1、【doc】烟叶和土壤中抑芽丹残留分析方法及应用研究烟叶和土壤中抑芽丹残留分析方法及应用研究 第32卷 2004年3月 分析化学(FENXIHUAXUE)来稿摘登 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 第3期 410 烟叶和土壤中抑芽丹残留分析方法及应用研究 杨昀刘玉林 (云南省化工研究院,昆明650041) 1引言 抑芽丹,化学名称1,2-二氢.3,6?哒嗪二酮(简称MH),是一种暂时性植物生长抑制剂和选择性除草剂.药剂通过叶 面角质层进入植株,抑制细胞分裂,降低光合作用,强烈抑制芽的生长.常用于防止马铃薯,洋葱等贮藏期发芽,以及控 制烟叶腋芽的生长.MH的残
2、留分析方法,国内未见报道.国际标准和AOAC都采用蒸馏.分光光度法,即将样品在碱溶 液中煮沸后,加锌蒸馏,氮气吹扫,馏出物在酸性液中被二甲胺基苯甲醛还原后于455hill左右比色.该方法对蒸馏装置 要求高,样品前处理复杂,操作繁琐,耗碱量大,仪器腐蚀严重.本实验从探索样品不同前处理方法人手,发现MH的酸 性水解产物在210,260hill有紫外吸收,研究选择了较优色谱条件,建立了用反相高效液相色谱.紫外检测器测定烟叶 和土壤中MH残留量的方法.该法具有量准确,操作简便快捷及结果重现性好等优点,符合残留分析要求. 2实验部分 2.1仪器和试剂Waters高效液相色谱系统,SimmetryC18分
3、析柱和Sep.pakC18固相萃取小柱(美国Waters公司). MH标准品,含量?99%(美国UniroyalChem.公司);甲醇(色谱纯,上海化学试剂公司);水为二次石英双蒸水;盐酸,磷 酸(均为分析纯). 2.2色谱条件C18柱4.6mm250toni(10pJn);流动相为含0.026mol/LH3PO4的CH3OH.H2O(3/97,WV),流速 0.8m.,/min;检测波长220hill,室温下检测;进样量10Lo 2.3样品前处理烟叶捣碎,土壤风干去杂,研细过筛.分别称取烤烟叶,鲜烟叶10g,土壤50g.试样置于500mL磨 口三角烧瓶中,加人100.00mL4mol/LHC
4、I,于沸水浴中回流60min,取下,冷却至室温.双层滤纸过滤,滤液用Sep.Pak C18固相萃取小柱预分离除杂净化,净化液经0.45tun滤膜过滤后待HPLC分析. 3结果与讨论 3.1样品前处理条件选择实验了有机溶剂,水,流动相,酸性溶液和碱性溶液对MH提取的影响.烟草化学成分复 杂.除了富含糖类,还含有烟碱,酚类,有机酸类,蛋白质,胶体物质和色素等.MH可溶于水和甲醇,难溶于一般有机溶 剂,在酸性和碱性水溶液中稳定.MH喷施于作物后,其中一部分与作物体内的单糖结合生成B.D.葡萄糖苷,另一部分 仍然呈游离态.提取时干扰杂质随有机溶剂浓度和pH值的增加而增多,回收率仅30%,70%,这可能
5、是对结合态MH 的提取不完全所致.逐渐降低有机溶剂浓度和提取剂pH值,增大酸度仅用4mol/LHCI提取时,回收率均大于95%,表 明4mol/LHCI可提取植物体内游离态和结合态的MH.但在该酸度时,烟草中的糖,多酚类物质,有机酸类及烟碱等可 被同时提取,这些物质都有不同程度的紫外吸收,尤其酚类物质,与MH的提取条件和吸收波长相近,严重干扰MH测 定.酚类的化学性质显酸性,碱性条件下,酚羟基上的H易电离离去呈阴离子形态,亲水性增强,在C18柱上难以保留; 酸性环境中,酚呈中性分子形态,疏水性增强,在反相柱上有较充分保留.另外,若用碱中和提取液的酸度,将生成大量 沉淀,并且中和后所得MH峰形产
6、生畸变.因而实验中采用不中和酸性提取液,直接经固相萃取预分离除杂净化的方 法.吸取约5mL滤纸过滤液,过C18小柱,得到净化液.弃去最初1mL净化液,收集后面约4mL体积.实验表明,烟 草中多酚类,烟碱类和色素等大多数的芳胺,芳烃,多环芳烃,芳香族醛,酮及醚等共提取物在小柱上均有一定保留,达到 了预分离除去大部分共存干扰物的目的. 3.2色谱条件选择实验了流动相中有机溶剂和酸度以及胶束溶液对MH保留值和分离度的影响.MH的分离度随 有机溶液浓度的增加而变差;提高pH值后MH的容量因子在胶束溶液中明显变小.当选用一定酸度(pH2.7,含 0.013,0.O26mol/LI3PO,)的流动相CH3
7、OH+H2O(3/97,V/V)时,获尖锐对称,良好基线分离的MH峰.该酸度对分 析柱有一定腐蚀,必须于每日工作结束后用水-甲醇-异丙醇-乙腈等强溶剂仔细冲洗. 3.3线性范围与回归方程MH浓度在0,200ms/L,回归方程Y=0.0023+0.092,r=0.9994. 3.4方法的回收率,精密度及检出限烤烟叶,鲜烟叶和土壤的平均回收率(%)分别为98.4,101.5,98.0,100.0和 78.9,98.5;相对标准偏差(RSD,%)分别为1.58,6.96,2.88,3.84和3.12,8.56;经实验求得检出限(ms/ks)分别为 5,5和1. 2002?10-31收稿;2003-0411接受
