1、对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析,2,本章内容,第一节 典型药物的分类与性质 第二节 鉴别试验 第三节 特殊杂质的检查 第四节 含量测定（亚硝酸钠滴定法） 第五节 体内药物分析（自学）,3,回顾,4,局麻药,局麻药是应用于局部神经末梢或神经干周围，暂时、完全、可逆性地组断感觉神经冲动发生与传导，在意识清醒下，是局部痛觉等感觉暂时消失的药物。对各类组织无损伤性影响,5,临床应用,表面麻醉 要求局麻药的穿透力强常用药物：丁卡因、利多卡因、可卡因 浸润麻醉 加少量肾上腺素减少吸收常用药物：利多卡因、普鲁卡因 传导麻醉常用药物：利多卡因、普鲁卡因、布比卡因 蛛网膜下腔麻醉常用药物：利多卡因、丁卡
2、因、普鲁卡因 硬膜外麻醉常用药物：利多卡因、丁卡因、布比卡因,6,局麻药的化学结构与作用,局麻药的 基本结构,亲脂性芳香环-保证药物的脂溶性,中间连接功能基团（酯、酰胺）,亲水性的胺基-叔胺（刺激性小）既保证药物的水溶性，也提供了与Na通道受点结合的结构,局麻药即通过稳定神经细胞膜上的钠离子通过，降低神经细胞的兴奋性，从而阻断神经冲动的传导,7,第一节 结构与性质,对氨基苯甲酸酯类 酰苯胺,例：benzocaine, procaine hydrochloride,例：adrenaline, dopamine hydrochloride,8,代表药物有：,盐酸普鲁卡因,苯佐卡因,盐酸丁卡因,be
3、nzocaine,procaine hydrochloride,tetracaine hydrochloride,一、 对氨基苯甲酸酯类,9,结 构 (Structure),1. 芳伯氨基：重氮化偶合反应,2. 酯键：水解,3. 叔胺氮原子：弱碱性，与酸成盐，生物碱沉淀剂反应 4.苯环：紫外吸收,5. 溶解性：游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；盐酸盐易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。,化学性质 (Feature),10,代表药物有：,对乙酰氨基酚paracetamol（非甾体抗炎药）,盐酸利多卡因lidocaine hydrochloride,二、 酰苯胺类,11,lidocaine hydroc
4、hloride,1.酰胺水解成芳伯氨基 2. 醋酸 乙醇/硫酸 醋酸乙酯,3. 弱碱性：叔胺氮原子生物沉淀剂沉淀,4. 酰胺氮原子与金属离子络合显色,bupivacaine hydrochloride,结 构 (Structure),化学性质 (Feature),(共性),(特性),12,芳伯氨基：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺,潜在芳伯氨基：对乙酰氨基酚、利多卡因,一、重氮化偶合反应,第二节 鉴别试验 (Identification),13,HCl,重氮盐,偶氮化合物,14, 盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化合物沉淀。,问题：如何鉴别普鲁卡因与丁卡因
5、？,15,二、与三氯化铁反应,（蓝紫色）,16,三、与金属离子反应与铜和钴离子反应 具有芳酰胺结构的，如盐酸利多卡因 （1）硫酸铜/碳酸钠试液蓝紫色配合物 （2）氯化钴/酸性溶液亮绿色细小钴盐沉淀,显黄色（溶于氯仿）,17,2. 羟肟酸铁的反应,普鲁卡因胺,18,3. 与汞离子反应芳酰胺类，如盐酸利多卡因 硝酸汞/硝酸，煮沸对氨基苯甲酸酯类，如苯佐卡因 硝酸汞/硝酸，煮沸,黄色,红色或橙黄色,19,四、水解产物的反应 1、苯佐卡因,20,2、盐酸普鲁卡因,21,五、制备衍生物测熔点 1. 盐酸利多卡因 三硝基苯酚 三硝基苯酚利多卡因（mp. 228232）盐酸布比卡因 三硝基苯酚布比卡因（mp
6、. 194）2. 盐酸丁卡因 25硫氰酸铵溶液/5醋酸溶液 丁卡因硫氰酸盐（ mp. 131 ）,22,六、紫外特征吸收光谱,23,（七）红外吸收光谱,盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡因胺,波数cm-1 波数cm-1,鉴别试验 (Identification),酯羰基C=O 1692 酯基C-O 1271, 1170, 1115 二乙胺盐N-H 2585 2645（略向高波数） 1550（ N-H 酰胺带） 1280（ N-H酰胺带 ）,24,一、对乙酰氨基酚中的特殊杂质,工艺：,对乙酰氨基酚,有色氧化产物,对氨基酚的检查,第三节 特殊杂质检查 (Detection of specific impur
7、ities),乙酰化不完全或贮藏不当引起水解毒性较大并有色泽,25,1、对氨基酚的检查,ChP2005 标准对照法比色法 原理：,ChP2010 HPLC自身对照法,26,2、乙醇溶液的澄清度与颜色：中间体对氨基酚的有色氧化产物在乙醇中显橙红色或棕色。（比浊，比色）,3、有关物质：中间体、副产物及分解产物（例：对氨基酚、对氯乙酰苯胺、O-乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等） ChP 2005规定：以对氯乙酰苯胺为对照品，TLC 限度检查。 ChP 2010规定：以对氯乙酰苯胺为对照品，HPLC法外标法。,27,二、盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,ChP2005 检查
