结构通式（L-氨基酸）为：5、苯丙氨酸，酪氨酸，色氨酸，280nm6、非极性氨基酸,不带电荷极性氨基酸,带正电荷极性氨基酸,
31、带负电荷极性氨基酸7、有机溶剂，乙醇8、D-， D-色氨酸， L-，L-谷氨酸的单钠盐9、两性离子10、负，阳11、最小12、蓝紫色13、2,4-二硝基氟苯14、氨基酸残基15、氨基端或 N-端，羧基端或 C-端16、一级结构，空间结构，二级结构，超二级结构，结构域，三级结构，四级结构17、氢键，疏水作用力，范德华力，离子键，二硫键，配位键18、- 螺旋的一周含 3.6 个氨基酸残基，-螺旋的一周含 13 个原子19、血红素，亚铁1620、吴宪，20，3021、牛胰岛素22、S，双曲线23、迁移率，相对分子质量，净电荷数量24、1100，水化膜，双电荷层25、福林-酚法或 Lowry 法，染料
32、结合分析法或 Bradford 法，双缩脲法，紫外分光光度法，凯氏定氮法26、153，血红素，-螺旋。27、增加，盐溶，减小，盐析，蛋白质分离28、FDNB 法（2,4- 二硝基氟苯法） ，Edman 降解法（苯异硫氢酸酯法）29、c、a、b30、不动，向正极移动，向负极移动三、单项选择题1.C 2.B 3.C 4.D 5.C 6.D 7.C 8.A 9.C 10.C 11.D 12.A 13.A 14.D 15.B 16.A 17.D 18.D 19.D 20.C四、多项选择题1.BD 2.ABCE 3.ABCD 4.BC 5.AB 6.BDE 7.ABDE五、判断并改错1. ，非必需氨基酸
33、是指可由动物体自行合成的氨基酸。这里所说的“必需”还是“非必需”是指其是否必需由饲料供给，并非指其对动物来说需要与否。2. ，谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的三肽。3. 4. 5. ，蛋白质变性时，天然蛋白质分子的空间结构被破坏，而蛋白质的一级结构仍保持不变。6. ，在分子筛层析时，分子量较大的蛋白质首先被洗脱出来。7 89，双缩脲是由两分子尿素缩合而成的化合物，在碱性溶液中能与蛋白质中的肽键反应，形成红紫色络合物。此反应可用于定性鉴定，也可在 540nm 比色，定量测定蛋白含量。1011. ，中性氨基酸:pI = (pK1 + pK2 )/2 , 酸性氨基酸： pI = (pK1
34、+ pKR-COO- )/2，碱性氨基酸：pI = (pKR-NH2 + pK2 )/2。甘氨酸为中性， pI =（pK1+ pK2）/2=（2.34+9.60）/2= 5.97六、问答题1. 论述蛋白质的催化、代谢调节、物质运输、信息传递、运动、防御与进攻、营养与贮存、保护与支持等生物学功能。综上所述，蛋白质几乎参与生命活动的每一个过程，在错综复杂的生17命活动过程中发挥着极其重要的作用，是生命活动所依赖的重要物质基础。没有蛋白质，就没有生命。2. 谷胱甘肽（GSH）是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的三肽。GSH 的第一个肽键与一般肽键不同，是由谷氨酸以 -羧基而不是 -羧基与半胱氨酸的 -
35、氨基形成肽键。GSH 分子中半胱氨酸的巯基是该化合物的主要功能基团。GSH 的巯基具有还原性，可作为体内重要的还原剂保护体内蛋白质或酶分子中巯基免遭氧化，使蛋白质或酶处在活性状态。此外，GSH 的巯基还有嗜核特性，能与外源的嗜电子毒物如致癌剂或药物等结合，从而阻断这些化合物与机体 DNA、RNA 或蛋白质结合，以保护机体免遭毒物损害。3. 许多具有一定功能的蛋白质，如参与蛋白质消化的各种蛋白酶、参与血液凝固的凝血酶、参与糖代谢调节的胰岛素等，它们在动物体内通常以无活性的前体形式产生和储存。这些无活性的蛋白质前体在机体需要时，经过某种蛋白酶的限制性水解，切去部分肽段（一级结构的局部断裂）后，才变
