重组蛋白的大规模表达与纯化主要基于大肠杆菌（E. coli）表达系统1、目标基因亚克隆利用 KOD-Plus、Pfu 等高保真酶通过 PCR 扩增含有酶切位点的目标基因，连接到表达载体上（以 PET 系列载体为主） ，这些载体含有 His、GST 和 Trx 等助溶标签，便于后续纯化，同时这些载体上含有蛋白酶的酶切位点，可按客户要求切除或保留标签。2、目标蛋白的表达与纯化将重组表达载体转化合适的大肠杆菌表达菌株中，对时间、温度以及 IPTG 浓度等表达条件进行优化，探索小量的可溶性蛋白表达和纯化条件根据小量表达结果，摇瓶培养 1L-10L 重组细菌，利用亲和层析 （His 和 GST等） 、离子交换层析（Q 柱和 SP 柱） 、凝胶过滤（Superdex S75、S200 等）等层析方法纯化表达的重组蛋白。通过 SDS-PAGE 电泳检测每步结果并控制最终产品质量。通过 Western-blot 验证目标蛋白正确性交付内容：纯化好的目标蛋白 510mg 及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag ）的最终蛋白，纯度最高可达 95%以上。时间：2-3 周电话 13701332995 Superdex S75 纯化目标蛋白目标蛋白 SDS-PAGE 电泳图
