1、标准缓冲液的配制及常用数据 2004.111标准缓冲液的配制及常用数据一、标准缓冲液 pH 值与温度对照表 温度四草酸氢钾0.05M邻苯二甲酸氢钾0.05M 混合磷酸盐0.025M硼砂0.01M5 1.67 4.00 6.95 9.3910 1.67 4.00 6.02 9.3315 1.67 4.00 6.90 9.2820 1.68 4.00 6.88 9.2325 1.68 4.00 6.86 9.1830 1.68 4.01 6.85 9.1435 1.69 4.02 6.84 9.11二、常用缓冲溶液的配制方法1 甘氨酸盐酸缓冲液（0.05mol/L）X 毫升 0.2 mol/L 甘
2、氨酸+Y 毫升 0.2 mol/L HCI，再加水稀释至 200 毫升pH X Y pH X Y2.02.42.62.85050505044.032.424.216.83.03.23.43.65050505011.48.26.45.0甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L 甘氨酸溶液含 15.01 克 /升。2邻苯二甲酸盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X 毫升 0.2 mol/L 邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到 20 毫升pH(20 ) X Y pH(20 ) X Y2.22.42.62.83.0555554.0703.9603.2952.6422.0
3、223.23.43.63.855551.4700.9900.5970.263邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L 邻苯二甲酸氢溶液含 40.85 克/升3磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液pH 0.2mol/L Na2HPO4（毫升）0.1mol/L柠檬酸（毫升）pH 0.2mol/L Na2HPO4（毫升）0.1mol/L柠檬酸（毫升）2.22.42.62.83.03.23.43.63.84.04.24.44.64.85.00.401.242.183.174.114.945.706.447.107.718.288.829.359.8610.3010.6018.7617.8216.8
4、315.8915.0614.3013.5612.9012.2911.7211.1810.6510.149.705.25.45.65.86.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.010.7211.1511.6012.0912.6313.2213.8514.5515.4516.4717.3918.1718.7319.1519.459.288.858.407.917.376.786.155.454.553.532.611.831.270.850.55Na2HPO4 分子量 = 14.98，0.2 mol/L 溶液为 28.40 克/升。Na2HPO4-2H2O 分子量 = 17
5、8.05，0.2 mol/L 溶液含 35.01 克/ 升。标准缓冲液的配制及常用数据 2004.112C4H2O7H2O 分子量 = 210.14，0.1 mol/L 溶液为 21.01 克/升。4柠檬酸氢氧化钠-盐酸缓冲液pH 钠离子浓度（mol/L）柠檬酸（克）C6H8O7H2O氢氧化钠(克)NaOH 97%盐酸（毫升）HCl（浓）最终体积（升） 2.23.13.34.35.35.86.50.200.200.200.200.350.450.3821021021021024528526684838383144186156160116106456810512610101010101010 使
6、用时可以每升中加入 1 克克酚，若最后 pH 值有变化，再用少量 50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。5柠檬酸柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）pH 0.1 mol/L柠檬酸（毫升）0.1 mol/L柠檬酸钠（毫升）pH 0.1 mol/L柠檬酸（毫升）0.1 mol/L柠檬酸钠（毫升）3.03.23.43.63.84.04.24.44.64.818.617.216.014.914.013.112.311.410.39.21.42.84.05.16.06.97.78.69.710.85.05.25.45.65.86.06.26.46.68.27.36.45.54.73.82.82.0
7、1.411.812.713.614.515.316.217.218.018.6柠檬酸 C6H8O7H2O：分子量 210.14，0.1 mol/L 溶液为 21.01 克/升。柠檬酸钠 Na3 C6H5O72H2O：分子量 294.12，0.1 mol/L 溶液为 29.41 克/ 毫升。 6乙酸乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L）pH(18 )0.2 mol/LNaAc(毫升)0.3 mol/LHAc(毫升 )pH(18 )0.2 mol/LNaAc(毫升)0.3 mol/LHAc(毫升 )2.63.84.04.24.44.60.751.201.802.653.704.909.258.808.
