1、牛肉膏蛋白胨培养基配方：牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。它含有牛肉膏、蛋白胨和 NaCl。其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而 NaCl 提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下 96时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。琼脂在 40时凝固，通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。由于这种培养基多用于 培养细菌（荤食） ，因此，要用稀酸或稀碱将其 pH 调至 中性或微碱性 ，以利于细菌的生长繁殖。牛肉膏蛋白
2、胨培养基的配方如下：牛肉膏 3g、蛋白胨 10g、NaCl 5g、琼脂 1520g、水 1000ml、pH 7476（7.08.0）三、器材牛肉膏，蛋白胨， NaCl，琼脂；1mol/L NaOH， 1mol/L HCl；试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，扭力天平，牛角匙，高压蒸汽灭菌锅，pH 试纸（ pH 55 90），棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。四、操作步骤1称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl 放入烧杯中。牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。也可放在称量纸上，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸
3、分离，然后立即取出纸片。蛋白胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。2溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。如果配制固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化的药品中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。最后补足所失的水分。3调 pH在未调 pH 前，先用精密 pH 试纸测量培养基的原始 pH 值，如果 pH 偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入 1mol/L NaOH，边加边搅拌，并
4、随时用 pH 试纸测其 pH 值，直至 pH 达76。反之，则用 1mol/L HCl 进行调节。注意 pH 值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响培养基内各离子的浓度。对于有些要求 pH 值较精确的微生物，其 pH 的调节可用酸度计进行（使用方法，可参考有关说明书）。4过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果的观察。一般无特殊要求的情况下，这一步可以省去（本实验无需过滤）。5分装按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装装置见图-1。分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。(1)液体分装分装高度以试管高度的 1/4 左右为宜。(2)固体分装分装试管
5、，其装量不超过管高的 1/5，灭菌后制成斜面，如图 -2 。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。(3)半固体分装试管一般以试管高度的 1/3 为宜，灭菌后垂直待凝。6加塞培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能（棉塞制作方法附本实验后面）。7包扎加塞后，将全部试管用麻绳捆扎好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明 培养基名称、组别、日期 。三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。8灭菌将上述培养基
6、以 105kg/cm2（15 磅/ 英寸 2），1213， 20 分钟高压蒸汽灭菌。如因特殊情况不能及时灭菌，则应放入冰箱内暂存。9搁置斜面将灭菌的试管培养基冷至 50左右，将试管棉塞端搁在玻棒上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。10无菌检查将灭菌的培养基放入 37的温室中培养 2448 小时，以检查灭菌是否彻底。PDA 培养基配方：特 点 及 用 途PDA 培 养 基 是 人 们 对 马 铃 薯 葡 萄 糖 琼 脂 培 养 基 的 简 称 ， 即 Potato Dextrose Agar （ Medium） ， 依 次 对 应 马 铃 薯 、 葡 萄 糖 、 琼 脂 的 英 文 。
7、 一 种 常 用 的 培 养 基 ， 宜 培 养 酵 母 菌 、 霉 菌 、 蘑 菇 等 真 菌 （ 素 食 ） 。 酵 母 菌PH（ 3.86.0） ， 霉 菌 （ 4.05.8） 等 。 按物理性状划分：固体培养基 ，按培养基成分划分：半合成培养基配 方马铃薯 200 克 葡萄糖 20 克 琼脂 1520 克 自来水 1000 毫升 自 然 PH配 制 步 骤其 做 法 是 称 取 200g 马 铃 薯 ， 洗 净 去 皮 切 成 小 块 ， 加 水 煮 烂 （ 煮 沸 2030 分 钟 ， 能 被玻 璃 棒 戳 破 即 可 ） ， 用 四 层 纱 布 过 滤 ， 再 据 实 际 实 验
8、需 要 加 葡 萄 糖 和 琼 脂 ， 继 续 加 热搅 拌 混 匀 ， 稍 冷 却 后 再 补 足 水 分 至 1000 毫 升 ， 分 装 试 管 ， 加 塞 、 包 扎 ， （ 121 ） 灭菌 20 分 钟 左 右 后 取 出 试 管 摆 斜 面 ， 冷 却 后 贮 存 备 用 。 其 他 事 项1.培 养 基 经 灭 菌 后 ， 必 须 放 在 37C 温 箱 培 养 24h， 无 菌 生 长 者 方 可 使 用 。 2.PDA 培 养 基 一 般 不 需 要 调 pH。 对 于 要 调 节 pH 的 培 养 基 ， 一 般 用 pH 试 纸 测 定 其pH。 如 果 培 养 基 偏
9、 酸 或 偏 碱 时 ， 可 用 lmol LNaOH 或 lmol LHCL 溶 液 进 行 调 节 。调 节 时 应 逐 滴 加 入 NaOH 或 HCl 溶 液 ， 防 止 局 部 过 酸 或 过 碱 破 坏 培 养 基 成 分 。 3.培 养 基 在 使 用 时 也 可 以 做 成 不 含 琼 脂 的 液 体 培 养 基 ， 用 于 菌 类 的 震 荡 培 养 。 4.培 养 基 也 可 以 加 入 氯 霉 素 或 土 霉 素 ， 加 入 量 为 0.1g/L 培 养 基 ， 主 要 是 为 了 抑 制 细 菌的 生 长 ， 减 少 干 扰 性高 氏 1 号 培 养 及 配 方 ：培
10、养 放 线 菌 用 ， 改 良 的 高 氏 可 溶 性 淀 粉 2g ， KNO3 0.1g ， K2HPO4 0.05g ， MgSO4 7H2O 0.05g ， NaCl 0.05g ， FeSO4 7H2O 0.001g （ 母 液 ） ， 琼 脂 2g ， 自 来 水 100mL ， pH 7.2 7.4 ， 灭菌 1.05kg/cm2， 20min 配 制 时 ， 先 用 少 量 冷 水 ， 将 淀 粉 调 成 糊 状 ， 倒 入 少 于 所 需 水 量 的 沸 水 中 ， 在 火 上 加 热 ，边 搅 拌 边 依 次 逐 一 溶 化 其 他 成 分 ， 溶 化 后 ， 补 足 水
11、分 到 100ml， 调 pH， 121 灭 菌20min。 高 温 灭 菌 后 ， 倒 平 皿 前 加 入 10%酚 2 滴 至 100ml 培 养 基 中 混 匀 ， 将 培 养 基 倒 入 平 皿 内约 15ml/皿 。 高 氏 1 号 ： 可 溶 性 淀 粉 （ 20g） ， KNO3（ 1g） ， K2HPO4（ 0.5g） ， MgSO4 7H2O（ 0.5g） ，NaCl（ 0.05g） ， FeSO4 7H2O（ 0.01g） ， 琼 脂 20g， pH=7.4-7.6 和 改 良 的 差 别 就 在 于 有 没 有 FeSO4 7H2O 高 氏 常 常 配 完 后 变 成 褐 色 也 是 由 于 Fe2+氧化 为 Fe3+的 关 系 ， 所 以 常 常 有 人 用 螯 合 的 FeSO4， 防 止 氧 化 。
