1、Trizol 分离纯化的基本原理：研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离及纯化 RNA。RNA 质量的高低常常影响 cDNA 库、RT-PCR 和 Northern Blot 等分子生物学实验的成败。 Trizol 是一种新型总RNA 抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。购买规格为 100ml/瓶或者 200ml/瓶，1ml Trizol 可以提取 50-100mg 组织，基本上是 1 个样品用 1mlTrizol。使用 Trizol 试剂的准备工作：RNase 酶非常稳定，是导致 RNA 降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活，但限制因素
2、去除後又迅速复性。用常规的高温高压蒸汽灭菌方法和蛋白抑制剂都不能使RNase 完全失活。它广泛存在于人的皮肤上，因此，在与 RNA 制备有关的分子生物学实验时，必须戴手套。 RNase 的又一污染源是取液器，根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。一般情况下采用用 DEPC 配制的 70乙醇擦洗取液器的内部和外部，基本达到要求。取 RNase-free 的物品时必须戴手套。 使用 Trizol 试剂时塑料制品的处理：尽可能使用无菌，一次性塑料制品，已标明 RNase-free 的塑料制品，如果没有开封使用过，通常没有必要再次处理。对于国产塑料制品，原则上都必须处理方可使用。处理步骤如下：（1）在玻璃烧杯中注入去离子水，加入 DEPC 使 DEPC 的终浓度为 0.1%。注意：DEPC为剧毒物，活性很强，小心在通风柜中使用。 （2）处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入 DEPC 水溶液，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中。 （3）在通风柜中室温处理过夜。 （4）将 DEPC 水溶液小心倒入废液瓶中，用铝箔封住含 DEPC 水处理过的塑料制品的烧杯，高温高压蒸汽灭菌至少 30 分钟。 （5）烘箱用合适的温度烘烤至干燥。置于干净处备用。 使用 Trizol 试剂时玻璃和金属物品的处理：250烘烤 3 小时以上。