36、成具有生物活性的蛋白质，这一过程被称为蛋白质前体的激活。4. 蛋白质沉淀和变性的概念是不同的。沉淀是指在某些因素的影响下，蛋白质从溶液中析出的现象；而变性是指在变性因素的作用下蛋白质的空间结构被破坏，生物活性丧失，理化性质发生改变。变性的蛋白质溶解度明显降低，易结絮、凝固而沉淀；但是沉淀的蛋白质却不一定变性，如加热引起的蛋白质沉淀是由于蛋白质热变性所致，而硫酸铵盐析所得蛋白质沉淀一般不会变性。5. 蛋白质变性有许多实际应用。如在医疗上，利用高温高压消毒手术器械，用紫外线照射手术室，用 70% 75%酒精消毒手术部位的皮肤；这些变性因素都可使细菌、病毒的蛋白质发生变性，从而使其失去致病作用，防止
37、病人伤口感染。另外，在蛋白质、酶的分离纯化过程中，为了防止蛋白质变性，必须保持低温，防止强酸、强碱、重金属盐、剧烈震荡等变性因素的影响。6. 蛋白质一级结构测定的一般程序为：测定蛋白质（要求纯度必须达到 97%以上）的相对分子质量和它的氨基酸组成，推测所含氨基酸的大致数目。测定多肽链 N-末端和 C-末端的氨基酸，从而确定蛋白质分子中多肽链的数目。然后通过对二硫键的测定，查明蛋白质分子中二硫键的有无及数目。如果蛋白质分子中多肽链之间含有二硫键，则必须拆开二硫键，并对不同的多肽链进行分离提纯。用裂解点不同的两种裂解方法(如胰蛋白酶裂解法和溴化氰裂解法)分别将很长的多肽链裂解成两套较短的肽段。分离
38、提纯所产生的肽段，用蛋白质序列仪分别测定它们的氨基酸序列。应用肽段序列重叠法确定各种肽段在多肽链中的排列次序，即确定多肽链中氨基酸排列顺序。如果有二硫键，需要确定其在多肽链中的位置。7. 肌红蛋白是具有三级结构的单链蛋白；而血红蛋白是由 4 个亚基组成的寡聚蛋白，亚基之间通过盐键相连、互相限制。二者均有含铁的血红素辅基、均可与氧结合。但两种蛋白质的氧结合曲线有一定差别：肌红蛋白的氧合曲线为双曲线，而血红蛋白为 S 形氧合曲线；在相同氧分压情况下，肌红蛋白的氧饱和度总是高于血红蛋白的氧饱和度；在氧分压较低时，血红蛋白较难与氧结合。所以，血红蛋白比肌红蛋白更适合运输氧，而肌红蛋白适于在肌肉中贮存氧
39、。8血红蛋白分子构象中，四个亚基之间是通过 8 个盐键相连接、结合紧密；当第一个亚基与氧结18合时，需要破坏其间的盐键；当第一个亚基与 O2 结合以后，该亚基的构象发生改变，并进一步促使邻近的亚基构象改变，结果导致其他亚基与 O2 结合能力大大增强。当第四个亚基与 O2 结合后，整个分子的构象由紧密型变成了松弛型，提高了氧亲和力。这是一种正的协同作用。所以，血红蛋白氧合曲线肌呈“S 形” 。血红蛋白的 S 型氧结合曲线具有重要的生理意义。在肺部因氧分压高，去氧血红蛋白与氧的结合接近饱和；在肌肉中氧分压低，氧合血红蛋白与肌红蛋白相比能释放更多的氧，以满足肌肉运动和代谢对氧的需求。9. 蛋白质结构
40、决定其功能，蛋白质功能是其结构的体现，二者存在紧密的关系。（1）蛋白质一级结构与其功能的关系： 通过对细胞色素 c与胰岛素等蛋白质一级结构与功能的比较分析，发现同功能蛋白质的一级结构不同，且亲缘关系愈远，差异愈大。但是，同功能蛋白质有一些守恒残基，这是具有相同生物学功能的基础。蛋白质一级结构的细微变化，也可引起蛋白质功能的明显改变，甚至引起疾病，如镰刀形红细胞贫血病。某些蛋白质一级结构的局部断裂会引起这些蛋白质功能的改变，比如各种无活性的蛋白质前体切除部分肽段能够变成有活性的蛋白质。（2）蛋白质空间结构与功能的关系： 通过对核糖核酸酶的变性与复性实验分析，发现蛋白质空间发生变化会导致蛋白质功能
