1、邻苯三酚比色法测定土壤多酚氧化酶活性试剂配制(1)1%邻苯三酚溶液 (2)乙醚。 (3)05N 盐酸。 (4)重铬酸钾标准溶液o75g 重铬酸钾溶于 1 升 0.5NHCl(相当于 50mI 醚中含 5mg 紫色没食子素)。(5)pH45 柠檬酸 磷酸缓冲液。标收曲线绘制：取重铬酸钾标准溶液，用o5N HCI 稀释成各种不同浓度。定容后，在分光光度计上于 430nm 处比色测定。以光密度位为纵坐标，以浓度为横坐标绘制标准曲线。2。投作步骤 取 1g 土样(过 o25mm 筛)，置于 50ml 三角瓶中，然后注入10ml 1邻苯三酚溶液，将瓶内含物摇荡后放在 30 度恒温掐小培养 2h。取出后加
2、 4mlpH 45 柠檬酸磷酸缓冲液，再加 35ml 乙醚，用力摇荡数次，萃取30min。最后，将含溶解的紫色没食子素的着色乙醚相进行比色。比色时用波长为 430nm 的滤光片。为防止因乙醚引起的误差，每比色一次用元水乙醇洗涤比色液槽一次。 为了消除土壤中原有的醚溶性有机物质而引起的误差及校正没食于酚的纯度，需设无基质的土壤和无土壤的基质作对照。在无基质的土壤的对照中，用水代替基质进行培养。3活性表示 紫色没食子索的量，根据用重铬酸钾绘制的标准曲线查知。多酚氧化的活性，以 2h 后 1g 土壤中紫色没食子素的毫克数表示。我不知道找个“紫色没食子素”是什么意思？是不是要找个试剂啊？我问了几个老师
3、，他们都没有听说过这个试剂。我的有的药品冯老师本来说他那有，可是我做的时候去找了，缺了几个，王老师说想办法买了，已经给李老师说了，买了后做，这几天榆林大风降温，那个移栽没有办法进行，上面红颜色的我不知道怎么做了，萃取不知道是萃取什么，看不太懂，还有测那个中性磷酸酶时的酚溶液是苯酚加水就可以了么？我这几天在图书馆查了很多资料，可是都没有啥结果（配制方法： 在大烧杯中加入 80mL 去离子水，再加入 300g 苯酚，在水 浴中加热搅拌、混合至苯酚完全溶解。将该溶液倒入盛有 200mL 去离子水的 1000mL 分液漏斗内，轻轻振荡混合，使其成为乳状液。静止 710 小时，乳状液变成两层透明溶液，下层为被水饱和的酚溶液，放出下层，贮存于棕色瓶中备用。）回复：没食子素就是邻苯三酚。紫色没食子素就是多酚氧化酶催化氯化没食子素生成的东西。乙醚萃取的时候会分层，之前不是加邻苯三酚了嘛，乙醚相中萃取出的多酚物质被邻苯三酚着色了生成紫色没食子素。萃取出来的成分就是你在 430nm 处测定的物质啊！
