1、12 月 4 日 蛋白质的提取与分离高考频度： 难易程度：下列有关提取和分离血红蛋白实验的叙述，错误的是A该实验的材料必须选用鸡血B通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质，此为样品的粗提取C凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质D电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小差异分离蛋白质【参考答案】A蛋白质提取与分离的实验操作的注意事项1红细胞的洗涤：洗涤次数不能过少；低速、短时离心。2色谱柱的装填：装填尽量紧密，降低颗粒间隙；无气泡；洗脱液不能断流。3凝胶的预处理：沸水浴法时间短，还能除去微生物和气泡。4色谱柱成功标志：红色区带均匀一致地移动。1红细胞中含有大量血红蛋
2、白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是A血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理粗分离纯化纯度鉴定” 的顺序进行B纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液C样品处理过程中用蒸馏水的目的是使红细胞吸水涨破释放出血红蛋白D可经 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定2镰刀型细胞贫血症是一种由基因突变引起的遗传病，患者的红细胞是弯曲的镰刀状。这样的红细胞容易破裂，使人患溶血性贫血，严重时会导致死亡。某科学兴趣小组计划从血红蛋白的成分是否变化来开展研究性学习。下列是该小组成员获得纯度很高的血红蛋白的实验过程，不正确的一项
3、是A对红细胞进行洗涤，在加入蒸馏水和甲苯使红细胞破裂释放出血红蛋白后，将混合液静置一段时间后分层获得血红蛋白溶液B将血红蛋白溶液装入透析袋中透析，可达到粗分离的目的C利用凝胶色谱操作对血红蛋白进行纯化D使用 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定，以获得纯度很高的血红蛋白3如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置。请据图回答下列问题：（1 ）血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，它在红细胞中的作用体现了蛋白质的_功能。（2 ）甲装置用于_，目的是 _。用乙装置分离蛋白质的方法叫_，是根据_分离蛋白质的有效方法。（3 ）甲装置中，B 是血红蛋白溶液，则 A 是_；乙装置中，C 溶液的作
4、用是_。（4 ）用乙装置分离血红蛋白时，待_ 时，用试管收集流出液，每 5 mL 收集一管，连续收集。1 【 答案】B【解析】血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理粗分离纯化纯度鉴定”的顺序进行，A 正确；纯化过程中要用缓冲溶液充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液，B 错误；样品处理过程中用蒸馏水的目的是使红细胞吸水涨破释放出血红蛋白，C 正确；可经 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定，D 正确。2 【 答案】A【解析】对样品进行处理时，应先通过低速短时间离心的方法对红细胞进行洗涤，再加入蒸馏水和甲苯使红细胞破裂释放出血红蛋白后，将混合液置于离心管中，以 2 000r/min 的转速离心 10 min 后分层获得血红蛋白溶液，A 项错误；将血红蛋白溶液装入透析袋中，再将透析袋放入盛有 300 mL 的物质的量浓度为 20 mmol/L 的磷酸缓冲液中（pH 为 7.0），透析 12 h，可达到粗分离的目的，B 项正确；可利用凝胶色谱操作对血红蛋白进行纯化，C 项正确；使用 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定，以获得纯度很高的血红蛋白，D 项正确。3 【 答案】（1）运输（2 ）透析（粗分离） 去除样品中相对分子质量较小的杂质 凝胶色谱法 相对分子质量的大小（3 ）磷酸缓冲溶液 洗脱血红蛋白（4 ）红色的蛋白质接近色谱柱的底端
