1、细菌的接种及注意事项,灭菌接种环,1.要充分灭菌接种环，以免污染其标本 。2.要适当冷却再取标本，以免带不出标本中的菌种。,取标本,1.蘸取标本时应适量，以免标本太少漏检。 2.液体标本，如尿液，应注意混匀。,接种,1.细菌的接种方法有很多，如平板划线法、斜面接种法、穿刺接种法，等等。但我们用的最多的是： 平板划线法意义 指把混杂在一起的微生物，用接种环在平板培养基表面，通过分区划线，稀释得到较多的独立分布的单个菌落，即将样本在固体培养基表面多次做由点到线稀释而达到分纯的目的。,一区：所占区域大约是平板面积的1/51/4,二区：由一区向二区带出三四条平行线,三区：由二区引出三四次，但 三区面积
2、最大,CO2在细菌培养中的意义,1有些细菌在初次分离培养时，需要5-10的CO2。因为细菌在生长过程中能够分解培养基中的某些含氮物质产生氮，对该菌有杀灭作用，而CO2能中和细菌产生的氮，以减少对细菌的毒性。如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛布鲁菌等。2.为细菌提供碳源，促进细菌的生长。如肺炎链球菌，草绿色链球菌。,在细菌室的培养箱上有一个CO2的开关，为什么要用CO2呢？,常见细菌的鉴别及其特点,阳性球菌,葡萄球菌-金黄色葡萄球菌,金葡特点,是人类化脓性感染最常见的病原菌， 可以引起局部感染，也可以引起全身感染。 血浆凝固酶，阳性。 血平板上呈黄色菌落，大而凸起，表 面光滑，有溶血环。 G+阳性球
3、菌，葡萄状排列，无芽孢，无荚膜。,1.,2.,3.,4.,葡萄球菌-表面葡萄球菌,表葡特点,正常存在于人体皮肤、黏膜表面，多见于院内感染，如体内异物留置，静脉导管等 血浆凝固酶，阴性 表葡形态同金葡相似，但是为白色、扁平菌落，无溶血环,1.,2.,3.,3.,链球菌,常见的链球菌主要有化脓性链球菌、草绿色链球菌、肺炎链球菌 。根据抗原结构不同可以把链球菌分为A、B、C、D等二十个群，但对人类有致病性的大多数属于A群，少量属于B群。,根据在血平板上溶血分为以下三种：甲型（型）溶血性链球菌，又称草绿色链球菌，菌落周围有草绿色溶血环，致病力弱，是条件致病菌。乙型（型）溶血性链球菌，产生强烈的溶血毒素
4、，在血平板上可使菌落周围出现24mm的无色透明溶血环。丙型（r-）链球菌，菌落周围无溶血环，又叫不溶血性链球菌，通常不致病。,肺炎链球菌,菌落特点：在血平板上0.51.5mm,灰白色半透明，表面光滑，扁平，周围环绕草绿色溶血环，培养放置24h以上的菌落，还会因为产生自溶酶的作用，而致菌落中央塌陷而边缘隆起，呈脐窝状。,肺炎链球菌、群、群的区分：pt试验,抑菌环14, 鉴定为肺链,杆菌肽试验,群,CAMP试验,B群,Opt实验,杆菌肽实验,11,葡萄球菌与链球菌的鉴别：,1.涂片涂片革兰染色，葡萄球菌呈葡萄串样，链球菌呈链状。2M-H试验当染片不能区别时，接种到M-H平板，长成菌落之后，可挑单个
5、菌落做触酶试验，+是葡萄球菌，是链球菌。,肠球菌,肠球菌属特点：+，成圆球形或椭圆形，单个，成对，或短链，均可。在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑，0.51.0mm大小的菌落，可有溶血现象。,以粪肠球菌和屎肠球菌为常见：,阿拉伯糖 山梨醇 屎肠球菌 阳性 阴性 粪肠球菌 阴性 阳性,阴性杆菌,大肠杆菌：G-杆菌，有鞭毛、菌毛，无芽胞。菌落23mm,圆形凸起，灰白湿润，光滑半透明，边缘整齐。某些菌落可产生有透明溶血环。,鲍曼不动杆菌,菌落特点： 圆形、凸起光滑、边缘整齐不透明、灰白色 有粘性的菌落 多数菌落不溶血 在中国兰上为粉红色菌落,菌落特点： 较大菌落、凸起、灰白色黏液型、 相邻菌落容易
6、发生融合 可挑出长丝状细丝,肺炎克雷伯杆菌,变形杆菌,迁徙生长,菌落特点： G-，两边钝圆，有明显的多形性，呈球形或丝状，无芽胞无荚膜，有鞭毛，运动活泼。普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株呈迁徙扩散生长，迅速弥漫。波纹状薄膜布满整个培养基表面。,嗜麦芽假单胞菌,菌落特点： G-杆菌，细长略弯曲。不透明，灰黄色菌落，在血平板上可产生氨味。本菌氧化酶阴性，与大多数假单胞菌不同。,在普通琼脂培养基上能产生水溶性绿色素，使整个培养基变为绿色 菌落灰绿色、半透明、大而扁平、表面湿润、边缘不齐；有金属光泽；有生姜样芳香气味；菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。,铜绿假单胞菌,铜绿假单胞菌,流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌,在巧克力平板上生长，菌落为灰白色，扁平，半透明的小菌落,卫星现象： 当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培养时，靠近葡萄球菌菌落附近可见到流感嗜血杆菌菌落较大，远离葡萄球菌的菌落较小，称为卫星现象。,谢谢大家！,
