1、医学考试 视频题库押题辅导 考试一次过 权威辅导 助您考试一次过12015年临床化学检验考点点评临床化学检验考试的知识点很多，小张老师特详细整理有关考点知识如下，供广大考生参考复习，请大家重视。一、抗血清的制备抗血清指含有抗体的血清。传统的抗血清制备方法是将某种抗原通过多次注入动物，数十天后或数月后，采集动物血，立即分离出血清。此抗血清在保存或应用前必须作效价和特异性鉴定及纯化。（一）免疫动物的选择免疫动物的选择基本要求：1.抗原与免疫动物的种属差异越远越好。2.动物必须适龄、健壮、无感染、体重合乎要求。3.不同动物对同一免疫原有不同的免疫应答表现。因此针对不同性质的免疫原，选用相应的动物。
2、蛋白质抗原大部分动物皆适合；甾类激素多用家免；酶类多用豚鼠。4.抗血清要求：为R（rabbit）型或H（horse）型血清。R型抗血清是以家兔为代表的小型动物产生的抗血清，能和很小量抗原结合形成沉淀线，而H型抗血清则以马为代表的大型动物产生的抗血清，较少用于沉淀反应。此外需要制备大量免疫血清时，应选用马、绵羊等大动物；若需要量不多，则选用家兔、豚鼠和鸡等小动物。（二）免疫方法及途径1.免疫原的注射剂量：应考虑抗原性强弱、分子量大小、动物的个体状态和免疫时间。抗体需要量多，时间间隔长，剂量可适当加大。2.免疫途径：通常有静脉、腹腔、肌肉、皮内、皮下、淋巴结及足掌等。若抗原宝贵可采用淋巴结内微量注
3、射法；半抗原宜皮内多点注射。3.免疫方案：根据设计的目的要求、抗原性质、佐剂的种类来制定免疫方案。可采用全量免疫法、微量免疫法或混合免疫法。4.抗体产生阶段：可分静止期（约2天，血中尚无抗体） ；指数期（约4天左右，抗体迅速上升） ；稳定期（约24周，抗体保持一个稳定水平） ；下降期（约几个月后，此时抗体缓慢下降）医学考试 视频题库押题辅导 考试一次过 权威辅导 助您考试一次过2四个阶段。（三）动物采血法动物采血法有颈动脉放血法、心脏采血法、静脉多次采血法等。二、抗血清的鉴定和保存（一） 、特异性抗体的鉴定1.抗体特异性鉴定：常采用双向免疫扩散法。2.抗体的效价的鉴定：常采用双向免疫扩散法。
4、一是仅稀释抗血清，与同一浓度抗原反应；另一是抗血清、抗原同时稀释作棋盘滴定。3.抗体的纯度鉴定：常用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定。（二） 、抗血清的保存动物血采集后，室温自然凝固后立即分离出血清，妥善保存。抗血清保存有三种方法：第一种是4保存，通常可保存3个月半年，效价高时可保存一年左右；第二种是-20-40低温保存，可保存5年左右，但需防止反复冻融；第三种是真空冰冻干燥保存，可保存510年。三、抗血清的纯化纯化的目的是尽量去除抗血清中与目的抗体不相关的成分，防止与特定抗原反应时起干扰作用。最常见的纯化方式是提取特异性IgG或单价特异性抗血清。（一） 、特异性IgG抗血清制备首先用硫酸铵或
5、硫酸钠盐析法粗提丙种球蛋白，再进一步纯化，常用的方法有：1.离子交换层析法：离子交换剂有DEAE纤维素和QAE纤维素。2.凝胶过滤：通过多孔凝胶介质达到分离目的。3.亲和层析法：采用纯化抗原或粗提抗原交联的sepharose 4B的层析柱来制备。4.酶解法 如制备F（ab ）2：片段用胃蛋白酶水解制备。医学考试 视频题库押题辅导 考试一次过 权威辅导 助您考试一次过3（二） 、单价特异性抗血清制备主要通过亲和层析法（交叉杂抗原与琼脂糖珠4B交联制成层析柱）和吸附法（用双功能试剂与抗原交联，制成固相吸附剂）除去杂抗体。四、肾小管检查浓缩、稀释取决因素远端肾单位对水的调节功能主要通过尿液的浓缩和
6、稀释作用来实现，其机制十分复杂，但主要决定于两个环节：一是髓袢的逆流倍增机制和直小血管的逆流扩散作用；二是远曲小管和集合管的效应器对ADH（垂体后叶抗利尿激素）的反应能力。当髓袢、远端小管、集合管和直小管受损时会导致尿液浓缩、稀释功能的紊乱。测定这一功能的就是浓缩稀释试验。早年的方法有Fishberg浓缩试验和稀释试验。前者要禁水12小时，使血浆渗透压增高，使尿液浓缩；后者则相反，受试者一次大量饮水（1500ml/30min） ，使血液渗透压下降水重吸收减少，尿呈稀释状态。以上两种方法因过度禁水或饮水，会增加患者肾功能负荷，试验过程也较长，临床上一般不再采用。后来被24小时Mosenthal试
7、验（尿比密试验）取代。Mosenthaltest（莫氏试验）的具体做法是：试验前日晚8时后禁食，试验当日正常进食，每餐含水分约500ml，不再饮任何液体。晨8时排尿弃去，于上午10时、l2时，下午2、4、6、8时（日间尿）及次晨8时（夜间尿）各留尿次，尿须排尽。准确测定各次尿量及比密。参考值：24小时尿量为10002000ml，日间与夜间尿量之比2：1，夜间尿SG1.020.日间尿SG因饮水量而有变异，可波动在1.0021.020以上，最高与最低SG差应0.009。临床意义：肾浓缩减退时，尿量多，24小时尿量常超过2500ml；昼夜尿量相差不大，夜间尿量增加，常超过750ml（早期表现） ；各
8、次尿间SG接近，最高SG1.018，SG差0.009，严重者甚至只有0.0010.002，常固定在1.010左右，提示远段肾单位的浓缩功能丧失。见于慢性肾小球肾炎及慢性肾盂肾炎晚期，高血压肾病失代偿期。五、孕酮（P）的主要功能与检测孕酮（P）：女性主要由卵巢和胎盘产生。孕酮的主要功能是促进子宫内膜增厚，腺体增生，为受精卵植入做准备。从孕酮浓度的升降可以推测卵巢滤泡和黄体的活动，因此血液中孕酮测定在临床上用于监测未怀孕妇女的排卵和黄体的正常功能，孕酮疗法监控及早期妊娠的评价等，在判断黄体功能状态上具有特别重要的意义。医学考试 视频题库押题辅导 考试一次过 权威辅导 助您考试一次过4对不怀孕妇女和反复自然流产妇女可帮助查找原因。在月经周期中，孕酮的浓度：滤泡期：0.141.61g/L.排卵期后明显上升，黄体期达：2.4131.2g/L，并与血中E2的增加平行。妊娠足月时可高达：150200g/L.血清孕酮的升高：见于葡萄胎、轻度妊娠高血压综合征、糖尿病孕妇、多胎、继发性高血压、先天性17-a羟化酶缺乏症、先天性肾上腺增生、卵巢颗粒层膜细胞瘤、卵巢脂肪样瘤。孕酮的降低：见于先兆流产、黄体功能不良、胎儿发育迟缓、死胎、严重妊娠高血压综合征。在月经周期第1826天，测三次血P，如均小于15.9nmol/L（5ng/ml）可诊为黄体功能不健。