8、207.356.305.104.85.05.25.45.65.85.907.007.908.609.109.404.103.002.101.400.900.60Na2Ac3H2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为 27.22 克/升。7磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠磷酸二氢钠缓冲液（0.2）pH0.2 mol/LNa2HPO4(毫升)0.3 mol/LNaH2PO4(毫升)pH0.2 mol/L Na2HPO4(毫升)0.3 mol/LNaH2PO4(毫升)5.85.96.06.16.26.36.46.56.66.76.86.98.010.012.315.018.522.52
9、6.531.537.543.549.555.092.090.087.785.081.577.573.568.562.556.551.045.07.07.17.27.37.47.57.67.77.87.98.061.067.072.077.081.084.087.089.591.593.094.739.033.028.023.019.016.013.010.58.57.05.3Na2HPO42H2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液为 35.61 克/ 升。标准缓冲液的配制及常用数据 2004.113Na2HPO412H2O 分子量 = 358.05，0.2 mol/L 溶液为
10、 71.61 克/ 升。NaH2PO42H2O 分子量 = 156.01，0.2 mol/L 溶液为 31.202 克/ 升。（2）磷酸氢二钠磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L）pH mol/L/15Na2HPO4(毫升)mol/L/15KH2PO4(毫升)pH mol/L/15Na2HPO4(毫升)mol/L/15KH2PO4(毫升)4.925.295.916.246.476.646.816.980.100.501.002.003.004.005.006.009.909.509.008.007.006.005.004.007.177.387.738.048.348.678.187.008
11、.009.009.509.759.9010.003.002.001.000.500.250.100Na2HPO42H2O 分子量 = 178.05，1/15M 溶液为 11.876 克/升。KH2PO4 分子量 = 136.09，1/15M 溶液为 9.078 克/升。 8磷酸二氢钾氢氧化钠缓冲液（0.05M）X 毫升 0.2M K2PO4 + Y 毫升 0.2N NaOH 加水稀释至 29 毫升pH(20) X (毫升) Y（毫升） pH(20) X (毫升) Y（毫升）5.86.06.26.46.66.85555550.3720.5700.8601.2601.7802.3657.07.27
12、.47.67.88.05555552.9633.5003.9504.2804.5204.6809巴比妥钠-盐酸缓冲液（18）pH 0.04M 巴比妥钠溶液 0.2V 盐酸 pH 0.04M 巴比妥钠溶液(毫升) 0.2N 盐酸(毫升)6.87.07.27.47.67.88.08.210010010010010010010010018.417.816.715.313.411.479.397.218.48.68.89.09.29.49.61001001001001001001001005.213.822.521.651.130.700.35巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M 溶液为 8.2
13、5 克/ 升10Tris盐酸缓冲液（0.05M，25）50 毫升 0.1M 三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与 X 毫升 0.1N 盐酸混匀后，加水稀释至 100 毫升。pH X(毫升 ) pH X(毫升 )7.107.207.307.407.507.607.707.807.908.0045.744.743.442.040.338.536.634.532.029.28.108.208.308.408.508.608.708.808.9026.222.919.917.214.712.410.38.57.0三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2 CH2OHCHOCH2 NH2分子量=121.14;
