1、环境生物学实验一,生物显微镜的使用和细胞形态结构的观察,实验目的,1. 了解普通光学显微镜的构造和各部分的性能，并掌握正确的使用及维护方法。 2. 在显微镜下观察植物和动物细胞,了解动物细胞与植物细胞结构的异同点。 3. 掌握生物绘图法。 4. 理解细胞是生命体结构与生命活动的基本单位。,显微镜的基本结构,机械部分 镜座 镜柱 镜臂 镜筒 载物台 转换器 调焦器 聚光器调节螺旋,光学部分 物镜 目镜 聚光器 反光镜 内光源照明系统,显微镜的使用步骤： （1）取、放显微镜的正确做法 一手握镜臂，一手托镜座托在胸前。放在距离桌边5-10cm左右为好。 （2）对光 先将低倍物镜对准通光孔，调整反光镜
2、（外光源显微镜）或电源电压，使视野中的光线明亮而不刺眼。 （3）放置标本 将玻片中有标本的地方移到通光孔的中央。,显微镜的使用步骤： （4）调焦点 慢慢转动粗准焦螺旋，从侧面注视使物镜与玻片接近工作距离5mm左右。 （5）使用低倍镜观察 移动标本，找到需要观察的位置。用细准焦螺旋调清楚物像。 （6）使用高倍镜观察 将高倍镜换入，然后用细准焦螺旋调清楚物像。,（7）使用油镜观察 在观察线粒体、细菌等细小的结构时需要使用100倍的物镜。100倍的物镜需要在油的介质中工作，故称油镜或油浸物镜。油镜需在物镜与标本之间充上一种折光率与玻璃一样高的介质。通常使用香柏油，才能使物像清晰。 （8）使用油镜的方
3、法 先低倍，后高倍，再用油镜。用油镜前要将观察对象移到视野的中央，移开高倍物镜，将香柏油滴在标本的盖玻片上，直接换入油镜，使镜头浸在油中。转动细准焦螺旋，调整焦点，使物像清晰。 （9）观察后用“显微镜的保养”中介绍的方法及时去除镜头上的香柏油。,需要注意的几个问题,一、正确使用准焦螺旋的问题 实验中极易出现以下错误: （1） 不经过低倍镜，直接在高倍镜下调焦； （2）在高倍镜下用粗准焦螺旋调焦，且转动的速度很快； （3）不管载物台上升或下降，眼睛始终在往目镜中看视野。调节焦距一定要在低倍镜下调，先转动粗准焦螺旋，物镜靠近载玻片，当视野中出现模糊的物像时，就要换用细准焦螺旋调节，缩小寻找范围，提
4、高找到物像的速度。,二、物镜转换的问题 使用低倍镜后换用高倍镜，往往喜欢用手指直接推转物镜，这样容易使物镜的光轴发生偏斜，原因是转换器的材料质地较软，精度较高，螺纹受力不均匀很容易松脱。一旦螺纹破坏，整个转换器就会报废。手握转换器的下层转动板转换物镜。,三、正确用眼的问题 用显微镜观察物体时，应双眼同时睁开，左眼往目镜内注视，右眼试图向视野内注视，如此反复训练，就会达到双眼同时睁开观察的要求。,四、使用结束后显微镜的复原显微镜使用完毕,关闭电源,拔下插头；将物镜镜头转开,取下玻片,擦净载物台和物镜,调动粗准焦螺旋,将载物台下降至最低点,将各部分还原。罩上防尘罩。 五、显微镜的保养 （1）注意防
5、潮； （2）保持清洁,注意防尘(镜头的清洁方法)； （3）防止酸碱等腐蚀性的液体玷污显微镜,在观察临时装片时,防止里面的液体流出。,实验内容,1. 动物细胞结构的观察,（1）人口腔粘膜细胞涂片标本的制备吸取醋酸洋红或碘液，滴一滴在一干净载玻片中央，将消毒牙签粗的一端伸入口腔，在口腔颊内壁上轻轻刮取粘膜上皮细胞，将刮下的白色粘性物质放入载玻片上的染液内，分散均匀。染色5-10 min后,加盖盖玻片（细节）。,（2）观察 将制备好的装片标本置显微镜下观察：先用低倍镜观察，可见人口腔粘膜上皮细胞呈扁圆形或扁平多边形。再寻找较分散、轮廓清晰的单个细胞，移至视野中央转高倍镜观察；在高倍镜下观察的结构:
6、细胞膜，细胞核，细胞质。,2、植物细胞结构的观察,（1）临时装片的制作 取一干净载玻片，滴一滴碘液在玻片中央。用尖头镊子从洋葱肉质鳞片内表面撕下一小块膜质表皮，平铺在载玻片的碘液滴上，用镊子将其轻轻压入液滴中，使之展开，盖上盖玻片，用吸水纸吸去盖玻片周围多余的碘液。,洋葱鳞片表皮细胞临时装片标本的制备与观察。,（2）观察 将制备好的装片标本置显微镜下观察： 先用低倍镜观察，可见许多长柱状细胞排列整齐，彼此相连。选择其中一个较典型的细胞移至视野中央，再转高倍镜观察， 在高倍镜下可见细胞最外面为一层棕黄色较厚的结构，即细胞壁。细胞壁以内是着色较浅近于透明的细胞质，细胞质内有一个或几个或大或小的透明
7、的液泡，在细胞中央或靠近细胞壁，有一个椭圆形细胞核，调节细调螺旋，可见核内有1-2个染成棕黄色，折光较强的核仁，细胞质外围有一薄层细胞质膜，但在光镜下不易分辨。,红辣椒表皮细胞的观察 （1）临时装片的制作剪取一小片辣椒，用解剖刀切去肉质部分，然后用刀片轻刮，将肉质部分全部刮去，只剩下一层表皮。然后，用镊子将表皮放在载玻片上，加上一滴水，盖上盖玻片。 （2）观察 先在低倍镜下找到标本，然后按照上面的方法，逐渐增加放大倍数并调节粗、细调焦螺旋直到看到清晰的图像。观察细胞的形态，注意是否能看到胞间连丝。,体视显微镜又称实体显微镜或解剖镜。观察的是标本的表面，有很强的立体感。,实验报告,实验目的 实验
8、材料 实验试剂和器械 实验内容（显微镜的使用和细胞结构的观察） 实验结果(绘制人口腔黏膜细胞和洋葱鳞片表皮细胞) 思考题,生物绘图注意事项,绘图时使用铅笔(HB) 在图的正下方表明图题 图注用直线引出标注结构的名称,并且注字最好在图的右侧或两侧排成竖行,上下尽可能对齐;引出的直线间不可交叉 画图时要线条流畅匀称 染色深浅不同的地方用点的疏密不同来表示,不可用阴影表示 图中的点要垂直点下去,不可拖尾,带勾,1、普通光学显微镜视野中看到的物像是正的还是倒的？ 2、你看到的物像究竟被放大了多少倍？ 3、不透明纸上的数字能否在普通光学显微镜看清楚？ 4、放大倍数不同，看到的细胞个数与大小有什么不同？ 5、通过观察，动物细胞和植物细胞的结构有哪些区别？,思考题,
