1、page 0 2010 Roche,HPV -DNA检测现状及2012最新国际宫颈癌筛查指南,内容： 1. HPV介绍 2. HPV-DNA检测产品及各自特点 3. 2012最新国际宫颈癌筛查指南,HPV介绍,根据感染组织类型分为： 皮肤组织 粘膜组织,HPV介绍,E：早期基因区编码早期6个蛋白 L：晚期基因区编码晚期2个蛋白,感染后的存在状态： 状态一：非整合状态 状态二：整合到宿主细胞,http:/ HC2,原理：基于信号放大的酶标板技术的化学发光检测的核酸杂交检测方法（杂交捕获） 流程：裂解杂交捕获反应冲洗信号收集判读 时间：手工操作3.5小时，仪器操作4.5小时 结果：检测13种HPV
2、高危型，不分型 主要问题：与个别HPV亚型会发生交叉反应，无内对照，约5%假阳性率,DML2000,HPVDNA检测,Hologic Cervista HRHPV,原理：基于专利Invader 酶切信号放大技术 流程：磁珠分离核酸提取酶切信号放大荧光检测 时间：4小时自动化孵育 + 2小时人工操作（半自动） 结果：14种高危型16、31、33、52、58、18、39、45、66、68、51、56、66，不分型 主要问题：可能与其它HPV如HPV67和70发生交叉反应，从而产生假阳性结果,HPVDNA检测,Hologic Cervista(r)HPV 16/18,原理：基于专利Invader 酶
3、切信号放大技术 流程：磁珠分离核酸提取酶切信号放大荧光检测 时间：4小时自动化孵育 + 2小时人工操作（半自动） 结果：仅对16、18分型 主要问题：可与高水平的高危型HPV31发生交叉反应。非常低的HPV感染或样本可能导致假阴性,HPVDNA检测,ROCHE PCR多色荧光探针法,原理：基于PCR反应结合不同荧光染料的探针检测高危型HPV并对16、18分型 流程：核酸提取PCR扩增检测 时间：5小时（手工操作时间15分钟） 结果：Cutoff值，14种高危型，并对16、18分型 最新产品，文献见美国ATHENA实验（Lancet Oncol）,cobas 4800 HPV检测系统,GT 16
4、,高危型混合 (12 GT),GT 18,31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68,HPVDNA检测,凯普21种人乳头状瘤病毒（HPV）分型检测试剂盒,原理：PCR+基因芯片导流杂交技术 流程：核酸提取PCR扩增导流杂交显色 时间： 3.5-4个小时（手动） 结果：21格某格显色即为某HPV亚型阳性（13+5+3），对21种HPV分型（含其它HPV亚型） 主要问题：手工操作，易交叉污染，没有经过临床实验,HPVDNA检测方法,亚能人乳头瘤病毒基因分型(23型)检测试剂盒,原理：使用自行设计的HPV基因组中的特异性引物，对待测样品中可能存在的H
5、PV 基因型进行PCR扩增并进行生物素标记，再将PCR扩增产物与固定在芯片上的23个特异性探针进行特异性的分子杂交，并通过化学显色方式判读结果( PCR-反向点杂交法) 流程：核酸提取PCR扩增导流杂交显色 结果：膜条显色直接提示感染的HPV亚型，23种亚型（18+5）（含其它HPV亚型） 主要问题：手工操作，易交叉污染，没有经过临床实验,HPVDNA检测,透景luminex,原理：流式荧光技术，PCR产物和微球上交联的探针根据碱基互补配对的原理杂交，加入荧光标记反应，最后在流式荧光检测仪上检测荧光信号。 流程：核酸提取PCR扩增微球杂交荧光标记反应荧光分析 结果：26种亚型（19+7），含其
6、它HPV亚型 主要问题：没有经过临床实验,HPV-DNA检测主要产品对比表,2012最新国际宫颈癌筛查指南,2012年刊登在美国癌症学会杂志(ACS)和美国阴道镜及宫颈病理学会杂志（ ASCCP） -宫颈癌预防及早期诊断指南,2012年，ACS/ASCCP/ASCP 最新指南 HPV联合细胞学筛查：30-65岁的妇女,Pap & HPV,ASC-US & HPV+ or LSIL,NILM & HPV+,Repeat co-test,HPV16 or HPV16/18 genotyping,Colposcopy,1 year,1 year,NILM & HPV- ASC-US & HPV-,C
7、olposcopy,5 years,+,-,+,5 years,-,Saslow D, et al. Am J Clin Pathol 2012; 137:516-42,Cytology alone is noted as an acceptable (but not preferred) option for women 30-65 yrs old every 3 years,immediately,旧指南与新指南的区别,19,1. ASC-US triage (21 years),2. Adjunct screening (30 years),ASC-US,HPV DNA,Colposco
8、py,Re-screen (LBC; 1 year),Negative Cytology (NILM),+,HPV DNA,+,+,HPV16/18,Colposcopy,Re-screen (LBC 1 year),+,Screen (3 year),Re-screen (LBC 1 year),Re-screen (LBC; 3 years *acceptable ORLBC and HPV; 5 years *preferred),Re-screen (5 years),co-testing (30-65 years),For women (30 65 yrs), cytology alone every 3 years is noted as an acceptable (but not preferred) option only,联合检测将是未来的筛查方向！,21,2012年起，国际ACS，ASCCP，ASCP指南一同建议 细胞学阴性、HPV16/18(+) 的女性应立即进行阴道镜检查,2012 ACS, ASCCP，ASCP Guidelines （美国癌症学会、美国阴道镜和宫颈病理学会，美国临床病理学会指南）,谢 谢！,
