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微生物检验10.ppt

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资源描述

1、其他革兰阴性杆菌,第十章 其他革兰阴性杆菌,嗜血杆菌属 鲍特菌属 布鲁菌属 巴斯特菌属 弗朗西斯菌属,第一节 嗜血杆菌属(Haemophilus),返回,分类,嗜血杆菌属(Haemophilus)隶属于巴斯德菌科,嗜血杆菌属 流感嗜血杆菌(H.influenzae) 副流感嗜血杆菌(H.parainfluenzae) 溶血嗜血杆菌(H.haemolyticus) 副溶血嗜血杆菌(H.parahaemolyticus) 克雷嗜血杆菌(H.ducreyi) 埃及嗜血杆菌(H.aegyptius) 嗜沫嗜血杆菌(H.aphrophilus) 副嗜沫嗜血杆菌(H.paraphrophilus) 迟缓嗜

2、血杆菌(H.segnis),临床意义,几种主要嗜血杆菌常栖部位及所致疾病,生物学特性,革兰阴性短小球杆菌 呈双球形或短丝状或多形性 无芽孢、无鞭毛 有荚膜,微生物检验,检验程序 标本采集 抗原检测及核酸检测 分离培养与鉴定 药物敏感试验,标本采集原则,在疾病早期采取标本,立即送检。 在取标本时以肉汤湿润,防止干燥。 对心内膜炎、患者取血液标本。 痰液标本,应洗涤、消化,再接种。,DNA探针杂交(快速检测),分离培养,培养条件: 需要X、V因子 营养要求高 生长温度为35 血琼脂平板培养基 巧克力琼脂培养基,菌落特征:巧克力琼脂培养基小、无色透明菌落,流感嗜血杆菌巧克力琼脂养基菌落,鉴定,培养需

3、要X、V因子 菌落形态 卫星现象,卫星现象(satellite phenomenon),注:D为不同结果,嗜血杆菌属中种的特征,药物敏感试验,药敏试验:K-B法 培养基:HTM 质控菌株:(ATCC49247) 需常规检测-内酰胺酶 耐药机制是:1.由质粒介导的TEM-1型2.由染色体介导的PBP的改变3.对氯霉素、四环素耐药与R质粒相关,第二节 鲍特菌属(Bordetella),返回,分类,百日咳鲍特菌(B.pertussis) 副百日咳鲍特菌(B.parapertussis) 支气管鲍特菌(B.branchiseptica) 鸟鲍特菌(B.avium) 欣氏鲍特菌(B.hinzii) 霍氏

4、鲍特菌(B.holmesii),临床意义,是百日咳的致病菌 一年四季均可发病,冬春季多发,小儿多于成人 传播途径:飞沫 传染源:病人 潜伏期:12周 致病因素:百日咳毒素(PT)、丝状血细胞凝集素 (FHA)腺嘌呤环酶毒素(ACT)、气管细胞毒素、皮肤坏死毒素,临床表现: 1.卡他期:12周,明显卡他症状,传染性强,感染标本培养阳性率高 2.痉挛期:14周,阵发性剧烈咳嗽,直至咳出粘稠的痰液或呕吐为止 3.恢复期:12周,阵咳减轻,渐趋停止,生物学特性,革兰阴性短小杆菌 无芽孢,有荚膜 支气管鲍特菌、鸟鲍特菌有鞭毛 专性需氧,最适温度35 , 最适pH6.87.0,百日咳鲍特菌革兰染色,3种鲍

5、特菌抗原因子,微生物检验,检验程序 分离鉴定与培养 标本直接检查,分离培养与鉴定,在CCBA琼脂平版上形成光滑、有光泽、水银样的菌落,百日咳鲍特菌在CCBA培养基的菌落,6种鲍特菌生化特征,标本直接检测,抗原、抗体检测采用ELISA检测 直接荧光抗体检测 单克隆抗体检测 核酸检测 抗体检测:IgM及IgA,其中IgA在感染早期出现,不受接种疫苗干扰,有利于早期诊断,药物敏感试验及结果解释,1、本菌的感染以预防接种为主,进行控制2、临床治疗首选红霉素类,次选氨曲南及磺胺增效剂(SMZ-TMP)3、对青霉素不敏感,大多数菌株对四环素耐药,第三节 布鲁菌属(Brucella),返回,分类,羊布鲁菌(

6、B.melitensis又称马尔他布鲁菌) 牛布鲁菌(B.abortus又称流产布鲁菌) 猪布鲁菌(B.svis) 绵羊布鲁菌(B.ouis) 狗布鲁菌(B.canis) 森林鼠布鲁菌(B.neotomaes),临床意义,传染源:病兽,以羊、牛、猪多见 传播途径:病兽的组织、尿、乳液、等通过人体的 皮肤、呼吸道、消化道进入人体 易感人群:发病以青壮年为主,从事兽医、皮毛加工、屠宰的工人发病率较高 潜伏期:521日,亦可高达数月,临床表现: 症状:长期发热,多汗,关节疼痛及全身乏力,疼痛 病理:菌在淋巴结、脾、骨髓等处繁殖,并多次入血引起菌血症及网状内皮系统上皮样增生,形成肉芽肿。 致病性:不产