14、1M 溶液为 12.114 克/升。Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。标准缓冲液的配制及常用数据 2004.11411硼酸硼砂缓冲液（0.2M 硼酸根）pH 0.05M 硼砂（毫升） 0.2M 硼砂（毫升） pH 0.05M 硼砂（毫升） 0.2M 硼酸（毫升）7.47.67.88.01.01.52.03.09.08.58.07.08.28.48.79.03.54.56.08.06.55.54.02.0硼砂 Na2B4O7H2O,分子量=381.43; 0.05M 溶液含 19.07 克/ 升。硼酸 H2BO3,分子量=61.84, 0.2M 溶液为 12.37 克/
15、升。硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根）X 毫升 0.05M 硼砂+Y 毫升 0.2NNaOH 加水稀释至 200 毫升pH 0.05M 硼砂（毫升）0.2NNaOH（毫升）pH 0.05M 硼砂（毫升）0.2NNaOH（毫升）9.39.49.69.850.050.050.050.06.011.023.034.010.010.150.050.043.046.012甘氨酸氢氧化钠缓冲液（0.05M）X 毫升 0.2M 甘氨酸+Y 毫升 0.2NnaOH 加水稀释至 200 毫升pH X Y pH X Y8.68.89.09.29.450505050
16、504.06.08.812.016.89.69.810.010.410.6505050505022.427.232.038.645.5甘氨酸分子量=75.07;0.2M 溶液含 15.01 克/ 升。13硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根）X 毫升 0.05M 硼砂+Y 毫升 0.2NNaOH 加水稀释至 200 毫升pH X Y pH X Y9.39.49.65050506.011.023.09.810.010.150505034.043.046.0硼砂 Na2B4O710H2O,分子量=381.43;0.05M 溶液为 19.07 克/ 升。14碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）Ca
17、2+、Mg 2+存在时不得使用pH20 370.1MNa2CO3(毫升) 0.1MN2HCO3(毫升)9.169.409.519.789.9010.1410.2810.5310.838.779.129.409.509.729.9010.0810.2810.57123456789987654321Na2CO210H2O 分子量=286.2;0.1M 溶液为 28.62 克/升。N2HCO3 分子量=84.0;0.1M 溶液为 8.40 克/升。 15 “PBS”缓冲液标准缓冲液的配制及常用数据 2004.115PH 7.6 7.4 7.2 7.0H2ONaClNa2HPO4NaH2PO41000
18、8.52.20.110008.52.20.210008.52.20.3100ml8.5g2.2g0.4g三、实验室中常用酸碱的比重和浓度名称 分子式 分子量比重 面分浓度%（W/W）当量浓度（粗略）N 配 1 升 1N 溶液所需毫升数盐酸 HCl 36.47 1.19 37.2 12.0 841.18 35.4 11.8 1.10 20.0 6.0 硫酸 H2SO4 98.09 1.84 95.6 36.0 281.18 24.8 6.0 硝酸 HNO2 63.02 1.42 70.98 16.0 631.40 65.3 14.5 1.20 32.36 6.1 冰乙酸 CH3COOH 60.0
19、5 1.05 99.5 17.4 59乙酸 CH3COOH 98.06 36 6.0 磷酸 H2PO4 35.05 1.71 85.0 15,30,45(依反应而定) 67(以 15N 计)氨水 NH4OH 0.90 15 670.904 27.0 14.3 700.91 25.0 13.4 0.96 10.0 5.6 氢氧化钠溶液 NaOH 40.0 1.5 50.0 19 53四、硫酸铵饱和度的常用表1调整硫酸铵溶液饱和度计算表（25）硫整硫酸铵终浓度,%饱和度10 20 25 30 33 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 90 100每 1 升溶液加固体硫酸铵的
20、克数 0 56 114 144 176 196 209 243 277 313 351 390 430 472 516 561 662 76710 57 86 118 137 150 183 216 251 288 326 365 406 449 494 592 69420 29 59 78 91 123 155 190 225 262 300 340 382 424 520 61925 30 49 61 93 125 158 193 230 267 307 348 390 485 58330 19 30 62 94 127 162 198 235 273 314 356 449 54633