41、的丧失。通过对血红蛋白的氧合曲线分析，发现某些小分子能够影响某些蛋白质的空间结构及功能。10. 以 RNA 酶变性与复性实验、有活性牛胰岛素的人工合成为例证实蛋白质一级结构决定其空间结构。Anfinsen 发现蛋白质二硫键异构酶（PDI）能加速蛋白质正确二硫键的形成；如 RNA酶复性的过程是十分缓慢的，有时需要几个小时，而 PDI 在体外能帮助变性后的 RNA 酶在 2min 内复性。分子伴侣在细胞内能够帮助新生肽链正确组装成为成熟的蛋白质。由此可见，蛋白质空间结构的形成既决定于其一级结构，也与分子伴侣、蛋白质二硫键异构酶等助折叠蛋白的助折叠作用密不可分。11.层析过程中，混合样品经过凝胶层析
42、柱时，各个组分是按分子量从大到小的顺序依次被洗脱出来的；并且蛋白质相对分子质量的对数和洗脱体积之间呈线性关系。因此，将几种已知相对分子质量（应小于所用葡聚糖凝胶的排阻极限）的标准蛋白质混合溶液上柱洗脱，记录各种标准蛋白质的洗脱体积；然后，以每种蛋白质相对分子质量的对数为纵坐标，以相对应的洗脱体积为横坐标，绘制标准曲线；再将待测蛋白质溶液在上述相同的层析条件下上柱洗脱，记录其洗脱体积，通过查标准曲线就可求得待测蛋白质的相对分子质量。12.（1）聚丙烯酰胺凝胶是一种凝胶介质，蛋白质在其中的电泳速度决定于蛋白质分子的大小、形状和所带电荷数量。 （2）十二烷基硫酸钠（SDS）可与蛋白质大量结合，结合带
43、来两个后果：由于 SDS 是阴离子，故使不同的亚基或单体蛋白质都带上大量的负电荷，掩盖了它们自身所带电荷的差异；使它们的形状都变成杆状。这样，它们的电泳速度只决定于其相对分子质量的大小。（3）蛋白质分子在 SDS-PAGE 凝胶中的移动距离与指示剂移动距离的比值称相对迁移率，相对迁19移率与蛋白质相对分子质量的对数呈线性关系。因此，将含有几种已知相对分子质量的标准蛋白质混合溶液以及待测蛋白溶液分别点在不同的点样孔中，进行 SDS-PAGE；然后以标准蛋白质相对分子质量的对数为纵坐标，以相对应的相对迁移率为横坐标，绘制标准曲线；再根据待测蛋白的相对迁移率，即可计算出待测蛋白的相对分子质量。13抽
44、提是指利用某种溶剂使目的蛋白和其他杂质尽可能分开的一种分离方法。其原理：不同蛋白质在某种溶剂中的溶解度不同，所以可以通过选择溶剂，使得目的蛋白溶解度大，而其他杂蛋白溶解度小，然后经过离心，可以去除大多数杂蛋白。方法：溶剂的选择是抽提的关键，由于大多数蛋白质可溶于水、稀盐、稀碱或稀酸，所以可以选择水、稀盐、稀碱或稀酸为抽提溶剂；对于和脂类结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质分子可以选用有机溶剂进行抽屉。14.（1）可能在 7 位和 18 位氨基酸打弯，因为脯氨酸常出现在打弯处。（2）12 位和 23 位的半胱氨酸可形成二硫键。（3）分布在外表面的为极性和带电荷的残基：Asp、Gln 和 L
45、ys；分布在内部的是非极性的氨基酸残基：Try、Leu 和 Val；Thr 尽管有极性，但疏水性也很强，因此，它出现在外表面和内部的可能性都有。 第四章 酶 一、名词解释1、结合酶 2、单体酶 3、维生素 4、寡聚酶 5、多酶复合体 6、酶的活性中心 7、酶的必需基团 8、邻近效应 9、酸碱催化 10、酶活力单位 11、比活力 12、不可逆抑制作用 13、可逆抑制作用 14、酶原 15、变构酶 16、共价修饰酶 17、同工酶 18、核酶 19、脱氧核酶 20、抗体酶 21、酶活力单位 IU二、填空题1、根据国际系统分类法，所有的酶按所催化的化学反应的性质可分为六类 、 、 、 、 和 。 2、酶对底物和反应类型的选择性，称为酶的 ；可分为 、 和 三种类型。3、测定血清淀粉酶活性可作为临床诊断 的依据，测定血清转氨酶活性可作为诊断急性 的依据，而测定尿酸酶活性可作为诊断 的依据。4、单纯酶是指只含有 ，而不含其他成分的酶类。 5、全酶中酶蛋白的作用是决定酶的 ，而辅助因子的作用是 。 206、根据维生素的溶解性不同，可将维生素分为两类，即_和_。 7、维生素 B1主要功能是以_形式，作为_的辅酶，参与糖代谢。8、维生素 B2 的辅酶形式有