7、生外毒素,有较强的内毒素可产生透明质酸酶和过氧化氢酶侵袭力较强迟发性超敏反应,微生物特性,革兰阴性短小球杆菌,两端钝园,偶见两极浓染, 无动力、无芽胞、无荚膜 抗原:A抗原、M抗原,马尔他布鲁菌革兰染色,羊1:20 牛20:1 猪 2:1,A:M,需氧菌营养要求较高 需5%10%的CO2 培养基:硫胺、烟酸、生物素等物质 生长温度为35 最适pH6.7 生长缓慢(57天),培养特性:,马尔他布鲁菌血平板菌落,微生物检验,检验程序 标本采集 标本直接检查 分离培养与鉴定,标本(血液、羊水、骨髓、分泌物等),血清学诊断,凝集试验,抗人球蛋白试验,补体结合试验,分离培养(5%10%CO2),血琼脂、

8、双相培养基,马铃薯培养基,动物实验(豚鼠腹腔,或皮下注射),菌落、染色镜检,纯培养,生化反应,凝集试验,分离培养,镜检,凝集试验,布鲁菌检验程序,标本直接检验,凝集反应:玻片凝集或试管凝集法 PCR检测: 抗体检测:,布鲁氏菌的生化特性,注:V 不定; (-) 大部分菌株阴性,第四节 巴斯德菌属,返回,分类,巴斯德菌属(Pasteurella)属巴斯德菌科 多杀巴斯德菌(P.multocida) 嗜肺巴斯德菌(P.pneumotropica) 溶血巴斯德菌(P.haemolytica) 产气巴斯德菌(P.aerogenes) 鸡巴斯德菌(P.qallinarum) 犬巴斯德菌(P.Canis)

9、 贝氏巴斯德菌(P.beffgae) 达可马巴斯德菌(P.dagmatis) 明立巴斯德菌(P.tomatts),临床意义,为人兽共患病原菌 常引起肺部感染、支气管炎、菌血症、脑膜炎、脑脓肿、化脓性关节炎、骨髓炎、阑尾脓肿、腹膜炎、产褥热、肝脓肿及伤口感染 近年来,家养宠物增多,所以该病较为多见,生物学特性,革兰阴性球杆菌 无动力、无芽胞 触酶、氧化酶阳性 需氧或兼性厌氧菌 生长温度为35 血培养基 两种抗原:荚膜多糖,菌体脂多糖,微生物检验,分离培养与鉴定 巧克力平板、血平板:白色不溶血小菌落,约0.51.5mm 生化鉴定:触酶和氧化酶阳性,发酵葡萄糖产酸不产气,不发酵乳糖,能还原硝酸盐。,

10、多杀巴斯德菌血平板菌落,药物敏感试验及结果解释,临床诊断:病史及典型症状,加上实验室检查诊断并不困难首选治疗药物:阿莫西林加棒酸。如-内酰胺酶类抗生素过敏,可选环丙沙星、氟哌酸或磺胺类、TMP/SMZ,第五节 弗朗西斯菌属(Francisella),分类 土拉弗朗西斯菌(F.tularesis) 新凶手弗朗西斯菌(F.novicida),返回,临床意义,流行病学 分布广泛,是野生动物中的自然疫源性疾病 为人兽共患病原菌 人有高度的易感性 所以在战争时期该菌被用作生物战剂 潜伏期35天,弗朗西斯菌属 临床意义,临床症状: 发病急、高热(3940) 剧烈头痛、关节痛 甚至发生衰竭及休克、全身中毒症

11、状,生物学特性,革兰阴性小杆菌,需氧菌 无芽胞、无鞭毛、无荚膜 卵黄培养基或胱氨酸血琼脂培养基 最适温度:3537 最适pH 6.87.2,微生物检验,分离培养: 卵黄培养基:24h48h,菌落为11.5mm,圆形,光滑灰白色、边缘整齐、中心凸起、有光泽,与培养基颜色几乎相同 生化鉴定:发酵碳水化合物及醇能力较弱。能发酵葡萄糖和麦芽糖,产酸不产气;分解脲素,产生少量H2S;触酶阳性;氧化酶阴性;不产生吲哚。不发酵乳糖、蔗糖、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露醇、山梨醇。,抗体检测一般采用血清凝集试验 在发病一周后即出现血凝抗体 1月后抗体效价可高达1:10000 8个月后降到1:640 在病程中抗体效价4倍增长 单价血清效价1:160才可诊断,药物敏感试验及结果解释,本菌属甲类菌种 专门实验室进行 工作人员应接受预防接种 血清学检查不受此限 临床治疗:该菌对氨基糖甙类抗生素敏感 抗生素敏感试验可不作为常规试验,

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