21、12 43 74 107 142 177 214 252 292 333 426 52235 31 63 94 129 164 200 238 178 319 411 50640 31 63 97 132 168 205 245 285 375 46945 32 65 99 134 171 210 250 339 43150 33 66 101 137 176 214 302 39255 33 67 103 141 179 264 35360 34 69 105 143 227 31465 34 70 107 190 27570 35 72 153 23775 36 115 19880 77
22、157硫酸铵初浓度，%饱和度90 79在 25下，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每升溶液所加固体硫酸铵的克数。2 调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0）标准缓冲液的配制及常用数据 2004.116在 0下，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每 100 毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。常见蛋白质分子量参考值 （单位：dalton）蛋白质 分子量肌球蛋白myosin甲状腺球蛋白thyroglobulin-半乳糖苷酶-galactosidase副肌球蛋白paramyosin磷酸化酶 aphosphorylase a血清白蛋白serum albuminL-氨基酸氧化酶L-amino acid oxidase地
23、氧化氢酶catalase丙酮酸激活酶pyruvate kinase谷氨酸脱氢酶glutamate dehydrogenase亮氨酸氨肽酶glutamae dehydrogenase-球蛋白，H 链-globulin, H chain延胡索酸酶（反丁烯二酸酶）fumarase卵白蛋白ovalbumin醇脱氢酶（肝）alcohol dehydrogenase (liver)烯醇酶enolase醛缩酶aldolase肌酸激酶creatine kinase胃蛋白酶原pepsinogenD-氨基酸氧化酶D-amino acid oxidase醇脱氢酶（酵母）alcohol dehydrogenase (
24、yeast)甘油醛磷酸脱氢酶dlyceraldehyde phosphate dehydrogenase原肌球蛋白tropomyosin乳酸脱氢酶lactate dehydrgenase胃蛋白酶pepsin转磷酸核糖基酶phosphoribosyl transferase天冬氨酸氨甲酰转移酶，C 链 aspertate transcarbamylase, C chain羧肽酶 Acarboxypeptidase A碳酸酐酶carbonic anhydrase枯草杆菌蛋白酶subtilisin220,000165,000130,000100,00094,00068,00063,00060,000
25、57,00053,00053,00050,00049,00043,00041,00041,00040,00040,00040,00037,00037,00036,00036,00036,00035,00035,00034,00034,00029,00027,600标准缓冲液的配制及常用数据 2004.117-球蛋白，L 链 -blobulin,L chain糜蛋白酶原（胰凝乳蛋白酶原）chymotrypsinogen胰蛋白酶trypsin木瓜蛋白酶（羧甲基）papain (carboxymethyl)-乳球蛋白 -lactoglobulin烟草花叶病毒外壳蛋白（TWV 外壳蛋白）TWV coa
26、t protein肌红蛋白myoglobin天门冬氨酸氨甲酰转移酶，R 链aspartate transcarbamylase, R chain血红蛋白h(a)emoglobinQ 外壳蛋白Q coat protein溶菌酶lysozymeR17外壳蛋白R 17 coat protein核糖核酸酶ribonuclease 或 RNase细胞色素 Ccytochrome C糜蛋白酶（胰凝乳蛋白酶）chymotrypsin23,50025,70023,30023,00018,40017,50017,20017,00015,50015,00014,30013,75013,70011,70011,00
27、0 或 13,000常见蛋白质等电点参考值 （单位： pH）蛋白质 等电点鲑精蛋白salmine鲱精蛋白clupeine鲟精蛋白sturline胸腺组蛋白thymohistone珠蛋白（人）globin(human)卵白蛋白ovalbuin伴清蛋白conal bumin血清白蛋白serum albumin肌清蛋白myoal bumin肌浆蛋白myogen A-乳球蛋白 -lactoglobulin卵黄蛋白livetin 1球蛋白（人） 1-globulin(human) 2球蛋白（人） 2-globulin(human)肌球蛋白 Amyosin A原肌球蛋白myosin A铁传递蛋白sider