8、方法：TLC法对氨基苯甲酸对照品对照，对二甲氨基苯甲醛溶液显色。限度：对氨基苯甲酸，不得超过1.2%。ChP2010 检查方法：HPLC法 外标法限度：对氨基苯甲酸，不得超过0.5%。,黄色,28,色谱法,亚硝酸钠 滴定法,非水溶液 滴定法,分光 光度法,第四节 含量测定 (Assay),spectrometry,sodium nitrite method,non-aqueous titrimetry,chrometography,29,一、亚硝酸钠滴定法 sodium nitrite method,1、原理：,2、测定的主要条件： （1）加入适量溴化钾试液 （2）加入过量盐酸1:2.56 （
9、3）室温10 30 （4）滴定管尖端插入液面下滴定,3、终点指示方法： （1）永停法 （2）外指示剂法（碘化钾淀粉）,30,2.操作中的主要条件滴定液NaNO2及反应生成的重氮盐都不稳定 反应速度受多种因素影响,（1）加入适量溴化钾试液 （2）加入过量盐酸1:2.56 （3）室温10 30 （4）滴定管尖端插入液面下滴定,31,（1）反应速度与药物结构的关系,1) 氨基邻、对位有吸电基时,如 SO3H; -COOH; -NO2; -X等, 使氨基的碱性降低，游离芳伯胺浓度增大，重氮化反应速度加快,2) 相反，供电基, 如-R; -OR, 使反应速度降低,32,1) 酸的种类重氮化反应在HBr、
10、HCl、H2SO4中反应速度是 HBrHClH2SO4 ( KBr + HCl ),（2）反应速度与酸及酸度的关系,33,理论上: 芳胺盐酸12 mol 实际上: 芳胺盐酸12.56 mol 原因: ?,强酸性可加速反应重氮盐在酸性下稳定酸性下避免副反应发生,2) 酸的用量,酸度不足未反应的芳胺与生成的重氮盐产生偶氮氨基化合物,酸度过大游离芳伯氨的量减小(成盐), 影响重氮化反应速度, 使反应速度减慢,34,温度升高,（3）反应速度与滴定温度和速度的关系,反应速度加快重氮盐分解速度加快滴定液亚硝酸钠逸失速度加快,低温下慢速进行 10 30 ,操作法(中国药典)控制滴定速度 在30C以下，滴定管
11、尖端插入液面下2/3处 不断搅拌快速加入大部分标准溶液(约80%90%)；提出液面后缓缓(15min/滴)滴定至终点,提高初始反应速度 避免HNO2逸失 降低近终点滴定速度 避免终点提前,35,指示终点的方法永停法电位法外指示剂法内指示剂法,中国药典,36,1）永停法(dead stop),终点前：回路中无电流，电流计指针摆动、回零 终点时：溶液中存在微过量的NaNO2发生氧化还原反应，电流计指针不回零,在两个铂电极间外加10200mV电压，并且在回路中串联一个灵敏的检流计（10A-9/格）,阴极：,阳极：,37,电极：甘汞-铂电极 终点：溶液中稍过量的NaNO2使电位产生突跃 USP采用这个
12、方法指示终点,2）电位法,38,指示剂：淀粉-KI糊剂或试纸,原理：终点时，溶液中稍过量的NaNO2 在酸性条件下氧化 KI 析出I2, I2 遇淀粉显蓝色,3）外指示剂法,缺点：溶液显强酸性, KI遇光能被空气氧化析出碘, 近终点时, 可呈现蓝色造成误判由于经常蘸取溶液试验, 可造成滴定液的损失而引入误差方法难掌握,39,特点：操作简便 缺点：生成重氮盐常带有颜色干扰指示剂颜色变化的观察 应用：较少,4）内指示剂法,40,二、非水溶液滴定法 non-aqueous titrimetry,盐酸丁卡因 盐酸利多卡因,侧链烃胺的叔胺氮,侧链哌啶环的叔胺氮,弱碱性,高氯酸非水滴定,注：滴定前滴加醋酸
13、汞溶液，以除去氢卤酸的干扰,盐酸丁卡因加醋酐以突出终点； 例：盐酸利多卡因的非水滴定反应过程：,指示剂：结晶紫,指示剂：萘酚苯甲醇,盐酸布比卡因,41,三、分光光度法 ( spectrometry ),对乙酰氨基酚在257nm波长处有最大吸收，中国药典2005版采用百分吸收系数（ ）法，测定对乙酰氨基酚的含量。,【含量测定】 取本品约40mg，精密称定，置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，至100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照紫外可见分光广度法（药典Chp2005版附录A），在257nm的波长处测定吸光度
14、，按C8H9NO2的吸收系数（ ）为715计算，即得。,例：对乙酰氨基酚、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊、颗粒剂,42,比色法,芳伯氨基的重氮化偶合反应生成有色偶氮染料专属性差 盐酸普鲁卡因与1,2-萘醌-4-磺酸钠溶液反应生成棕红色化合物适用于盐酸普鲁卡因及其制剂的常规分析,快速荧光测定,盐酸普鲁卡因胺结构中的芳伯氨基与荧胺反应，生成荧光物， 可在400nm、485nm波长处测定荧光强度较重氮化法灵敏、简便，适用于普鲁卡因胺制剂的测定。,43,以苯甲酸为内标，可以同时测定盐酸普鲁卡因注射液中的普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸（PABA），不需分离提取，准确简便。色谱条件（色谱柱、流动相、检测器）测定方法（供试品溶液、对照品溶液的制备，进样量，计算方法）,高效液相色谱法 ( HPLC ),44,课 后 小 结,结构：芳香环（芳伯胺基）；酯、酰胺；叔胺 性质：芳伯胺基特性、碱性、水解性、紫外吸收重氮化-偶合反应（芳伯胺基或潜在芳伯胺基）与金属离子反应（芳酰胺）水解反应（酯-普鲁卡因）,含量测定：,杂质检查：,鉴别,亚硝酸钠法,测定条件,终点指示方法,适用范围,45,谢谢,46,幻灯片放映结束！O(_)O谢谢大家耐心观看！,47,48,目的地,取经,
