PEI 转染 Protocol1. 转染前一天（24h 左右）胰酶消化细胞并计数，细胞铺板，使其在转染时汇合度为7090%。2. 转染前 1h，将细胞培养基更换为 Opti-MEM 或者 DMEM 基础培养基（若使用 Opti-MEM，PEI 转染效果更佳） 。3. 用一定体积的 Opti-MEM 稀释质粒，小心混匀，记为 A 液；用相等体积的 Opti-MEM 稀释 PEI，小心混匀，记为 B 液（质粒： PEI=1：2 ，W/W)，室温静止 5min。4. 将 B 液缓慢加到 A 液中并混匀，最好使用旋涡振荡器边加边震荡。然后室温放置20min。5. 将 DNA-PEI 混合液缓慢加入到细胞培养基中，轻轻混匀。6. 转染 4h 后更换为完全培养基。培养皿面积(cm 2) 转染 DNA 量（ug）稀释 DNA/PEI 的培养基体积（ul ）96 孔板 0.32 0.2 2548 孔板 1.1 0.5 3524 孔板 1.9 0.8 5012 孔板 3.5 1.6 1006 孔板 9.6 4 2506cm 平板 21.5 8 50010cm 平板 56.7 16 100015cm 平板 147 32 2000