28、ophilin胎球蛋白fetuin血纤蛋白原fibrinogen-眼晶体蛋白-crystallin-眼晶体蛋白-crystallin花生球蛋白arachin伴花生球蛋白conarrachin角蛋白类keratins还原角蛋白keratein胶原蛋白collagen鱼胶ichthyocol白明胶gelatin-酷蛋白 -casein-酷蛋白 -casein-酷蛋白 -casein-卵清粘蛋白-ovomucoid 1-粘蛋白 1-mucoprotein卵黄类粘蛋白vitellomucoid尿促性腺激素urinary gonadotropin溶菌酶lyso zyme肌红蛋白myoglobin血红蛋白
29、（人）hemoglobin(human)血红蛋白（鸡）hemoglobin(hen)血红蛋白（马）hemoglobin(horse)12.112.111.7110.87.54.71; 4.596.8;7.14.7-4.93.56.35.1-5.34.8-5.05.8;6.67.3;8.25.2-5.55.15.93.4-3.55.5-5.84.86.05.13.93.7-5.04.6-4.76.5-6.84.8-5.24.7-5.04.0-4.14.55.8-6.03.83-4.411.8-2.75.53.2-3.311.0-11.26.997.077.236.92标准缓冲液的配制及常用数据
30、2004.118血蓝蛋白hemerythrin蚯蚓血红蛋白chlorocruorin血绿蛋白chlorocruorin无脊椎血红蛋白erythrocruorins细胞色素 Ccytochrome C视紫质rhodopsin促凝血酶原激酶thromboplastin 1-脂蛋白 1-lipoprotein 1-脂蛋白 1-lipoprotein-卵黄脂磷蛋白-lipovitellin芜菁黄花病毒turnip yellow vvirus牛痘病毒vaccinia virus生长激素somatotropin催乳激素prolactin胰岛素insulin胃蛋白酶pepsin糜蛋白酶（胰凝乳蛋白酶chym
31、otrypsin牛血清白蛋白bovine serum albumin核糖核酸酶（牛胰）ribonuclease 或 Rnase(bovine pancreas)甲状腺球蛋白thyroglobulin胸腺核组蛋白thymonucleohistone4.6-6.45.64.3-4.54.6-6.29.8-10.14.47-4.575.25.55.45.93.755.36.855.735.351.0 左右8.14.97.84.584 左右元素的原子量表（录自 1997 年国际原子量表，并全部取四位有效数字）元素 符号 原子量 原子序数锕银铝镅氩砷砹金硼钡铍铋锫溴碳钙镉铈锎氯锔钴铬铯铜镝镊锿铕氟铁镄A
32、cAgAlAmArAsAtAuBBaBeBiBkBrCCaCdCeCfClCmCoCrCsCuDyErEsEuFFeFm227.0107.926.9824339.9574.92210197.010.81137.39.012209.024779.9012.0140.08112.4140.125135.4524758.9352.00132.963.55162.5167.3254152.019.0055.852578947139518338579556483973502048589817962724552966689963926100标准缓冲液的配制及常用数据 2004.119钫镓钆锗氢氦铪汞钬碘铟
33、铱钾氪镧锂镥铹钔镁锰钼氮钠铌钕氖镍锘镎氧锇磷镁铅钯钷钋镨铂钚镭铷铼铑氡钌硫锑钪硒硅钐锡锶钽FrGaGdGeHHeHfHgHoIInIrKKrLaLiLuLrMdMgMnMoNNaNbNdNeNiNoNpOOSPPaPbPdPmPoPrPtPuPaPbPePhPnPuSSbScSeSiSmSnSrTa22369.72157.372.591.0084.003178.5200.6164.9126.9114.8192.239.1083.80138.96.941175.026025824.3154.9495.9414.0122.9992.91144.220.1858.70259237.016.00190
34、.230.97231.0207.2106.4147209140.9195.1244226.085.47186.2102.9222101.132.06121.844.9678.9628.09150.4118.787.62180.987316432127280675349771936573711031011225427114160102810293876159182466184597894883775458644165121341462503873标准缓冲液的配制及常用数据 2004.1110铽锝碲钍钛铊铥铀钒钨氙钇镱锌锆TbTcTeThTiTlTmUVWXeYYbZnZr158.997127.6232.047.90204.4168.9238.050.94183.9131.388.91173.065.3891.22654352902281699223745439703040
